再灌注疗法是治疗急性心肌梗死的有效手段，但冠状动脉再通后会出现心肌缺血再灌注(MI/R)损伤，即心肌细胞因缺血发生损伤, 在血流恢复后，损伤没有减轻反而加重并诱发细胞死亡或功能障碍。本研究通过阻断大鼠冠状动脉左前降支(LAD)建立MI/R模型,并在预定时间内恢复血流，探讨不同缺血时间窗对大鼠在体MI/R损伤的影响。

1 材料与方法

1.1 实验动物与分组

7～8周龄SPF级成年健康Wistar大鼠48只，雌雄比为1∶1，体质量220～250 g，购自甘肃中医药大学实验动物中心[许可证号SCXK(甘)2015-0002],饲养于甘肃中医药大学实验动物中心屏障环境中[许可证号SYXK(甘)2015-0002]。所有操作均符合实验动物伦理学要求(伦理审批号IACUC2016-039)。将大鼠随机分为假手术组、缺血7.5min组、缺血15min组、缺血30min组，每组12只。

1.2 MI/R模型的建立方法

根据参考文献[1]的方法进行改进，大鼠术前禁食、不禁水12 h，称重标记。10%水合氯醛(0.3 mL/100 g体质量) 腹腔麻醉后，仰卧位固定于手术台上，颈部、胸前手术野备皮，碘伏消毒，铺无菌孔巾。连接Powerlab数据采集分析系统，记录标准Ⅱ导联心电图，有异常者剔除。切开颈部气管接人工呼吸机进行辅助呼吸(潮气量5 mL/100 g体质量,频率60～80次/min，呼吸比为2∶1，予呼气末持续正压呼吸)。胸骨左侧0.5 cm处以第3、4肋骨作为上下边界纵行剪开皮肤约3 cm，钝性分离皮下组织、胸大肌直至肋间肌，用弯止血钳将皮肤和肌肉夹起固定于两侧，于心肌搏动明显处纵行剪开3、4肋骨，用撑开器撑开胸腔，用眼科镊夹破心包膜，暴露心脏，在左心耳下缘与肺动脉圆锥间找到左冠状静脉主干，LAD与之伴行，挤出心脏，用眼科缝合线在左心耳下缘与肺动脉圆锥间距主动脉根部约2 mm处进针，进针宽度及深度均在2 mm左右，穿线后于左冠状静脉主干上置一自制小塑料管结扎。……