王 娟 于 文

（西安开米股份有限公司，陕西 西安，710075）

4,4-二氯-2-羟基二苯醚是一种优良的杀菌剂应用于洗涤剂中。文献中很少有洗涤剂中4,4-二氯-2-羟基二苯醚含量的检测方法，而且通常选择4,4-二氯-2-羟基二苯醚最大吸收波长为检测波长，以提高检测灵敏度，但洗涤剂中含有大量表面活性剂和功能成分，成分较复杂，干扰因素较多，故需对高效液相色谱法加以调整，以使其适用于洗涤剂中4,4-二氯-2-羟基二苯醚的检测。笔者采用高效液相色谱法，确定了较佳的检测波长，有效去除干扰，以期建立一种准确性高、可靠性强、适用性广的检测方法。

1 实验部分

1.1 仪器及试剂

仪器：UV6000LP（二极管阵列检测器）液相色谱仪，Thermo Finnigan公司；

乙腈：色谱纯，德国Merck公司；

4,4-二氯-2-羟基二苯醚：

标准品（纯度≥30.0%，德国巴斯夫公司）；

超纯水：自制。

1.2 色谱条件

色谱柱：Kromasil 100-5 C18柱（150×4.6 mm，5µm）；

柱温：室温；

进样方式：20µL阀进样；检测波长：278nm；流速：1mL·min-1；

流动相：乙腈/超纯水=80/20（体积比，v/v）。

1.3 溶液的配制及样品处理

1.3.1 流动相的配制

将乙腈和超纯水按80∶20（体积比，v/v）的比例混合后，用超声振荡脱气10min，用0.45µm滤膜过滤，备用。

1.3.2 标准溶液的制备

称取0.2000g 4,4-二氯-2-羟基二苯醚标准品于100mL容量瓶中，用混合好的流动相稀释至刻度，配制一系列不同质量浓度的样品（4µg·mL-1、22µg·mL-1、88µg·mL-1、176µg·mL-1、220µg·mL-1）备用。

1.3.3 样品溶液的制备

精确称量0.5000g样品于10mL容量瓶中，用混合好的流动相稀释，超声振荡，定容至刻度，备用。

2 结果和讨论

2.1 流动相的选择

主要进行甲醇/水系与乙腈/水系的筛选，并根据实际情况调整其配比，以达到最佳分离效果和减少干扰，最后，比较看哪个体系比较适合洗涤剂中4,4-二氯-2-羟基二苯醚的检测。其中甲醇/水=90/10（体积比，v/v）和乙腈/水=85/15（体积比，v/v）的比例检测时间最短，但分离度不好，不建议使用。根据表1试验数据进行比较分析，总结出乙腈/水为80/20（体积比，v/v），梯度洗脱可达到最佳分离效果，且基线平稳和干扰较少，比较适合本项目检测。

从表1可知：试验4能达到最佳分离效果，干扰较少适合本项目检测。

2.2 检测波长的选择

4,4-二氯-2-羟基二苯醚最大吸收波长（见图1）为237nm，其次为278nm。由于洗涤剂中含有大量表面活性剂和其他成分，因此，其紫外吸收波长大都在200～240nm，在237nm处的色谱图吸收峰较多，分离效果差，干扰大（见图2a）。选择278nm作为检测波长（见图2b），其目标色谱峰与其他色谱峰分离度高，干扰峰少，提高了样品中4,4-二氯-2-羟基二苯醚的检测精度，故选择278nm作为检测波长。

表1 流动相的选择

图1 样品光谱图

2.3 线性关系

在上述的色谱条件下，待仪器基线稳定后，采用浓度-峰面积外标法定量，配制质量浓度为4.4µg·mL-1、22µg·mL-1、44µg·mL-1、88µg·mL-1、176µg·mL-1、220µg·mL-1标准溶液进样分析，实验数据见表2。由实验得线性回归方程为Y=4×10-5X-4.3509（r2=0.9996），其中Y为4,4-二氯-2-羟基二苯醚的浓度（µg·mL-1）、X为4,4-二氯-2-羟基二苯醚的峰面积、r为相关系数，r值大于0.999，说明在4,4-二氯-2-羟基二苯醚浓度4.4～220µg·mL-1内线性关系良好。

2.4 精密度

图2 样品色谱图

精确称取0.2000g含4,4-二氯-2-羟基二苯醚标准样品于100mL容量瓶中，用混合好的流动相稀释到刻度，摇匀。然后，分别吸取此溶液1mL各置于100mL、50mL容量瓶中，用混合好的流动相稀释到刻度，摇匀。分别将此两种溶液，各检测6次，实验结果见表3。

由表3实验结果可知：RSD分别为0.67%和0.82%，说明方法误差小，精密度比较好。

表2 标准曲线溶液

2.5 重复性

精确称取0.5000g含4,4-二氯-2-羟基二苯醚的洗涤剂样品于10mL容量瓶中，用混合好的流动相稀释到刻度。按此方法配制6份样品溶液，进行6次检测，实验结果见表4。

表3 精密度实验

由表4中实验结果可知：RSD为1.64%，说明方法误差小，具有良好的重复性。

2.6 回收率

回收率实验采取在已知4,4-二氯-2-羟基二苯醚质量分数的市售样品作为基质样品，加入已知质量浓度为2202µg·mL-1的4,4-二氯-2-羟基二苯醚标准溶液；精确称量两份0.5000g样品分别置于两个10mL容量瓶中，各加入1mL和2mL浓度为2202µg·mL-1的4,4-二氯-2-羟基二苯醚标准溶液，用混合好的流动相稀释至刻度，超声振荡，定容至刻度，备用，利用选定的色谱条件进行分析，实验结果见表5。

由表5可知：回收率为100.6%～101.6%，满足分析要求。

2.7 市售样品的测试结果

精确称量0.5000g市售样品于10mL容量瓶中，用混合好的流动相稀释，超声振荡，定容至刻度，备用。实验结果见表6。

表4 重复性实验

表5 回收率实验（n=6）

表6 样品测试结果

由表6中实验结果可知：RSD分别为1.49%和1.64 %，说明方法误差小，精密度比较好。

3 结论

采用高效液相色谱法测定洗涤剂中4,4-二氯-2-羟基二苯醚方法简便、迅速，精密度高。标准溶液在4.4µg·mL-1～220µg·mL-1内呈线性相关，回收率为100.6%～101.6%。此方法精确、可靠，可作为产品质量控制的检测方法。