胡德美 鲍泥满 郑霏艳

摘要：目的 探究三七蒸制、烘焙、油炸、砂烫四种炮制方法五种皂苷（R1、Rg1、Re、Rb1、Rd）含量的变化，以及相对于生三七多出来的色谱峰的分析。方法 利用高效液相分析三七不同炮制方法下的色谱峰的情况。结果 五种皂苷的含量下降程度比较为蒸制<油炸<砂烫;烘焙这种炮制方式，除了Rb1的量有所减少，其四种皂苷含量都有所增加;相对于生三七，图谱上明显增加的峰的个数及含量总体来说增加比较为砂烫>油炸>蒸>烘焙。结论 三七的炮制方法不同，化学成分的比例、结构也不同。

关键词：炮制;三七;化学成分

中图分类号：R285.5   文献标志码：A   文章编号：1007-2349（2019）07-0054-06

【Abstract】Objective： To explore the changes of the contents of five saponins （R1， Rg1， Re， Rb1， Rd） in steaming， baking， frying and sand-heating of Pseudo-Ginseng and analyze the chromatographic peaks of raw Pseudo-Ginseng. Methods： High-performance liquid phase analysis was used to analyze the peaks of Pseudo-Ginseng in different processing methods. Results： The reduction of the content of the five saponins was compared， steamed < frying < sand-heat< baking. In addition to the decrease in the amount of Rb1， the baking method increased the content of four saponins. Compared with raw Pseudo-Ginseng， the number and the content of the obviously increased peaks on the map generally increased to be sand-heat > frying > steaming > baking. Conclusion： The different processing methods of Pseudo-Ginseng have different proportion and structure of chemical components.

【Key words】Keywords： processing， Pseudo-Ginseng， chemical composition

三七为五加科植物三七Panax notoginseng（Burkill）F.H.Chen ex C.Chow & W.G.Huang的干燥根及根茎[1]。又名田七，主产于云南和广西。三七为我国重要的传统药物，也是历史悠久的天然资源。三七味甘，微苦，性温，归肝、胃、心、小肠经，具有止血、活血散瘀、消肿定痛的功效，被誉为伤科圣药，素有“金不换”、“南国神草”等盛名，又被现代中药学家称为“参中之王[2]。传统中医医药在遣药组方时非常讲究“药之生熟”，生熟用法不同且功效各异[3]。未经炮制过的三七为生三七，经炮制过的三七为熟三七。《本草纲目拾遗》首次记载了三七补益作用，熟三七在临床上主要用于由生血乏源、失血过多、肾精亏损、大病久治不愈等引起的血虚证，产后血虚和习惯性产后血晕等;也可用于身体虚弱，气血不足，症见面色苍白、头昏眼花、四肢无力、食欲不振[4-6]。三七的炮制方法传统资料记载有“蒸熟”和“油炸”两种[7]，通过查阅文献及其他中药炮制的借鉴，本文还增加了烘焙和砂烫这两种炮制方法。以期利用高效液相分析三七不同炮制方法色谱峰之间的区别，找出不同的炮制方法色谱峰的变化特征，为后续的化学及药理研究提供基础。2015版《药典》[8]三七的高效液相质量控制只以三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1这三个成分为指标，本实验用高效液相法同时测定五种皂苷类成分（三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd），既很好的区别三七与人参、西洋参，又更加充分地评价三七。

1 材料与方法

1.1 药品 三七，购自云南省昆明市官渡区土中药材批发行，经云南中医药大学中药学院炮制中心赵荣华教授鉴定为五加科人参属植物三七Panax notoginseng（Burkill）F.H.Chen ex C.Chow & W.G.Huang的干燥根及根茎。

1.2 试剂 甲醇（购自天津市风船化学试剂科技有限公司），乙腈（购自MREDA TECHNOLOGY INC，MADE IN USA），娃哈哈纯净水，除乙腈为色谱纯外，其他均为分析纯。三七总皂苷标准品，（购自国家药品生物制品检定所，批号：110870-201002）。

1.3 仪器 Agilent 1260系列高效液相色谱仪，VWD紫外检测器，Chemstation化学工作站;水浴锅（型号：HH-6，国华电器有限公司）;十万分之一天平（型号AB265-S，瑞士梅特勒-托利多公司），色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18（4.6 mm×250 mm，5μm），水浴锅（型号：HH-6，国华电器有限公司），温度计（购自testo，型号905-T1），电热鼓风干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司），微波爐（红番茄，型号HK-0905A2T），沙子（河沙），油（金龙鱼调和油）。

2 样品的制备

2.1 供试品溶液的制备 精密称取三七粉末600 mg，置250 mL圆底烧瓶中，加入50 mL甲醇溶液，80℃回流2h，放冷，补重，摇匀，静置后用0.45μm滤膜过滤，取续滤液[9]。

