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载VEGF和BMP-2的PDLLA涂层螺钉治疗股骨颈骨折的实验研究

2019-08-12刘小翠丁佳骏刘圣珺梁素萍徐佳依李增春

医学研究杂志 2019年6期
关键词:实验

韩 宁 刘小翠 丁佳骏 刘圣珺 梁素萍 徐佳依 李增春

股骨颈骨折约占全部骨折总数的3.58%,且发生率日益增高,预计到2025年,全球股骨颈骨折数量将突破400万例[1]。而股骨颈骨折临床治疗中的骨折不愈合和股骨头缺血坏死,常导致患者病残[2,3]。

目前,解剖复位股骨颈骨折并加压固定骨折端已经形成共识[1]。早期骨折复位有助于恢复因骨折而扭曲的残存股骨头血供;牢固的内固定可避免骨折端再次移位造成血供破坏,为微血管的再生爬行提供良好环境[4,5]。但股骨颈骨折术后骨折不愈合发生率仍高达10%~30%,股骨头缺血性坏死发生率约为15%~30%[6]。血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是一种特异性促血管内皮细胞增生及血管生成因子,对血管再生起着关键性作用[7,8]。骨形成蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP-2)被认为是活性最强的唯一能单独诱导成骨的因子,在骨的生长和损伤修复中发挥重要作用[8]。因此,笔者在内固定表面制备具有生物活性的BMP-2和VEGF涂层,诱导股骨颈骨折端和股骨头内微血管和新骨形成,促进股骨颈骨折愈合避免股骨头缺血坏死。

材料与方法

1.材料:新西兰大白兔和昆明小鼠由同济大学动物中心提供。高糖DMEM培养基购自美国Gibco公司,胎牛血清购自以色列Beit Haemek有限公司,含0.02%EDTA的0.25%胰蛋白酶(美国Gibco公司),人重组VEGF和人重组BMP-2标准品(美国Sigma公司),培养瓶,24孔板(美国Corning公司),紫外光分光光度仪(德国Eppendoff公司)。

2.PDLLA涂层的体外释放检测:聚消旋乳酸[poly(D,L-lactide),PDLLA]以50mg/ml的浓度在室温下溶解在有机溶剂乙酸乙酯中。100μg人重组VEGF和100μg人重组BMP-2标准品分别混匀于5ml PDLLA溶液中,充分浸泡无菌直径3.5mm不同长度的钛合金螺钉并在无菌层流条件下风干,此过程重复两次。……

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