郑晓霞，程艳玲，何小华，刘 纯

（山东省药学科学院，山东 济南 250101）

慢性肾功能衰竭（chronic renal failure，CRF）时，机体磷代谢发生紊乱，伴随血磷升高出现继发性甲状旁腺机能亢进，维生素D代谢障碍，肾性骨病及心血管系统钙化等并发症，严重影响患者的生活质量。高血磷作为一种独立的危险因素对机体的损害越来越受到人们的重视[1]。聚苯乙烯磺酸镧是一种新型非钙磷酸盐结合剂，可用于控制慢性肾衰竭患者的高磷血症[2]。目前国内对其临床前药动学方面的研究甚少，本实验采用电感耦合等离子质谱仪（ICP-MS）测定犬血浆中镧的含量，研究犬口服聚苯乙烯磺酸镧后体内的药动学特征，为临床合理应用提供依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器

XSERIES2型等离子体质谱仪（Thermo公司）；TDL-5台式低速大容量离心机（江苏金坛市医疗仪器厂）；YB502型电子天平（上海海康电子仪器厂）。

1.2 试药

聚苯乙烯磺酸镧（微黄色粉末，批号：20080304，由辽宁诺康生物制药有限责任公司提供，贮藏：密闭保存）；聚苯乙烯磺酸镧原料（含量：本品按干燥品计算含La为17.7%，批号：20080215，由辽宁诺康生物制药有限责任公司提供，贮藏：密闭保存）；铑（由国家钢铁材料测试中心钢铁研究总院提供，编号：GSB-G-620379-90，浓度1 mg/ml）；硝酸（分析纯，苏州晶瑞，批号：8032090）；盐酸（分析纯，苏州晶瑞，批号：8031455）；高氯酸（分析纯，上海金鹿，批号：20071206）。

2 方法与结果

2.1 试验方法

18只Beagle犬随机分为高、中、低剂量组，每组6只，雌雄各半。于早晨分别口服给予聚苯乙烯磺酸镧1.5，0.75，0.375 g/kg，各组动物于药前及给药后0.5，1，1.5，2，3，4，6，8，10，12，24 h自犬后肢静脉取血约3.0 ml，置肝素化离心管中，3500 r/min离心10 min，分离血浆，于-20 ℃冷冻贮存待测。

2.2 检测条件

采用电感耦合等离子体质谱仪进行检测。ICP功率1250 W，反射功率2 W，取样锥孔径1.0 mm，截取锥孔径0.7 mm，模拟电压1800 V，计算机电压3000 V，冷却气13.0 L/min，辅助气0.7 L/min，雾化气0.93 L/min，采样深度141，水平78，垂直443，内标元素铑（浓度5 μg/L）。

2.3 血浆样品处理

在干净坩埚中准确加入待测血浆0.5 ml，加硝酸8 ml，在电热板上120 ℃加热2 h，放置过夜，加高氯酸2 ml，电热板160 ℃加热4 h，温度升至260 ℃，加热至白烟冒尽，加1+1王水4 ml，溶解残渣，冷却后加蒸馏水定容至25 ml，摇匀，进样测试。

2.4 标准曲线及定量下限

取空白犬血浆，分别加入聚苯乙烯磺酸镧标准液配制浓度为5，10，50，100，250，500 μg/L的血浆样品，按2.3项方法操作，以待测物电感耦合等离子体质谱强度值（ICPS）为纵坐标Y，待测物浓度为横坐标X，求得聚苯乙烯磺酸镧中镧元素的线性回归方程为Y=22 656.699X-10 882.973，r=0.999 93，线性范围为5～500 µg/L。定量下限RSD为5.86%。

2.5 精密度与准确度

取空白犬血浆，配制低、中、高3个浓度（血浆浓度分别为10，250，500 μg/L）的聚苯乙烯磺酸镧样品，按2.3项方法操作，每一浓度进行5样本分析，连续配制测定3天，采用当日所建立的标准曲线计算镧浓度，根据结果计算分析方法的精密度与准确度。结果日内精密度RSD分别为2.34%，0.52%，0.65%；日间精密度RSD分别为2.01%，0.34%，0.02%。3个血浆药物浓度的准确度分别为95.78%，100.00%，97.66%。结果符合生物样本分析方法要求。

2.6 血浆样品稳定性试验

分别考察了低、中、高3个浓度（血浆浓度分别为10，250，500 μg/L）的聚苯乙烯磺酸镧样本预处理后室温放置24 h、反复冻融2次及长期冷冻条件下放置30 d的稳定性。结果表明，样本处理后室温放置24 h后，含量测定结果的准确度为99.6%～111.35%；反复冻融2次的结果准确度为99.78%～108.80%；长期冷冻条件下放置30 d的结果准确度为100.05%～109.50%，具体结果见表1。以上结果符合生物样本分析方法指导原则的有关规定，可用于药动学研究。

表1 不同处理方式下血浆样品浓度/μg·L-1

2.7 提取回收率考察

取空白血浆，按2.3项方法操作，残渣加入聚苯乙烯磺酸镧标准液配成浓度分别为10，250，500µg/L的应用液，直接进样，得应用液ICPS值A0。取空白血浆，加入聚苯乙烯磺酸镧标准液配制低、中、高3个浓度（聚苯乙烯磺酸镧镧浓度分别为10，250，500 µg/L）的样品，按2.3项方法操作，每一浓度进行5样本分析，得提取后ICPS值At。以At/A0×100计算提取回收率。3个血浆药物浓度的回收率分别为102.59%，99.62%，97.59%。

2.8 药动学研究结果

Beagle犬灌胃给予聚苯乙烯磺酸镧高、中、低剂量组的平均血浆药物浓度-时间曲线见图1，主要药动学参数见表2。

图1 平均血浆药物浓度-时间曲线

表2 聚苯乙烯磺酸镧的主要药动学参数

Beagle犬分别灌胃给予聚苯乙烯磺酸镧低、中、高3个剂量后，结果显示镧的Beagle犬体内过程符合线性动力学特征，AUC、Cmax均呈剂量相关性。剂量相关性评价数据见表3。

表3 主要药动学参数剂量相关性评价数据

3 讨论

80%的肾透析患者患有高磷血症[3]，因此严格控制饮食中的磷及调节合理的血磷浓度是减少心血管并发症、提高患者生活质量、降低病残率和死亡率的关键。镧系自然界的稀有元素之一，现代药理学研究表明其三价阳离子化合物与磷有很强的亲和力[4]。

聚苯乙烯磺酸镧口服后通过与胃肠道内的钾离子发生离子交换反应而结合钾离子，释放镧离子，然后镧离子与胃肠道内的磷结合，形成水溶性小、不易通过生物膜的磷酸镧分子，随粪便排出体外，从而达到降低血磷、有效控制高磷酸盐血症的目的[5]。研究聚苯乙烯磺酸镧在动物体内的药动学特征，可了解镧离子在生物体内的过程及动态变化规律，为药物的给药剂量与间隔时间提供依据，还可为临床药动学提供参考，通过分析测定药物在血液中的浓度来评价疗效和确定给药方案，使给药方案个体化，以提高药物治疗水平，达到临床安全、有效、合理用药的目的。

本试验建立了ICP-MS测定犬血浆中镧浓度的方法，以铑为内标，硝酸硝化后，加入高氯酸，高温加热处理后，加王水溶解残渣，加蒸馏水定容后进行检测，分析方法符合生物样品测定的有关规定。本检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好、操作快速简便，已成功应用于聚苯乙烯磺酸镧散药动学研究。