2.2 对照品溶液的制备 按照2015版《药典》要求，三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1三者含量不低于5.0%。配三七总皂苷对照品溶液，以Rg1的浓度为0.4 mg/mL标准。精密称量0.1429 g的三七总皂苷，置于10 mL的容量瓶，加甲醇定量至10 mL，得到三七总皂苷溶液浓度为1.429 mg/mL。其中五种皂苷成分的浓度为三七皂苷R 10.099 mg/mL、人参皂苷Rg1 0.400 mg/mL、人参皂苷Re 0.054 mg/mL、人参皂苷Rb1 0.424 mg/mL、人参皂苷Rd 0.104 mg/mL。

3 色谱分析

3.1 色谱条件 色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18（4.6 mm×150 mm，5μm）;流动相：乙腈-水，梯度洗脱，梯度见表1;柱温：20℃;进样量：10μL;流速：1 mL/min;检测波长：203nm[10]，结果见表1。

3.2 线性关系考察 精密吸取三七总皂苷对照品溶液4、6、8、10、12、14 uL，根据表1色谱条件测定峰面积，以进样量（ug）为横坐标，以峰面积為纵坐标，得出五种皂苷成分的回归方程、相关系数与线性范围见表2。五种皂苷的回归曲线、回归方程、线性相关系数、以及线性范围见图1-图5。

通过以上线性关系可以看出，通过此方法测定三七的五种皂苷含量，数据相关性较好，说明该方法用于测定和评价三七的五种皂苷含量可行。同时，将生三七的三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的峰面积代入回归方程，可以得出三种皂苷的含量为8.10%，符合药典对三七质量标准要求。

4 三七不同炮制品的制备及图谱的比较

4.1 三七的炮制 蒸制：常温蒸制6 h，切片，干燥，打粉，过80目筛;油炸：用植物油炸至表面呈金黄色，冷却，打粉，过80目筛;砂烫：将片状三七砂烫至表面呈金黄色，打粉，过80目筛;烘焙：将生三七粉用微波炉中档烘焙至三七粉散发独特香味。

4.2 三七及不同炮制品材料图 见图6-图11。

4.3 四种炮制方法的供试品制备 分别准确称量0.6 g四种炮制三七粉及生三七粉，按照2.1供试品溶液的制备方法，并且以3.1色谱条件进样分析，得出四种炮制方法和生三七的五种皂苷峰面积如表3。

4.4 四种三七炮制方法的HPLC图谱分析与比较 见图12-图21。

5 讨论

由图（6-11）可以看出，与生三七比较，炮制品的外观颜色都有所变化，砂烫和油炸的三七表面都呈金黄色，而烘焙品和蒸制品的颜色与未炮制的三七粉比较，颜色稍微加深。

从五种皂苷含量来分析，由表3可以看出，和生品比较，四种炮制方法里除了烘焙方法，其他三种炮制方法的五种皂苷含量均有所下降，且下降程度为砂烫>油炸>蒸。而烘焙与生品比较，除了Rb1有所下降，其他均有所升高。

从新产生的成分来分析，由图（12-21）可以看出，峰的个数及含量总体来说增加比较为砂烫>油炸>蒸>烘焙。发生这一现象的原因可能是加热温度不同而导致，温度越高，变化越显著。其次，还发现了烘焙与油炸这两种炮制方法较其他炮制方法更有意义的地方，在Rb1出峰之后与Rd出峰之前的这段时间段，新产生的成分以及原有成分的变化较明显，这些变化有待进一步的深入研究。

熟三七在临床上的应用还不普及，物质基础研究得并不深入，本实验初步探索出三七不同的炮制方法化学成分的区别，为后续熟三七的研究可提供一定的指导和选择，以期在熟三七化学成分及药理作用方面都有更加深入和全面的研究。

参考文献：

[1]董大伟，胡海涛，孙莉君，等.三七的来源与伪品鉴别[J].黑龙江医药，2012，25（3）：457-458.

[2]林景超，张永煜，崔健，等.我国三七产业的发展现状及前景[J].中国药业，2005，14（2）：18.

[3]武双，崔秀明，郭从亮，等.三七“生打熟补”物质基础及药理作用研究进展[J].安徽农业科学，2015，43（8）：50-53.

[4]徐冬英.三七补益功效考[J].中药材，2002，25（12）：906-908.

[5]田华咏，瞿显友，熊鹏辉.中国民族药炮制集成[M].北京：中医古籍出版社，2000.

[6]徐冬英.三七补益功效考[J].中药材，2002（12）：906-908.

[7]广西壮族自治区卫生厅编.广西中药炮制规范[M].南宁，广西人民出版社，1985：18.

[8]国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）[S].北京：中国医药科技出版社，2015：11.

[9]周新惠，赵荣华，张荣平，等.三七不同加热炮制品中五种种皂苷类成分的含量测定[J].云南中医学院学报.2013，36（6）：11-13.

[10]周新惠，赵荣华，张荣平，等.三七不同加热炮制品中五种种皂苷类成分的含量测定[J].云南中医学院学报.2013，36（6）：12-14.