许晶 韦建杏 李连珠 陈侯鑫

摘要：为研究伯乐树种子物理性状，和种子繁育及枝条扦插的影响因素，筛选最佳的种子繁育和枝条扦插方法。选取一定的伯乐树种子，测定其长宽、千粒重、含水量等生理指标，并在河沙、红土、表层土基质中进行了种子繁育及枝条扦插试验。结果表明，在沙土中种子发芽率最高，达到46.67%;去皮种子发芽率达36.7%，不去皮种子发芽率为0。在扦插试验中，红土和全木质化枝条是扦插成活率最高的2个条件。沙土和全木质化枝条扦插是愈伤组织形成率最高的2个条件。

关键词：伯乐树;种子;育苗;扦插

伯乐树（Bretschneidera sinensis）是中国特有树种、国家一级保护树种，在研究被子植物的系统发育和古地理、古气候等方面都有重要科学价值。2003年3月，伯乐树在海南首次发现并记录，仅发现7株，长期以来，伯乐树更新困难，处于濒危状态，急需对分布在海南的伯乐树种群进行原地和迁地保护。伯乐树根系发达，可选作低山营造混交林和行道绿化树种，并且伯乐树树干通直，纹理直，色纹美观，为优良家具用材，具有潜在开发价值。因此，在保护海南伯乐树现有野生资源的基础上，开展伯乐树的人工培育具有非常重要的科研价值和现实意义。

近年来，国内外的研究者们开展了大量的引种栽培及播种繁殖的研究工作。乔琦等研究了伯乐树1年生更新幼苗的死亡原因和保育策略[1];郭治友等研究了伯乐树组织培养和快速繁殖技术，筛选出伯乐树最佳芽诱导、增值生根培养基及炼苗基质[2]。伯乐树种子育苗是重要的研究内容，李坊贞等研究伯乐树种子萌发的基本参数及根的组织分化过程[3];康华靖等测定了3个不同地区的伯乐树种子形态指标，并分别设置3种贮藏方式，结果表明，以湿沙低温下储藏的种子的发芽率和发芽势为最高[4];本文通过伯乐树种子育苗与扦插育苗，以期增加伯乐树资源，并为进一步的种植应用奠定基础。

1 试验材料

伯乐树种子种源在海南鹦哥岭;试验器材：电子天平、Ⅰ型游标卡尺、烘干箱和水浴锅;试验试剂：TTC试剂、高锰酸钾（有效成分：80%）;试验基质：河沙、红土、表层土。

伯乐树在鹦哥岭及湖南伯乐树种苗的枝条，选取健壮、无病虫害的枝条，按试验要求剪成相应长度（10～15cm），上切口平剪，下切口斜剪，剪口平滑，插条不留叶。15根/捆，为1个处理。

2 试验方法

2.1 种子物理性状测定试验

去除伯乐树果皮、假种皮和杂质后，根据《林木种子检验规程》（GB277

2.1 999），测定伯乐树种子的物理性状。

2.1.1 种子长宽测定方法。随机选取300粒种子，每个重复100粒。用型号为Ⅰ型游标卡尺（GB/T1214.2-1996）分别测量其长和宽，以种子纵轴长度为长，横向最大宽为其宽，测量伯乐树种子的长宽。

2.1.2 种子千拉重测定方法。先对伯乐树种子进行净种，除去果皮、假种皮和杂质，随后以对角取样法分别从种子中随机取5×100粒种子，每个重复100粒，分别称重，计算种子百粒重，乘以10求得千粒重。

2.1.3 种子含水量的测定。选取50粒伯乐树种子称量后放入105℃烘箱中烘24h后，取出在干燥器里冷却30～45min后称重，用前后重量差与样品鲜重的比值求得种子含水量。重复3次。

2.1.4 种子活力的测定方法。测定方法采用TTC染色法：将各种源种子分别用温水（3090）浸种12h，使种子充分吸胀后利于剥除假种皮。每个种源随机取种子25粒，剥除假种皮后沿其种胚平行切开，每25粒为1次重复，每种源重复3次。然后将准备好的种子浸泡于TTC试剂中在恒温培养箱中（359C，黑暗）保温染色3h。染色结束后倒出TTC溶液，用清水将种子冲洗2次后观察种胚被染色的情况，统计被染色的种子数。

