龚凤萍 上官端琳 竹 玮 段庆虎 张宗源 尹川川 易红岩 冉忠萍 张应香

（信阳市农业科学院，河南信阳464000）

灰树花是担子菌亚门的非褶菌目、多孔菌科、奇果属，俗称栗蘑，是一种名贵的食、药兼用菌[1]，其营养丰富，肉质鲜嫩，味如鸡丝，脆似玉兰，药用价值更高，富含硒等人体必需微量元素，尤其富含灰树花多糖（以β-葡聚糖为主），是一种极好的天然免疫调节剂，具有显著的防癌抗癌和改善健康功效，目前作为一种高级保健品风行日本、美国市场[2]。灰树花的食用及药用价值正引起人们广泛关注，市场需求量逐年上升，其市场前景广阔。

我国在20世纪80年代开始人工驯化栽培灰树花。目前已经形成浙江庆元第一季割口出菇、第二季脱袋覆土出菇和河北迁西的覆土出菇两种模式。有报道野生灰树花发生于夏秋间的栗树根部周围及栎、栲等阔叶树的树干及木桩周围[3]。豫南山区分布大量的壳斗科树种，每年的板栗树开花季节雨后在其根部能采到野生灰树花，说明豫南山区具有栽培灰树花的自然条件。同时，豫南山区栽培大面积板栗树，仅新县就有2万hm2。每年栗园改造、修剪产生大量废枝条等，为灰树花栽培提供了充足的原料。由此可见，豫南山区有着栽培灰树花气候条件和资源优势。为此笔者开展灰树花引种及比较试验，以期为当地灰树花栽培提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

供试灰树花菌株:从灰树花主产地河北迁西、河南省农科院（植物营养与资源环境研究所保藏）引进灰树花菌株5个，详见表1。

表1 各供试灰树花菌株及来源

母种配方:去皮马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，蛋白胨1.5 g，磷酸二氢钾2 g，硫酸镁 0.5 g，维生素B1 20 mg，加水1000 mL，pH 6.0。

原种配方:棉籽壳80%，麸皮17%，石膏1%，葡萄糖1%，硫酸镁1%。

栽培种配方:木屑45%，棉籽壳32%，麸皮15%，豆粉5%，糖1%，石膏1%，硫酸镁1%，料含水量50%～53%。

1.2 试验方法

1.3 拮抗试验及菌丝培养比较试验

供试灰树花菌株拮抗试验及菌丝培养试验参考文献[4]。将灭过菌的母种培养基在60～70℃时趁热倒入9 cm的培养皿中，冷却备用。用直径为0.5 cm的打孔器截取供试灰树花母种各一块，两两接种于培养皿中央，间距1 cm以上，封口置25℃培养。待两菌落长至一起1～2 d，观察菌落连接处有无拮抗线。同样挑取供试灰树花母种一块于培养皿中央，封口置25℃培养。待菌丝生长7 d后划线一次，培养14 d后第二次划线。用游标卡尺测定两次划线的间距（cm），除以培养天数即可得出各个供试菌株的菌丝日均长速。

1.4 栽培比较试验

2016年5月11日接种一批，2017年2月19日接种一批。栽培料配方参照栽培种配方。主料木屑、棉籽壳先预湿堆闷1～2 d，装袋前将麸皮等辅料拌入主料中混匀，调至培养料含水量50%～53%。拌料完毕立即装袋，栽培袋为规格20 cm×38 cm×0.005 cm高压聚丙烯袋。每个供试灰树花菌株接种20袋，三次重复。料装袋完毕后插入接种棒封口。袋肩料面离封口处留约1 cm空间，便于后期现原基。高压灭菌，126℃保持2.5 h。采用立体打穴接种，棉塞封口。接种后料袋置于23～25℃暗培养。保持发菌室内空气新鲜、氧气充足。

菌丝培养30～40 d基本发菌满袋，菌袋表面有白色菌膜表明菌丝达到生理成熟，此时加强通风和给予50 lx散射光刺激原基形成。当白色菌膜渐变成灰黑色隆起，开口催蕾。方法:一是用刀在原基形处划“V”或“X”形的刀口；二是直接将封口塞子拔掉或割掉。开口后覆盖地膜保湿，提高空气相对湿度到80%以上，温度20～23℃无光培养，使开口处菌丝复白，约7～10 d形成馒头状原基。当原基表面分泌淡黄色液滴并出现凹陷时，应当注意，不可将黄色液滴冲掉，否则子实体会停止发育。当子实体分化成珊瑚状小梗时可以进入出菇棚进行出菇管理。出菇要求空气相对湿度90%～95%，温度20～25℃，避免环境因素剧烈变化影响原基分化及其进一步生长。喷雾时尽量不要喷洒在子实体上，在走道或棚内空间喷雾增湿，地面喷水保湿。当菌盖边缘白色生长圈消失、背面出现小孔时表明子实体发育成熟，可以采收。在20～25℃的温度条件下从原基形成到子实体采收大约25 d。

