冶 金，王美皓，敖慧娟，杨 琨，阿依木古丽，乔自林，柏家林*

（1.西北民族大学 生物医学研究中心/生物工程与技术国家民委重点实验室，甘肃 兰州 730030；2.西北民族大学 生物医学研究中心/甘肃省动物细胞技术创新中心，甘肃 兰州 730030；3.西北民族大学 生命科学与工程学院，甘肃 兰州 730030）

MDCK细胞系是由Madin和Darby于1958年从美国Cocker Spaniel母曲架犬的肾脏组织中分离培养所建立[1]，其在培养过程中合成紧密连接（tight junction, TJ）蛋白分泌至细胞表面形成单细胞层[2]，呈上皮样细胞形态学特征，通常为贴壁培养并且能连续传代。随着国内外大规模细胞培养技术的不断成熟和被应用，流感病毒疫苗的制备也逐渐由哺乳动物细胞系取代传统鸡胚为生产基质[3]，其中MDCK细胞由于对不同流感病毒株具有易感染、易培养、增殖快且病毒不易变异等特点[4]，被公认为是最适于流感病毒疫苗生产的重要细胞系之一[5]。

紧密连接是上皮细胞间的一种重要连接方式[6]，主要由TJ蛋白组成，负责调控细胞旁离子和溶质分子的跨膜运输以及维持细胞极性状态[7]，在细胞中最初发现紧密连接就是由于其可通过细胞旁路途径控制渗透作用[8]。1986年Steveson[9]首次发现与细胞紧密连接相关的蛋白ZO-1（zonula occludens-1，闭锁小带蛋白1），同时有研究发现在无紧密连接的非上皮细胞中也存在ZO-1蛋白的表达，与粘附连接直接相连[10]。上皮细胞中的ZO-1蛋白则通过跨膜蛋白连接至细胞骨架处[11]，在TJ蛋白的形成、维持上皮组织正常结构和功能以及调控细胞分化、增殖和迁移等生理活动中发挥重要作用[12]，与细胞成瘤性有着密切关系。……