染色标准：凡种子胚根、下胚轴及子叶全部染色或者胚根、下胚轴染色，子叶大部分染成红色的即为具有活力的种子：种胚不被染色的为死种子。

2.2 种子繁育试验

2.2.1 种子发芽率的测定方法。选取500粒伯乐树种子，去除杂质，用多菌灵（有效成分：80%，浓度：5%）对种子进行杀菌消毒12h，冲洗干净后播种至盛放已用高锰酸钾（有效成分：80%，浓度：10%）消毒河沙的规格为330mm花盆中，置于室内，每7d观测，以种子萌发后，长出子叶为发芽标准。然而连续14d内每天发芽粒数不超过供试种子粒数的1%为结束发芽。设置3个重复，统计发芽率和发芽势。

发芽率（%）=正常发芽的种子数/供试种子总数×100。

发芽势（%）=种子发芽数达到高峰时的正常发芽种子的总数/供测种子总数×100。

2.2.2 不同基质的发芽率试验。选取120粒伯乐树种子，去除杂质，用多菌灵（有效成分：80%，浓度：5%）对种子进行杀菌消毒12h，冲洗干净后播种至盛放已用高锰酸钾（有效成分：80%，浓度：10%）消毒河沙的规格为330mm花盆中，置于温室内，每7d观测，以种子萌发后，长出子叶为发芽标准。然而连续14d内每天发芽粒数不超过供试种子粒数的1%为结束发芽。统计发芽率和发芽势。

2.2.3 伯樂树枝条扦插试验。本试验15根全木质化枝条为1个处理，插入培养箱中，土质分别为表土、沙土、红土。扦插深度为插穗长度的1/3，插后用手压实，浇透水。观察其成活率、愈伤组织形成率。

再采用15根枝条为1个处理，不同处理枝条分别为嫩枝、半木质、全木质。插入培养箱中，土质分别为红土。扦插深度为插穗长度的1/3，插后用手压实，浇透水。观察其成活率、愈伤组织形成率。

成活率（%）=存货枝条数/总枝条数×100;愈伤组织形成率（%）=形成愈伤组织的枝条数/总枝条数×100。

3 结果与分析

3.1 伯乐树种子物理性状

伯乐树种子千粒重为1234.5～1408.8g，伯乐树去假种皮千粒重为973.4～1121.9g，其种子平均长度为15.98mm，种子平均宽度为12.45mm，平均含水率47.31%，种子活力测定出种子正常的百分比为95%～100%。

3.2 种子繁育试验

3.2.1 带假种皮种子和去假种皮种子发芽率和发芽势的比较。带假种皮伯乐树种子的发芽势和发芽率均为0，去皮种子的发芽势和发芽率分别为36.67%和50.00%（表2），经方差分析表明，去皮与带皮种子的发芽率和发芽势均具有显著性差异，表明伯乐树去假种皮有助于种子的萌发。

3.2.2 不同基质下种子发芽率的比较。不同基质条件下，种子发芽率均在49～63天达到稳定。其中，河沙内播种的种子发芽率最高，达到46.67%。表土发芽率较低，达到16.67%。红土最低，只有3.33%。经方差分析表明，3种基质内的扦插率相互之间均具有显著性差异。

3.3 枝条扦插试验

3.3.1 不同基质条件类型时扦插存活率的影响。不同基质类型条件下，伯乐树在红土的扦插成活率最高，为73%;表土的扦插成活率最低，为61%。多重比较中，表土、沙土和红土3种条件没有显著性差异，说明表土、沙土和红土对伯乐树的扦插成活率没有显著性影响。

3.2.2 不同木质化的枝条对扦插成活率的影响。嫩枝的伯乐树扦插成活率（0%）<半木质化（61%）<全木质化（75%），显然全木质化的伯乐树成活率最高。多重比较中，嫩枝与半木质化和全木质化有显著性差异，而半木质化与全木质化无显著性差异，所以半木质化和全木质化对伯乐树扦插的成活率有显著性影响。

