邹晓萍，吴维光

流行病学调查显示，环境污染可导致不良妊娠结局[1]。多环芳烃类(polycyclic aromatic hydrocarbons, PAHs)是常见的空气污染物，主要来源于煤炭燃烧、汽车尾气、烟草烟雾和室内烹饪产生的油烟，且易在土壤、水源和农作物中残留蓄积。苯并(a)芘[(benzo(a)pyrene, BaP)]是PAHs中最具有代表性的一种环境污染物，能增加胎停育、流产、早产、死产的发生率[3]。动物实验表明，BaP可影响胎盘滋养细胞的功能，进而影响胎盘功能[4-6]，但具体机制还有待进一步阐明。PAHs进入体内后，与细胞内芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor, AhR)结合，AhR进入细胞核内后与芳香烃受体核转位蛋白(AhR nuclear translocation, ARNT)结合，启动下游一系列靶基因转录和代谢酶的活化[2]。在流产及早产的胎盘绒毛中AhR呈高表达。本研究以AhR阳性表达的人胎盘滋养细胞系JEG-3细胞为靶细胞，观察BaP 体外对JEG-3细胞增殖和凋亡的作用，同时观察AhR和 ARNT基因表达的变化，探讨BaP损害滋养细胞的作用及可能机制。

1 材料与方法

1.1 材料 来源于人胎盘滋养细胞的JEG-3细胞购自中科院细胞库，本科实验室保存。BaP购自美国Sigma公司，DMEM培养液和胎牛血清购自美国Gibco公司，Trizol和FITC-annexin V凋亡试剂盒购自Invitrogen公司，MTT试剂盒购自晶美公司，及转录试剂盒和SYBR Green Real-time PCR Master Mix购自日本TaKaRa 公司，鼠抗人AhR单克隆抗体和鼠抗人ARNT单克隆抗体购自美国Abcam公司，鼠抗人β-Actin单克隆抗体购自美国Genscript公司，辣根抗氧化物酶(HRP)标记的山羊抗鼠IgG购自美国KPL公司，增强型化学发光(ECL)试剂盒和BSA蛋白定量试剂盒购自北京康为世纪生物科技有限公司，PCR寡核苷酸引物由大连宝生物工程公司设计并合成。

1.2 方法

1.2.1 细胞培养及染毒 JEG-3细胞应用含100 mg/L胎牛血清的DMEM培养液，在37 ℃、50 ml/L CO2、饱和湿度条件下培养。……