闵朝

【摘 要】酸碱去除血液制品中热原的工艺，操作方便、简单，一直在血液制品领域广泛使用。可以说，处理血液制品中热原是一个非常重要且复杂的问题。多年来，很多单位都在利用各种方法对热原进行处理，都在积极探索酸碱处理去除血液制品中热原的工艺，通过调整高热原制品的PH、离子强度、蛋白浓度等参数，来实现在不同的温度条件下来观察热原的种种变化。通过研究表明：酸碱处理是去除血液制品中热原较为科学、有效的方法。

【关键词】酸碱处理；血液制品；热原；免疫球蛋白

一、引言

各种人血浆蛋白制品统称为血液制品，其中包括人胎盘血白蛋白、人血白蛋白、静脉注射用人免疫球蛋白、肌注人免疫球蛋白、组织胺人免疫球蛋白等等。健康人血浆是血液制品的原料，人血浆中的水份占有92%左右，而蛋白质则占有7%-8%，蛋白质通过分离提纯制成了血液制品。自然环境中普遍存在热原质，这也是目前很多大规模血液蛋白分离技术和方法，容易受到热原污染，进而产生热原反应的原因。热原作为一种药理活性很强的毒性反应物质，对血液制品有很深的影响。

二、方法

去除污染细菌毒素有很多方法，一般是根据血液蛋白相对分析的不同质量来去除细菌内毒素，常用的有超滤、分子筛等方法，这些方法主要适用于一些分子含量较低的输液药品中，比如生理盐水和葡萄糖水等。【1】此外还有层析法，应用的较为广泛，但是由于设备成本较高，因此处理量并不大。而酸碱处理方法，在血液制品和其化学条件相对稳定的条件下，则也有较为明显的变化。把生理盐水在注射前，平均分成均等的两份，分别用lmol/LHCI或lmol/LNaOH调pH至4.0±0.5、10±0.5，分别加入一定量的标准内毒素，使内毒素浓度为4EU/而，除菌过滤后分成4份，分别放在57±0.5℃、37±0.5℃、20±0.5℃、（2—8）±0.5℃的温度条件下孵放，分成不同的时间段，在相应的时间内进行取样，然后對毒素含量进行测量。【2】

三、酸碱处理热原的处理方法

血液作为人体的液体组织，有着一定的碱性，正常人的血液会将血液酸碱度保持一个相对恒定的状态，通常是以PH值作为衡量标准，其范围一般在7.35～7.45，而人体的生命活动耐受的最大变动的那个范围是6.9～7.8，酸碱度对机体有着较为明显的作用。一般情况下，酸碱度对神经肌肉组织的兴奋程度可以产生一定的影响。当血液酸碱度变化不明显时，说明人的血液酸碱度是正常的，这是由于人的血液中有着抗碱和抗酸的物质，能够对人体系统形成一定的缓冲作用，对肾脏排泄、肺呼吸等都有一定的影响。一旦出现身体疾病或者其他不良的反应，身体就会出现酸碱失衡，导致系统紊乱，我们在临床上把这样的现象称为酸碱中毒。结合我们日常酸碱处理的热原方法，我们进行以下分析和论述。

（一）酸孵放

静脉注射免疫球蛋白中内毒素在酸孵放中会产生影响，5%的低pH（pH4±0.2）静脉注射丙种球蛋白中，分别按5SEU/ml及2.5EU/ml的量加入内毒素，摇匀，采用家兔法来对热原取样进行监测，另将样品于24±1℃孵放24d，同样用家兔法检测热原。

（二）碱处理

利用家兔法和鲎试法对热源的合格度进行检测，将20%的人血白蛋白制品利用注射盐水或者其他水进行稀释，将其稀释成10%的浓度，用1mol/L的Na0H把PH调到10.0±0.2，之后加入一定量的标准内的毒素，分解成3份，每份浓度变成4EU/mL，其中两份的Na十浓度调为40mol/L，进行除菌过滤，然后放于37±0.5℃、57±0.5℃孵放。而另外一份则将Na十浓度调为160mol/L，除菌过滤后则在37±0.5℃孵放，在不同的时间段来取样进行测试，利用鲎试法来测量内毒素含量，并观察其样品外观。

四、结果

内毒素浓度为4EU/mL的生理盐水样品，在不同PH（4、10）及不同的温度下进行孵放。同时在不同的时间段，利用鲎试法进行检测，检测出的结果是：pH4，经不同温度孵放24小时之内，内毒素含量均下降较快，至35h均降到1（EU/mL；PH10，孵放温度越高内毒素下降越快，57℃孵放35h降为阴性，37℃孵放76h降为阴性，而20℃、28℃下%h内毒素浓度只下降到1EU/mL，见图l、图2。

五、结语

随着血液制品分离纯化工艺的发展，血液制品的种类在不断增加，其适应症也在不断被发现，这些使得用于临床疾病治疗的血液制品数量显著上升。根据国家食品药品监督管理总局发布的相关指导原则，生产工艺要具有一定的去除/灭活部分病毒能力，生产过程中应有特定的去除/灭活病毒方法，以提高血液制品的安全性。通过上述酸碱处理的方法可以看出，酸碱处理的血蛋白制品，其检测的热原都符合我国相关生物制品的要求和规范，并且在酸孵化后的样品（少了碱处理），高浓度的内毒素样品都和孵放前后有着明显的浓度差异。【3】同时，碱处理的3份高热原人血白蛋白制品，进行检测后均热原合格，符合我国的关于生物制品的规格和要求。

【参考文献】

【1】李军英. 生物制品中常用灭活剂的研究进展[J]. 中国生物制品学杂志， 2018， 31（09）：117-120.

【2】耿军晓， 赵红星. 血液制品二次包装工艺分析与研究[J]. 中国包装工业， 2014（24）：6-7.

【3】苏峰， 孔冬冬， 周海云，等. 血液制品中病毒去除和灭活方法概述[C]// 中国输血协会输血大会. 2014.