3.2.3 不同基质类型对扦插愈伤组织形成率的影响。表土条件下的伯乐树愈伤组织形成率表土（5.7%）<红土（7.3%）<沙土（14.7%），由此可见，沙土条件下伯樂树愈伤组织的形成率最大且为14.7%，而表土条件愈伤组织形成率较低仅为5.7%。多重比较中，表土条件和红土条件无显著性差异，而与沙土条件存在显著性差异，说明沙土条件对愈伤组织形成率有显著性影响。

3.2.4 不同木质化枝条对扦插愈伤组织形成率的影响。嫩枝的伯乐树扦插成活率（0%）<半木质化（13.3%）<全木质化（14.7%），嫩枝的愈伤组织形成率为0，而全木质化的愈伤组织形成率为14.7%。多重比较中，半木质化与全木质化无显著性差异，而木质化与嫩枝有显著性差异，说明半木质化和全木质化对伯乐树愈伤组织形成率有显著影响。

4 结论与讨论

4.1 种子成分含量测定

张东生等研究发现伯乐树新鲜果实平均重量为139，最大重量为18.92 g，最小为8.398;种子（含假种皮）椭圆形，平均长度为1.84cm，平均宽度为1.3 3cm;新鲜种子平均粒重为2.679，最大重量为5.529，最小重量为1.61g;千粒重为2 679g[5]。通过本试验，测得伯乐树种子千粒重为1234.5～1408.89，伯乐树去假种皮千粒重为973.4～1121.08，其种子平均长度为15.98mm，种子平均宽度为12.45mm，平均含水率47.31%，种子活力测定出种子正常的百分比为95%～100%。本试验测量的样本量较少，测量指标不够，应该继续研究。

4.2 种子发芽试验

带假种皮伯乐树种子的发芽势和发芽率均为。，去皮种子的发芽势和发芽率分别为36.67%和50.00%（表），伯乐树去假种皮有助于种子的萌发。不同基质条件下，表土内播种的种子发芽率最高，达到46.67%。沙土最低，只有3.33%。表明表土有利于种子发芽。而吴彩新研究发现，伯乐树种子内缺乏萌发促进物质和酶活性低致其种子具深休眠特性，自然条件下萌发率仅2%～4%[6]。故而为了提高发芽率，伯乐树种子需要催芽。武铭凯等研究发现机械破裂种皮、清水浸泡36h、种脐向下的方式最好，出土时间最早（10d）、出土天数最少（3d），种子发芽率最高，平均发芽率为86%1'10相较而言，本试验设置的考虑因素不够，忽视了种脐朝向，可能会对试验结果产生影响。

4.3 枝条扦插试验

不同扦插基质中红土的扦插成活率最高，达73%。沙土的愈伤组织形成率最高达14.7%。不同木质化枝条扦插中，全木质化枝条成活率和愈伤组织形成率都是最高，分别达75%和14.7%。嫩枝的扦插成活率和愈伤组织形成率都为0。而陈辉等研究发现，扦插时根茎粗度以0.5cm以下为好，发根率高，萌芽率也强[8]。本试验中未将根茎粗度作为变量参考，可能会对试验结果产生一些影响。

参考文献：

[1]乔琦，秦新生，邢福武，等.珍稀植物伯乐树一年生更新幼苗的死亡原因和保育策略[J].生态学报，2011，31（16）：4709-4716.

[2]李坊贞，刘仁林，刘燕.伯乐树种子萌发与根组织分化规律的研究[J].南师范学院学报，2008，29（3）：95-98.

[3]康华靖，陶月良，陈子林，等.伯乐树种子不同条件贮藏下前后生理比较[J].中国野生植物资源2011.30（1）：35-39.

[4]郭治友，龙应霞，肖国学.钟萼木的组织培养和快速繁殖[J].植物生理学报，2007，43（1）：127-127.

[5]张冬生，谢金兰，范剑明，等.伯乐树播种育苗技术探讨[J].园艺与种苗，2017（01）：40-42.

[6]吴彩新，曾昭佳.伯乐树栽培技术及应用[J].现代园艺，2013（24）：46-47.

[7]伍铭凯，杨汉远，龙舞，等.伯乐树种子育苗试验[J].贵州林业科技，2006（04）：39-41+38.

[8]陈辉，王正刚.伯乐树根插育苗试验[J].江西林业科技，1986（02）：12-13.