牛冬梅，徐红静，周万青，章金春

（1.南京中医药大学第三附属医院 南京市中医院检验科，江苏 南京210001；2.南京大学医学院附属鼓楼医院微生物室，江苏 南京210008）

肠球菌属（Enterococcus）是院内感染的重要致病菌，可引起尿路感染、皮肤软组织感染、腹腔感染、心内膜炎和脑膜炎等，已成为致血流感染第二位的革兰阳性球菌［1］。肠球菌感染的致病机制复杂，其中毒力基因是主要的原因之一［2］。肠球菌毒力基因及其蛋白物质主要有聚集物质、表面蛋白、透明质酸酶、细胞溶解素、明胶酶、胶原黏附蛋白等，均在其致病中起着重要作用［3］。而细菌生物膜的形成可以阻碍或延迟细菌与抗生素接触，降低肠球菌对药物的敏感性，致使感染难以治愈［4］。对于血流感染肠球菌毒力基因及其与生物膜形成的相关研究较少［5］。本文通过对血流感染肠球菌毒力基因分布、生物膜形成能力进行检测，为了解毒力基因及生物膜形成在肠球菌致病机制作用研究提供依据。

材料和方法

1 菌株来源

收集南京大学医学院附属鼓楼医院2014年至2017年临床血培养分离非重复肠球菌86株，为使用Vitek 2 Compact全自动微生物分析仪鉴定到的菌种。包括42株粪肠球菌和44株屎肠球菌。质控菌株为粪肠球菌（ATCC 29212）和金黄色葡萄球菌（ATCC 25923）均为南京大学医学院附属鼓楼医院微生物室保存的菌株。

2 仪器和试剂

Vitek 2 Compact及配套GP鉴定卡、GP67药敏卡（法国梅里埃公司）；2×Taq Mix（DBI公司）；PCR引物由上海生工公司合成；PCR扩增仪（PE公司）；琼脂糖干粉（法国Biowest公司）；100 bp DNA Marker（大连Takara公司）；胰蛋白胨大豆肉汤、胰蛋白胨大豆琼脂（青岛海博生物技术公司）；……