天津市河西区疾病预防控制中心（300211）高扬 尹啸冰

天津医院（300211）王彤

随着人们生活水平和健康意识的不断提高，食品安全逐渐得到关注，食源性病原菌为导致食品健康的关键问题，目前也引起医学界的高度重视[1]，加强食品安全监控，越来越受到各国卫生专家的重视。自1973年以来，关于食品安全中微生物的快速检验国际研讨会每3年举办一次。传统致病菌检测方法包括：生理检测、生化检测、血清水平检测等，但传统检测方法检测时间长、灵敏度低[2]。因此，应寻找一种操作简便、灵敏度高、检测速度快的检测方式，多重PCR检测为目前临床关注的焦点。多重PCR反应在相同反应体系中加入多种基因引物，经一次反应扩增多重目的基因，因反应体系不同引物及基因组的相互干预，必须经多重PCR体系优化，测定肠道病原菌种类，为临床诊断及治疗提供重要依据。研究显示[3]，多重PCR可快速、正确区分肠道致病菌，为临床诊断提供重要依据。本文通过应用PCR检测4种致病菌，讨论临床检测效果，现报告如下。

1 资料与方法

1.1临床资料 蜡样芽胞杆菌、普通变形杆菌和副溶血性弧菌来源于北京兰博瑞公司，大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特菌来源于疾病防控中心。试剂包括：营养琼脂培养基、PCR试剂、血平板培养基、革兰阴性增菌液培养基、溶菌肉汤培养基。仪器包括：离心机、梯度PCR仪、电泳仪、EC紫外成像系统。

1.2方法 ①菌株培养、DNA培养：应用营养琼脂培养基培养变形杆菌、大肠杆菌，置于37℃，可选择3个～5个菌种，菌种接种至LB液体培养基，其他菌株采用相同培养方式，在DNA提取过程中保证正规提取。……