翟 玲,夏 雨,杨艳芳,吴和珍,刘焱文,尤朋涛

(湖北中医药大学 中药资源与中药化学湖北省重点实验室,湖北 武汉430065)

鳖甲为鳖科动物鳖(Trionyx sinensisWiegmann)的背甲,具有滋阴潜阳、退热除蒸、软坚散结的作用。现代研究显示,鳖甲可预防或延缓早期肝纤维化的形成和发展[1],有抗肝纤维化以及抗肿瘤和免疫调节等作用,近年来鳖甲的药理研究也多集中在这些方面[2-3]。鳖甲富含多种常见的氨基酸[4],经煎煮后,起负抑制效应的大分子蛋白变性成为小分子肽类物质而发挥抑制肝星状细胞增殖作用[5]。动物药中蛋白、氨基酸的分析检测是迅速提升动物药研究水准和促进动物药资源开发利用的不二捷径[6],一种准确且恰当的分析方法是实现这一途径的前提。因此,探究测定鳖甲水溶性蛋白含量的方法对鳖甲药材的质量控制具有重要意义。当前有关鳖甲此方面的研究报道尚不多见。因此,本实验对其展开了初步研究。现代提取蛋白主要以有机溶剂和碱液为溶剂,产量虽高但对蛋白品质影响较大[7-8],而鳖甲的临床常用剂型为其水煎液。因此,本实验以水为溶剂。2015版《中国药典》共收载了6种测定蛋白含量的方法,其中Lowry(福林－酚试剂)法是蛋白中酪氨酸和色氨酸与试剂反应,受蛋白的氨基酸组成影响较大,双缩脲法本身灵敏度小且样品用量大,而本实验需得到准确高效的测定方法,但鳖甲水溶液中蛋白的具体组成成分尚不确定。因此,本研究采用其他4种不同的测定方法进行定量分析,以期达到实验目的。……