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表没食子儿茶素没食子酸酯对病毒性心肌炎小鼠的心肌保护作用

2019-07-05易世江王野峰

实用临床医药杂志 2019年12期
关键词:小鼠血清

曾 闵, 陈 智, 易世江, 王野峰, 王 勋

(1. 湖南省儿童医院 心血管内科, 湖南 长沙, 410007; 2. 桂林医学院, 广西 桂林, 541001)

病毒性心肌炎是主要由嗜心肌性柯萨奇病毒感染引起的心脏病,其主要的病理表现为心肌的变性、坏死及炎性细胞的浸润。该疾病致死率较高,临床可表现为严重的心律失常、心源性休克甚至猝死[1]。目前该病的发病机制尚不明确,可能与氧化损伤、免疫损伤以及自噬有关[2-3]。表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是绿茶茶多酚的主要活性成分,研究[4]显示其具有抗病毒、抗肿瘤、抗炎及抗氧化等重要的作用。本研究探讨EGCG对病毒性心肌炎是否具有保护作用,现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验材料

BALA/C雄性小鼠(SPF级)购自桂林医学院实验动物中心,柯萨奇病毒V3(Nancy 株)购自桂林医学院, EGCG(Sigma), 紫外分光光度仪(产地: 上海; 型号: ZF-7), 肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白T(cTnT)试剂盒购自南京建成生物研究所。

1.2 实验方法

选取45只雄性BALA/C小鼠, 6周龄,体质量(21.00±1.80) g, 随机分为正常组、对照组及EGCG组,每组15只。对照组、EGCG组小鼠腹部消毒后腹腔注射0.1 mL柯萨奇病毒B3(CVB3)病毒液。接种成功后, EGCG组予以EGCG 100 mg/(kg·d)灌胃处理,对照组予以同体积的生理盐水灌胃。正常组小鼠腹腔注射同等体积生理盐水。给药持续10 d后摘除眼球并取血,检测血清cTnT、CK-MB的水平。处死动物,取出小鼠心脏,吸水滤纸吸干水后,石蜡包埋,HE染色观察心肌细胞及周围组织变化情况。

1.3 心肌病理观察及评分

将包埋的石蜡心脏组织标本切片HE染色后,由2位有经验的医生阅片,并依据参考文献[1, 5], 根据各心脏切片细胞浸润及心肌坏死百分比评估严重程度,其中0为无病变, +为<所累及心肌的25%;为25%~<50%;为50%~75%;为>75%。……

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