王建荣 马传芳

摘  要：在进行硒酵母中硒含量测定方法研究的过程中，常用的测定方法主要有有机硒、总硒、无机硒等测定方法，在进行研究的过程中，相关人员要建立有机硒和无机硒的测定的方法，并且还要将有机硒和无机硒分离处理，采用透析的方法对其进行处理，对五种晒酵母采用不同的培养条件对其进行培养，才能为添加剂领域和医药领域的发展提供科学、合理的数据。

关键词：酵母;有机硒;无机硒

1 试验部分

1.1 主要仪器与试剂

Backman公司DU一7分光光度计1、2、3、4、5为5种不同含硒量的硒酵母在培养基中添加不同量的亚硒酸钠，接种酵母菌，在3O℃下培养48h而得。变色酸：0.03tool·L-1，称取变色酸1.0930g，定容至100ml。盐酸苯肼：0.03mol·L-1。称取0.4400g盐酸苯肼，定容至100ml。EDTA：0.02tool·L-1，称取EDTA钠盐0.7450g定容至100m|。氯酸钾：0.6mol·L-1，称取7.3500g氯酸钾。

1#、2#、3#、4#、5#为5种不同含硒量的硒酵母：在培养基中添加不同量的亚硒酸钠.接种酵母菌.在30°C下培养48h而得。

变色酸：0.03mol·L-1，称取变色酸1.0930g.定容至100ml。

盐酸苯肼：0.03mol·L-1，称取0.4400g盐酸苯肼，定容至100ml。

EDTA：0.02mol·L-1，称取EDTA钠盐0.7450g定容至100ml。

氯酸钾：0.6mol·L-1，称取7.3500g氯酸钾、定容至100ml。

HCI-KC1缓冲液：0.2tool·L，取浓盐酸2.50ml稀释至150ml;再取氯化钾2.2500g，定容至150ml，两者混匀。

亚硒酸标液：称取亚硒酸0.08167g，定容至500ml，然后再稀释500倍混合酸：浓硝酸400ml与高氯酸100ml，混匀。

1.2 分析方法

1.2.1 样品

消化称取硒酵母样品0.2g于锥形瓶中，加入混合酸lo～15ml，加热至发烟，待溶液变为淡黄色后，再加热2～3min，此时溶液变为无色，冷却后，定容，即可进行测定。

1.2.2 标准曲线绘制

分别取含硒0.2g·ml-1。的亚硒酸标准液，0，l，2，3，4，5ml于比色管中，加入EDTAlm1，缓冲液2m1，氯酸钾2ml，变色酸2ml，盐酸苯肼lml，加水至15ml，摇匀，在沸水浴中加热20rain，于冷水中冷却后.用lcm比色皿于520nm波长下测定吸光度，绘制标准曲线。……