王艳伟，王晓伟，代雪平

（河南省食品药品检验所，河南 郑州 450018）

冰硼散出自明代《外科正宗》一书，由冰片、硼砂（煅）、朱砂、玄明粉等四味药组成。具有清热解毒，消肿止痛的功效；用于热毒蕴结所致的咽喉疼痛，牙龈肿痛，口舌生疮[1]。现收载于中国药典2015年版一部。玄明粉为芒硝经风化干燥制得，主含硫酸钠。中国药典2015年版一部规定，玄明粉含硫酸钠不得少于99.0%。目前药典对冰硼散中硫酸钠的含量未作限量规定，本次国家药品评价性抽验中发现，部分厂家的冰硼散中硫酸钠含量较低，氯化钠含量较高。本文采用离子色谱法测定冰硼散中硫酸根离子和氯离子的含量，为冰硼散的质量控制提供参考。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Dionex ICS-5000离子色谱仪，ICS-5000 EG-5淋洗液发生器，AERS 500（4 mm）离子抑制器，CD-5000电导检测器（美国赛默飞世尔公司）；XPE205电子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；Milli-Q Advantage A10超纯水系统（美国密里博公司）；KQ-300VDE型双频数控超声波清洗器（昆山市超声仪器公司）。

1.2 试药

硫酸根标准溶液（美国AccuStandard公司，批号：216105152，质量浓度：1000 µg/ml）；氯离子标准溶液（美国AccuStandard公司，批号：216065004，质量浓度：1000 µg/ml）；冰硼散（来自15家生产企业，共26批）；水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Thermo Dionex IonPac AS11-HC离子交换色谱柱（250 mm×4 mm），Thermo Dionex IonPac AG11-HC保护柱（50 mm×4 mm）；淋洗液：氢氧化钾溶液（30 mmol/L）；流速：1.0 ml/min；柱温：30 ℃；阴离子抑制器，抑制电流75 mA；电导检测器，电导池温度：35 ℃；进样量：25 μl[2-7]。

2.2 溶液的制备

2.2.1 混合阴离子标准溶液的制备 取硫酸根标准溶液、氯离子标准溶液，加水制成每1 ml中含硫酸根离子40 μg、氯离子20 μg的混合阴离子标准溶液，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备 取本品约0.1 g，精密称定，置入100 ml量瓶，加水适量，超声处理（功率250 W，频率30 kHz）10 min，放冷，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2 ml，置入10 ml量瓶，加水至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.2.3 阴性对照溶液的制备 按照处方比例和工艺制备缺玄明粉的阴性样品，同供试品溶液制备方法制成阴性对照溶液。

2.3 系统适用性和专属性试验

取混合阴离子标准溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各25 μl，分别注入离子色谱仪，记录色谱图，结果见图1。供试品溶液色谱中，在与硫酸根离子、氯离子色谱峰保留时间相同的位置上有相应的色谱峰，且该色谱峰与相邻的色谱峰有较好的分离度，阴性对照溶液无干扰。

图1 离子色谱图

2.4 线性试验

精密量取硫酸根标准溶液、氯离子标准溶液各1，2，4，6，8，10 ml，分别置入100 ml量瓶，用去离子水稀释至刻度，摇匀，配制成含硫酸根离子、氯离子均为 10.0，20.0，40.0，60.0，80.0，100 μg/ml的系列标准溶液，按2.1项色谱条件进样分析[8-9]。以硫酸根离子和氯离子浓度（μg/ml）分别与其对应的色谱峰面积进行线性回归，得硫酸根离子的回归方程为：Y=0.2189X-0.3167（R=0.9997，n=6），线性范围为10.0～100 μg/ml；氯离子的线性回归方程为Y=0.2919X-0.0432（R=0.9998，n=6），线性范围为10.0～100 μg/ml。

2.5 精密度试验

取2.2.1项下混合对照品溶液，按2.1项色谱条件连续进样 6 次，测定各离子的峰面积。结果硫酸根离子与氯离子峰面积的RSD分别为0.1%，0.2%（n=6）。

2.6 稳定性试验

取同一批冰硼散制备的供试品溶液，分别在制备后第0，2，4，8，12，16，24 h进样测定，结果硫酸根离子和氯离子峰面积的RSD分别为0.3%，0.2%。表明供试品溶液在24 h内各离子稳定性良好。

2.7 重复性试验

取同一批冰硼散6份，按2.2.2项方法制备供试品溶液，按2.1项色谱条件进样测定。结果硫酸根离子和氯离子的平均含量分别为0.3087，0.0992 g/g，RSD分别为0.1%，0.2%。

2.8 检测限和定量限

精密量取硫酸根标准溶液、氯离子标准溶液适量，用去离子水逐级稀释，按2.1项色谱条件分别注入离子色谱仪，结果检测限（信噪比3:1）均为0.001 μg/ml，定量限（信噪比10:1）均为0.003 μg/ml[10-11]。

2.9 加样回收率试验

精密称取已知含量的同一批冰硼散（硫酸根离子含量0.3087 g/g，氯离子含量0.0992 g/g）0.05 g，共6份，精密加入硫酸根标准溶液15 ml、氯离子标准溶液5 ml，按2.2.2项方法制备供试品溶液，按2.1项色谱条件进样，测定回收率，结果见表1、表2。

表1 硫酸根离子回收率试验结果

表2 氯离子回收率试验结果

2.10 样品测定

按2.1项下色谱条件和供试品溶液制备方法，测定26批冰硼散中硫酸根和氯离子的含量，分别折算成硫酸钠和氯化钠的含量，结果见表3。

表3 冰硼散含量测定结果

3 讨论

试验分别用25，30，35 mmol/L氢氧化钾溶液为流动相进行等度洗脱，结果表明以35 mmol/L氢氧化钾溶液为流动相时，出峰时间提前，分离效果不理想；以25 mmol/L氢氧化钾为流动相时，分析时间延长，硫酸根离子峰形变宽，塔板数降低；当洗脱浓度为30 mmol/L可达到基线分离，峰形良好。

试验分别考察了柱温为25，30，35 ℃下供试品溶液的色谱，结果表明柱温为35 ℃时，分析时间延长，硫酸根离子峰型变宽，塔板数降低；柱温为25 ℃时，出峰时间提前，分离效果不理想；柱温为30 ℃时可达到基线分离，峰形良好[12]。

冰硼散制法中各药味均为为原粉入药，根据处方量计算，成品每1 g中含玄明粉应为0.45 g，折算成硫酸钠应为不得少于0.41 g。26批冰硼散样品中硫酸钠的含量为0.005～0.53 g/g，22批符合限度，4批不符合限度。5批样品检出氯化物，以氯化钠计为0.19～0.44 g/g，为玄明粉理论值的42.2%～97.8%，提示部分企业玄明粉原料中杂质氯化物含量过高，企业对原料未进行严格质量控制。