陈文涛　陈如意　卢文兵　何艳峰　呼凤丽

摘要：为监测天门市活禽调运禽流感免疫情况和病毒的分布状况，对该市辖区2018年8月至12月调运送检的禽类养殖场样品，采用血凝抑制试验检测禽流感H7亚型、普通PCR技术检测禽流感通用型及H5、H7亚型，并进行统计学分析。结果共检测1 830份血清和对应的禽拭子，样品来源于61个养殖场， 禽流感H7亚型免疫阳性率按禽种类分类分别是种鹅100%、蛋鸡90.52%、蛋鸭33.00%;禽流感通用型及H5、H7亚型的病毒核酸阳性率分别为0.18%、0.00%、0.00%。表明该市活禽调运中，水禽禽流感H7N9的免疫抗体群体合格率低，有禽流感通用型病毒存在。加强水禽调运前免疫、运输车辆消毒及宣教工作是预防和控制H7N9禽流感在流通环节发生的有效手段。该结果为及时发现疫情隐患和防控薄弱环节提供了指导依据。

关键词：禽流感;调运;抗体阳性率;防控;天门市

中图分类号：S858.3        文献标识码：A        文章编号：1007-273X（2019）06-0005-02

随着社会的高速发展，人们的生活水平有了很大的提高，对膳食的要求也越来越高，这在很大程度上促进了活禽的调入和调出。禽流感是禽流行性感冒的简称，属于RNA病毒的正黏病毒科，依据其外膜血凝素（H）和神经氨酸酶（N）蛋白抗原性的不同，H又可分为16个亚型（H1-H16）、N分9个亚型（N1-N9），是引起禽业重大经济损失的主要动物疫病之一，高度重视其免疫情况和病毒分布情况是必不可少的监测环节和防控该病的重要手段。因禽流感H5、H7、H9可以传染人，湖北省2017年秋季开始接种H7N9疫苗预防禽流感的发生与传播。本研究通过评估调运期间家禽H7亚型禽流感疫苗的免疫效果和病毒的分布状况，可为及时发现疫情隐患和防控薄弱环节提供理论依据。

1  材料与方法

1.1  免疫疫苗

新禽二联，批号2018016，哈尔滨维科生物技术开发公司;H5+H7二价灭活疫苗，批号：201898，中国农业科学院哈尔滨兽医研究所。

1.2  试验材料

样品：天门市辖区2018年6～12月调动送检40个规模养鸭场、19个规模养鸡场、2个规模养鹅场。每个禽类养殖场30份血清和30份禽拭子。

1.3  檢测方法及试剂

血清学检测方法采用血凝抑制试验（HI），检测血清中H7亚型禽流感病毒血凝素抗体，具体操作参照《高致病性禽流感诊断技术》（GB/T 18936-2003），检测试剂为H7亚型禽流感抗原（生产批号：2018001），由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所提供。

病原学检测方法采用RT-PCR试验，检测禽拭子中禽流感病毒HA基因片段核糖核酸，阳性样品进一步做H5、H7亚型分型检测，具体操作参照《禽流感病毒RT-PCR检测方法》（NY/T772-2013），检测试剂为禽流感通用型RT-PCR 病毒试剂盒、禽流感H5亚型RT-PCR 病毒试剂盒、禽流感H7亚型RT-PCR 病毒试剂盒，均购自北京世纪元亨动物防疫技术有限公司（生产批号：AI20180910P）。

1.4  试验家禽分组

不同种类的家禽（鸡、鸭、鹅等）各分为一组。

2  结果与分析

2018年8～12月对天门市活禽调运开展了H7亚型禽流感血清学和禽流感通用型及H5、H7亚型病原学监测，共检测各类样品3 660份，其中血清学样品1 830份。检测H7亚型禽流感抗体阳性数972份，抗体阳性合格率53.11%，低于70%的合格标准。具体结果见表1。

蛋鸡场血凝抗体效价在7～10 log2滴度区间内，蛋鸭场血凝抗体效价在4～7 log2滴度区间内，种鹅场血凝抗体效价在4～7 log2滴度区间。具体结果见表2。

病原学样品1 830份，检测禽流感通用型病毒核酸阳性数5份，对这5份阳性样品进一步做H5、H7亚型分型检测，结果全部阴性。病毒核酸阳性率分别为0.18%、0.00%、0.00%。检测群体61个，免疫抗体群体合格数26个，群体合格率42.62%，群体合格率排序为种鹅场>蛋鸡场>蛋鸭场;禽流感通用型病毒核酸阳性群体数2个，均来自2个蛋鸭场，群体阳性率3.28%。具体结果见表3。

3  讨论与结论

（1）活禽调运期间淘汰的蛋鸭免疫抗体水平明显低于产蛋期，原因可能是活禽要进入销售环节时，大部分都是免疫时间过长，随着时间推移，免疫抗体水平已降低。而蛋鸡免疫效果很好，抗体阳性率为90.52%，比蛋鸭高57.52个百分点。说明不同种类的家禽对疫苗的敏感性不一致，免疫保护期存在一定的差异。在实际调运前可以对蛋鸭加强免疫，增加其抗体水平，延长保护期，这是预防和控制H7N9禽流感在流通环节发生的有效手段之一。

（2）从血清学监测结果看，抗体阳性蛋鸡场血凝效价在7～10 log2滴度区间内，高于蛋鸭场（4～7 log2）和种鹅场（4～7 log2）。HA抗体水平越高，家禽对病毒感染的抵抗力越强。

（3）通过病原学检测在蛋鸭的拭子中检出2个场禽流感通用型核酸阳性，从地理分布看2个阳性场均位于本市北部，这里有众多的河流、湖泊、滩涂，是天然的水禽养殖场，并常有侯鸟迁移，由于禽流感病毒在不同物种之间传播，通过侯鸟传染水禽、人的风险越来越高，因此对侯鸟迁移地水禽养殖场应设置固定监测点，定期送样进行血清学和病原学检测，及时补免，对发现的禽流感疫情马上处置，遏制疫病的暴发和流行。

（4）随着养殖模式向规模化、集团化发展，跨省调运活禽会越来越多。农业部最新发布的《动物跨省调运监督管理办法》指出：调查显示70%的动物疫病发生都与动物的移动相关。本次检出禽流感通用型阳性样本虽然不是H5、H7高致病性的，但针对禽流感病毒变异性特点，要引起同样的重视。对运输车辆、工具进行彻底消毒，同时做好记录备案人员宣教工作。