贺丽娜，胡杨志，周 轩，胡志立

湘南学院附属医院胃肠外科 湖南郴州 423000

胃癌是一种常见的起源于胃黏膜上皮的消化系统恶性肿瘤，其发生是一个多步骤、多因素、多阶段的发展过程，涉及一系列癌基因、抑癌基因、转移相关基因等的表达[1]。PROX1是一个能够调控细胞分化发育的转录调控因子，在人类肝脏、神经元等的发育过程中至关重要[2]。目前的研究[3-5]显示，PROX1在肺癌、肾癌等肿瘤组织中高表达，而在原发性肝癌等肿瘤组织中表达下调，说明其在不同的肿瘤组织中可能发挥不同的作用。研究[6]显示，PROX1可以正调控肾癌细胞的生长和迁移。有研究[7]报道，PROX1在胃癌组织中的表达水平高于癌旁组织，并且其表达水平的高低与胃癌的病理分期、转移等具有相关性。本研究观察了沉默PROX1表达对胃癌AGS细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响，为靶向基因治疗胃癌提供新途径。

1 材料与方法

1.1细胞及主要试剂胃癌AGS细胞购自美国ATCC公司，以含体积分数10%胎牛血清的DMEM培养，以2.5 g/L的胰蛋白酶消化传代；反转录试剂盒购自大连TaKaRa公司；兔抗基质金属蛋白酶-2(MMP-2)抗体、兔抗基质金属蛋白酶-9(MMP-9)抗体、兔抗PROX1抗体购自南京安研生物科技有限公司；兔抗上皮性钙黏附素(E-cadherin)抗体、兔抗波形蛋白(Vimentin)抗体购自美国LifeSpan Biosciences公司；PROX1、β-actin引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成；PROX1 siRNA和阴性对照慢病毒GV118购自广州辉骏生物科技有限公司。

1.2实验分组将AGS细胞按照每孔2 000个细胞接种到96孔板内，孵育培养1 d后，将细胞分成空白对照组、阴性……