李友英，蓝岚，程川，尼玛央宗，张康林，贺安祥

（四川省甘孜藏族自治州畜牧业科学研究所，四川 康定 626000）

四川省甘孜藏族自治州（简称甘孜州）是川西北牧区的重要组成部分，全州辖18个县，其中石渠、德格、白玉、色达、理塘为五大牧区县。牦牛是甘孜州养殖业的主要品种，牦牛产业的合理发展，有利于牧民经济收入的增长[1-3]。牦牛寄生虫病种类繁多，线虫、吸虫、绦虫、球虫等肠道寄生虫较为常见[4]。粪检法是较为传统的肠道寄生虫病检查方法，方法简单，易实施，一般不出现假阳性[5]。2018年农业农村部向甘孜州下达了动物疫情监测与防治任务，其中包括寄生虫病监测与防治。本研究对甘孜州牦牛常见肠道寄生虫病的感染情况进行了调查，旨在摸清该地区的寄生虫感染率及感染强度，为该病的综合防治提供参考依据。

1 调查内容及方法

1.1 样品采集 牦牛粪便样品采自甘孜州石渠、德格、白玉、色达、理塘五大牧区县，每个县选取4个乡，每个乡随机采集50份新鲜粪便样品，共采集1 000份。样品来源相关信息见表1。

方法：早上7：00～8：00，对牦牛排出的新鲜粪便进行采集。戴上PE手套，拨开牦牛新鲜粪便的表面，取中心部分，采集50～100g粪便装入自封袋中，密封并编号。所有样品采集完后于4℃冰箱保存，运回实验室待检，在12h内完成检测。

表1 样品采集地信息

1.2 虫卵检测

1.2.1 粪便预处理 从每份样品中取约20 g粪便，加入1～2倍自来水浸湿，用玻棒充分搅匀，制成混悬液，适量添加自来水，用60目筛过滤到500 mL烧杯中，除去杂质，将自来水加满烧杯搅匀，静置1 h，弃上清液，留沉淀物备用。

1.2.2 离心沉淀法 在上述粪便预处理得到的沉淀物中加入2～3倍自来水搅匀，过80目筛，滤入100mL烧杯中充分搅拌。取8 mL混悬液加入10 mL离心管中，加盖后混匀，2500r/min离心3min，用吸管吸去上清液，保留底层沉淀，加2～3滴自来水重悬，吸取1滴混悬液于载玻片上，加盖玻片后在10×与40×物镜下镜检。

1.2.3 饱和食盐水漂浮法 将1.2.2镜检剩余的混悬液中加饱和食盐水8 mL，2 500 r/min离心3min，再用吸管加满饱和食盐水至试管口，形成向上的半月面，其上放置盖玻片，使盖玻片接触液面，静置10～15min后，移开盖玻片，置于载玻片上，在10×与40×物镜下镜检。

1.3 统计处理 用IBM SPSS Statistics 20对所有数据进行方差分析和多重比较。

2 调查结果

2.1 牦牛肠道寄生虫虫卵形态 在牦牛粪便虫卵检测中，发现了线虫、吸虫、绦虫及球虫等几种肠道寄生虫虫卵，经形态学加以鉴别，结果见图1。

图1 几种虫卵形态图（10×40）

2.2 五个牧区县牦牛4种肠道寄生虫虫卵的感染率 结果见表2。从表2分析可得，各个县不同肠道寄生虫的感染率均有差异，同一县不同肠道寄生虫的感染率也有差异。石渠、德格、白玉、色达、理塘五个牧区县的总感染率分别为87.0%、84.5%、72.5%、79.5%、75.0%。各县的线虫感染率均较高，显著高于球虫的感染率（P＜0.05）。

表2 牦牛4种肠道寄生虫虫卵的感染率

2.3 五个牧区县牦牛4种肠道寄生虫虫卵的感染率比较 结果见图2。五个牧区县线虫、吸虫、绦虫、球虫的总感染率分别为54.8%、33.8%、33.5%、18.7%（据表2计算而得）。其中，线虫感染率最高，绦虫与吸虫次之，球虫最低。

2.4 五个牧区县牦牛4种肠道寄生虫虫卵的混合感染情况 结果见图3。各县总体感染率均超过50%（见表2），石渠县与德格县的总感染率显著高于其余三县（P＜0.05）；总混合感染率为79.7%，主要以单独感染和两重感染为主，占总感染率的81.05%。

图2 牦牛4种肠道寄生虫虫卵的感染率比较

图3 牦牛4种肠道寄生虫虫卵的混合感染率

3 讨论

3.1 传统粪检法的改良 牦牛粪便不同于普通牛粪，杂质多且不容易沉淀，镜检视野不清晰，容易误判。本试验加大了溶解粪便的水量，将20g粪便加水经60目筛过滤后，用500mL水溶解，静置沉淀，再经80目筛过滤，结果得到了较为清晰的视野。

3.2 牦牛体内寄生虫的感染情况 贺飞飞等[5]对青海省兴海县牦牛寄生虫的流行情况进行调查，结果显示：牦牛体内寄生虫的种类以线虫、绦虫、吸虫、球虫为主。因此，本次调查也以线虫、绦虫、吸虫和球虫这4种常见肠道寄生虫为调查对象。结果表明，五个牧区县牦牛肠道寄生虫的总体混合感染率为79.7%，石渠、德格、白玉、色达、理塘五县的总感染率分别为87.0%、84.5%、72.5%、79.5%、75.0%；线虫、吸虫、绦虫、球虫的总感染率分别为54.8%、33.8%、33.5%、18.7%。线虫感染率低于贺飞飞等[5]报道的青海省兴海县牦牛寄生虫的感染率；绦虫感染率高于吉尔格力等[6]报道的新疆和静县牦牛寄生虫的感染率。

五县总的一重、二重、三重、四重感染率分别为43.1%、21.5%、11.8%、3.3%，可见单独感染率最高，二重感染率稍高，三重感染率偏低，四重感染率最低。各县牦牛寄生虫的混合感染情况均有差异，石渠县与德格县的总感染率显著高于其余三县（P＜0.05）。

4 调查结论

本次调查显示，牦牛体内以线虫的感染率最高，绦虫与吸虫次之，球虫最低，感染率均偏高。混合感染主要以单独感染和两重感染为主，感染率高，感染强度大。虽然近两年，政府及当地畜牧兽医部门加强了对牦牛寄生虫的药物防治，寄生虫感染情况有所改善，但是受养殖区域、养殖方式、传统习俗等因素影响，防治工作还存在缺少连续性、各部门协调配合不足等问题，导致牦牛体内寄生虫的感染率仍然很高。笔者认为，牦牛寄生虫防治工作需要因地制宜，科学合理，不断完善，并必须确保连续性。