陆小玲

214500江苏省靖江市第二人民医院结核科，江苏镇江

耐多药结核分枝杆菌的出现为临床治疗结核病增加了难度，治疗结核的药物选择依赖于药敏试验结果，因传统药敏试验所需要的时间较长，临床医生多采用常规一线抗结核药物进行治疗，在经验治疗过程中耐多药结核分枝杆菌应用常规抗结核药物无效，最终导致病情延误[1]。临床中急需快速准确的药敏试验筛查耐多药结核分枝杆菌，从而尽早制定有效的临床治疗方案。Xpert MTB/RIF也被简称为Xpert法，是一种基因扩增技术，被用于检测结核分枝杆菌DNA 和利福平耐药基因，检测过程在一个反应盒中进行，检测时间均不超过2 h，能够有效提高利福平耐药性的特异性和灵敏度[2]。本次研究收集80 例痰标本培养检出结核分枝杆菌菌株，用Xpert MTB/RIF和药敏试验进行检测，以药敏试验作为金标准评价Xpert法检测耐药性准确性。

资料与方法

收集我院2017年8月-2018年12月进行痰培养检出结核分枝杆菌菌株80例。

仪器和试剂：采用Xpert MTR/RIF反应盒、GeneXpert检测系统、SR痰培养处理液，检测仪器为全自动分枝杆菌检测药敏系统，MGIT 分枝杆菌培养管，MGIT药敏试剂盒。

检测方法：采用Xpert MTB/RIF检测和结核液体药敏试验检测，比较2 种诊断检测方法对利福平耐药性阳性检出率的一致性，利福平耐药结核杆菌诊断指标的可行性。患者充分漱口后用力咳痰，收集下呼吸道痰液并及时送样检查，一式三份，分别采用抗酸染色涂片镜检、Xpert MTB/RIF 技术检测、罗氏固体培养法检测。抗酸染色涂片和罗氏土体培养检测相关试剂均由仪器供应商提供，并参考《结核病实验室标准化操作与网络建设》中的相关规程[3]，Xpert MTB/RIF 检测试剂由仪器厂家提供，参照说明书步骤严格操作。

临床观察：比较抗酸染色涂片镜检、Xpert MTB/RIF 技术检测、罗氏固体培养法检测利福平耐药性阳性检出率[4]。

统计学方法：数据应用SPSS 2.1软件处理；计数资料以[n(%)]表示，采用χ2检验；P＜0.05为差异有统计学意义。

表1 3种检验方法检出阳性率比较

结 果

80 份痰样本，抗酸染色涂片法检测，阳性率为31.25%；罗氏固体培养法检测，阳性率为37.5%；Xpert MTR/RTF法检测，阳性率为41.25%。Xpert MTR/RTF 法阳性检出率明显高于抗酸染色涂片法和罗氏固体培养法，差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

讨 论

肺结核为发病率较高的传染性疾病，全球的感染率和死亡率均较高，直接威胁人类健康和生命安全，是医学界关注的重点问题[5]。世界卫生组织在《全球结核病报告》中指出，我国肺结核患者数量在全球范围内较高，我国肺结核病的防治工作依然是我国公共卫生的重要部分。

结核分枝杆菌是导致结核病的主要病原微生物，其可侵犯全身各器官，以肺部感染患者数量最多。结核分枝杆菌的生长速度较慢，在感染后18 h 才能分裂一代，而大多数细菌在几分钟或几十分钟就可分裂一代，导致结核杆菌因起病较慢而被临床患者所忽略，结核杆菌这一特点为临床检验带来困难。目前对结核病检验的实验室方法多种多样，但临床检验效果并不一致，在《全国结核病防治规划》中指出[6]，通过应用新方法和新技术提高患者临床检出水平，对结核病的传播和疾病管理起到重要作用。目前结核病的诊断倾向于“眼见为实”的细菌学检查和影像学检查方法。抗酸染色镜检查是最基础和最有效的诊断方法，但是该种方法的灵敏度较低，一般在20%～30%；荧光染色法镜下检测的灵敏度较高，但由于检测仪器价格较昂贵不能在临床中广泛普及。涂片镜下检测方法的特异性和敏感性波动较大，无法区别死菌或活菌。罗氏固体培养检测法是目前结核病诊断的金标准，通常临床检测多采用涂片镜下检测方法作为临床用药依据，但是涂片检测培养时间较长，需要4～8 周才能得出结果，临床实用型较差，并且阳性率仅在40%左右。另外细菌学检查还对检测人员和环境的生物安全构成威胁。

近些年随着分子生物学技术的不断发展，该技术给结核病的检查带来了新方向，Xpert MTB/RIF 检测作为结核病的主要诊断方法，通过荧光定量PCR技术，实现对结核杆菌的快速检测并进行定量分析，并且对利福平耐药情况给予参考，整个检测结果在2 h 内完成，人工操作时间不超过5 min，并且检测均在密封环境中进行，减少了检测操作者和对环境生物性的影响，提高了检测安全性。本次研究结果显示，80 份痰样本，Xpert MTR/RTF 法阳性检出率明显高于抗酸染色涂片法和罗氏固体培养法。说明Xpert MTR/RTF法在肺结核快速诊断中具有较好的效果，并且阳性检出率高于抗酸染色检测方法。

综上所述，Xpert MTB/RIF 检测肺结核患者痰样本的敏感性较高，效果明显优于罗氏固体培养法和抗酸染色涂片法，利于临床诊断和治疗，值得在临床中广泛应用。