观察记录灰树花菌丝长势（颜色、粗细、致密度等）、菌丝满袋时间、开口催蕾后染杂菌情况、现原基时间及子实体形态特征。

2 结果与分析

2.1 供试灰树花菌株拮抗试验结果

通过拮抗试验观察（表2），除了HSH4、HSH5之间无拮抗线外，其余均有明显的拮抗线，表明这两个菌株为同种异名。可以确定供试5个菌株实际为4个。

表2 供试灰树花菌株拮抗试验结果

2.2 供试灰树花菌株的菌丝长速、长势

由图1可看出，菌丝长速较快的是HSH6，日均长速为3.3 mm∕d，其次为HSH4，日均长速为 3.2 mm∕d，再次为HSH2，日均长速为 2.9 mm∕d，最慢的是HSH3，日均长速为2.0 mm∕d。菌丝长势（表2）:菌丝最为浓密、长势最强的是HSH6，尖端菌丝整齐、颜色洁白、浓密；其次是HSH4，尖端菌丝整齐、分叉较多、颜色白、较密；较差的是HSH2、HSH3，尖端菌丝较整齐，颜色较白、较稀疏。

由此可见，四个供试灰树花菌株中HSH6菌丝长势最好，长速最快；其次是HSH4；最差的是HSH2、HSH3。

表2 供试灰树花菌株菌丝生长情况

图1 供试灰树花菌株菌丝长速

2.3 供试灰树花菌株栽培试验结果

2016年栽培试验结果见表3。从表3可看出，4个菌株中表现最好的是HSH4，具有抗性强、易现原基的特性；其次是HSH2，虽然可以现原基，但是菌丝抗逆性较差，菌袋开口后有易感染杂菌的现象；HSH3、HSH6可能菌丝没达到生理成熟，在7月中旬没能现原基，到了8月因高温未能出菇。

HSH4菌株一潮菇平均袋产为143 g，HSH2一潮菇平均袋产量为122 g。所有供试菌株在出过一潮菇后因遇到高温天气，菌丝受高温热害，没能继续出菇。

2017年2月19日栽培试验结果见表4。由表4看出，HSH2菌丝长势较弱，开口催蕾时易感染杂菌，出菇较晚，头潮单袋产量为110 g，子实体覆瓦状，色泽灰黑色，菌盖边缘有一圈白色，菇形较好（图2）。HSH4菌丝抗性较强、长速快，菌丝满袋时间较HSH2提早近15 d。菌丝开口后易形成白色原基，且不易感染杂菌。产量上明显高于HSH2，头潮单袋产量为204 g。子实体呈灰白色，珊瑚状分支较多（图3）。HSH3、HSH6未出菇。

灰树花在分化阶段，光照不足、通风不良时子实体易出“菜花菇”（图4）。

出菇一潮后按照河北迁西模式进行覆土栽培管理。时值5月底高温天气，棚内温度接近30℃，出过一潮菇的菌袋已经出现吐黄水现象，菌丝抗性降低，覆土后透气性差，菌袋变软腐烂。

表3 供试灰树花菌株栽培试验出菇情况（2016）

图2 灰树花菌株HSH2子实体

图3 灰树花菌株HSH4子实体

图4 畸形灰树花

图5 单层地摆出菇

表4 供试灰树花栽培试验出菇情况（2017）

3 小结与讨论

试验结果表明，从生物学性状试验结果看，HSH6、HSH3菌丝长速快、长势强，但是两批栽培试验均不能正常出菇。康源春等对双孢蘑菇试验，初步得出菌丝生长强弱与其产量有一定相关性，但菌丝生长快、活力旺、抗逆力强的品种其产量并不一定很高[5]。HSH6、HSH3菌株菌丝长速快、长势强、其不出菇是否因出菇方式不适合或是其他原因还有待进一步研究。

栽培试验表明，HSH4适应性较强，开口后菌丝抗逆性较强，现原基袋数可达100%，子实体色泽灰白。管理上可较为粗放些，较稳产；HSH2菌袋开口催蕾时易染杂菌，现原基袋数在90%左右，因此，需要更精细管理，才能促其现蕾提高产量，但其子实体色泽灰黑色，菇形好，受市场欢迎。

观察发现，培养架外侧的菌袋袋口菌丝出现过早吐黄水现象，而培养架内侧的菌袋没有发现这种现象。说明灰树花发菌过程中需要完全黑暗，否则有散射光会促使菌丝过早由营养生长转为生殖生长，如果达不到催蕾环境条件要求，菌丝会出现吐黄水现象，易滋生杂菌，造成菌袋污染，影响后期出菇。

灰树花出菇管理最大难点是催蕾环节，这个环节掌握不好会造成不出菇导致绝收。割口出菇管理更为复杂，对环境要求很苛刻，温、光、湿、气有一个因素控制不好会出现菌丝变干，很难达到100%现原基。割口菌袋裸露菌丝抗性差易染杂菌。笔者发现利用棉塞（无棉盖体）封口或扎绳封口方式，当菌丝满袋袋壁出现白色菌膜时稍稍松开扎绳，或松动棉塞，增强袋口透气性，在袋内现脑状原基，进而分化成蜂窝状菇蕾。这种催蕾方式优点是，利用菌丝在微微透气后呼吸旺盛产生水气达到保湿作用，当温度在20～25℃时，10 d左右即可由白毛团形成原基。催蕾温度低于18℃以下灰树花较难形成原基，只有当脑状原基分化后，再进入出菇棚进行出菇管理，方可稳产。

豫南地区灰树花栽培头潮菇在开口保湿、加强光照和通风等条件下能正常现蕾、出菇（图5），但是如何能保证第二潮、第三潮菇高产还有待进一步探索。