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西瓜种质资源遗传多样性分析的 SSR核心引物构建与验证

2019-09-19张海英王慧郭绍贵任毅宫国义翁益群许勇

中国瓜菜 2019年8期

张海英 王慧 郭绍贵 任毅 宫国义 翁益群 许勇

目的与意义:西瓜作为重要的经济作物,在我国种植业结构调整和促进农民致富增收中发挥着重要作用。当前西瓜生产中种子质量问题比较突出和普遍,种子纯度不够和假种子坑农事件常有发生,严重干扰了种业的健康发展,也是对品种创新与知识产权保护的严重损害。常规的品种鉴定难以依靠品种形态特征进行准确、快速的品种鉴别。SSR技术具有共显性、重复性好等优点,但如果将基因组的所有SSR位点对供试种质一一进行分析,需要耗费大量的人力和物力。针对上述现有技术的问题,本研究将依据西瓜基因组序列开发一套SSR核心標记,可用于西瓜种质资源核酸指纹库构建和遗传背景等研究。

材料与方法:(1)供试材料为北京市农林科学院蔬菜研究中心的17份重测序材料和100份遗传背景清晰的育种材料。(2)SNP数据:利用Illumina GAII测序平台对东亚生态型西瓜自交系‘97103和其他16份材料进行全基因组测序和重测序,获得的相关数据。(3)西瓜SSR核心引物的开发策略:第一,依据覆盖整个基因组的近390万个SNP位点对17份重测序材料绘制SNP系统发育树。第二,以栽培种‘97103(东亚生态类型)和‘Sugarlee(美洲生态类型)为材料,利用西瓜高密度遗传图谱中双亲表现多态的704对SSR引物,获得在2个栽培种之间中具有多态性的78对SSR引物。第三,利用上述78对SSR引物对17份重测序材料进行扩增。在此基础上,不断调整各种引物组合,最终获得23对核心引物组合。……

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