毛 平,成 莉,黄秀兰,李 石

(1.武警四川总队医院检验科，四川乐山 614000； 2.四川省肿瘤医院检验科，四川成都 610000)

乳腺癌是全球女性健康面临的最为严重的威胁之一，尤其是在发展中国家，乳腺癌发病率持续上升[1]。在我国，女性乳腺癌的发病率和病死率逐年升高，发病年龄逐渐趋于年轻化，具有明显的城乡区域差异性[2]。乳腺癌不仅是乳腺发生病变，也是一种全身性疾病，局部复发及肿瘤细胞的转移是造成其病死率不断上升的原因之一[3]。因此，早诊断、早治疗是延长乳腺癌患者生存期、提高生存质量的关键。目前，随着医疗保健成本的增加和新型分子靶向治疗的引入，肿瘤生物标志物已成为辅助乳腺癌早期诊断及确定预后，预测治疗效果和治疗后疾病监测的一种有效工具[4]。肿瘤生物标志物是指当恶性肿瘤发生时，机体功能异常而产生或发生变化的一类特殊物质，在肿瘤的诊断与治疗过程中发挥了重大作用[5]。目前，越来越多的新型肿瘤标志物被发现，如细胞因子、糖类抗原、肿瘤miRNA等，极大地提高了恶性肿瘤的检出率[6]。但是，单项肿瘤标志物检测往往具有较低的灵敏度和准确度，不能如实地反映治疗前后患者机体的变化。因此，本研究探讨了单独及联合检测血清糖类抗原153(CA153)、肿瘤特异性生长因子(TSGF)、人附睾上皮分泌蛋白4(HE4)和人生长分化因子(GDF3)对乳腺癌诊断的意义，为乳腺恶性肿瘤的诊断提供了一定的参考价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2016年8月至2017年8月本院确诊的乳腺癌患者98例，其中原位癌38例，早期浸润癌36例，浸润性导管癌24例，年龄37～62岁，平均(47.86±9.74)岁；选取良性乳腺疾病患者50例，其中脂肪瘤12例，乳腺纤维瘤19例，乳腺囊性增生19例，年龄37～60岁，平均(47.48±9.64)岁；选取同时间段在本院体检健康女性50例，年龄35～64岁，平均(47.55±10.05)岁。将上述3组对象依次纳入乳腺癌组、良性疾病组和对照组，所有研究对象年龄等一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.1.1纳入标准 (1)乳腺癌患者均符合《中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范》2015年版乳腺癌诊断的相关标准[7]；(2)所有研究对象均为女性且已签署知情同意书。

1.1.2排除标准 (1)患有其他恶性肿瘤及妇科疾病者；(2)患有心、肝脏、肾等严重疾病；(3)妊娠或哺乳期妇女。

1.2方法 清晨时段分别采取3组研究对象空腹时静脉血5 mL，置于无抗凝剂的离心管中，3 000 r/min离心15 min后将上层血清分离，保存于-80 ℃冰箱备用。采用电化学发光法检测血清CA153(仪器：罗氏cobas e 601电化学发光免疫分析仪)；采用化学比色法检测血清TSGF(试剂：福建新大陆生物技术有限公司生产的特异性生长因子检测试剂盒)；血清HE4和GDF3的测定采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法，仪器：美国BioRad450酶标仪。各项指标检测时均严格按照说明书进行，联合检测与单独检测所使用方法相同。4种检测指标的阳性参考值为：CA153水平在0～25 U/mL为正常；TSGF水平在0～64 U/mL为正常；HE4水平在0～150 pmol/L为正常；GDF3水平在0～100 pg/mL为正常。4项指标联合检测时，任一项结果超过阳性参考值即判定联合检测结果阳性。

2 结 果

2.13组研究对象检测结果比较 乳腺癌组和良性疾病组CA153、TSGF、HE4和GDF3水平均显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，且乳腺癌组4种检测指标水平显著高于良性疾病组，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

2.2CA153、TSGF、HE4和GDF3单独及联合检测阳性率比较 乳腺癌组和良性疾病组CA153、TSGF、HE4和GDF3单独及联合检测的阳性率显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，且乳腺癌组联合检测的阳性率最高为86.73%，见表2。

表1 3组研究对象检测结果比较±s)

注：与对照组比较，*P<0.05；与良性疾病组比较，#P<0.05

表2 CA153、TSGF、HE4和GDF3检测阳性率比较[n(%)]

注：与对照组比较，*P<0.05；与良性疾病组比较，#P<0.05

表3 各指标单独及联合检测灵敏度、特异度、准确度比较(%)

注：与4项指标单独检测比较，*P<0.05

2.3各指标单独及联合检测灵敏度、特异度、准确度比较 4种检测指标联合检测的灵敏度为86.73%，准确度为81.31%，明显高于单项检测指标的结果，差异有统计学意义(P<0.05),但特异度比较差异无统计学意义(P>0.05)，见表3。

3 讨 论

乳腺肿块、乳头溢液、腋窝淋巴结肿大、皮肤改变、乳头乳晕异常等均是乳腺癌常见的临床症状，其发生发展与患者的家族遗传、内分泌紊乱、生殖因素、饮食及生活环境等多种因素有关[8]。乳房自我检查、乳腺钼靶X线检查、超声检查和MRI检查是筛查早期乳腺癌的常用技术，然而它们都存在着一定的局限性[9-10]。肿瘤生物标志物是在血液、其他体液或组织中发现的一类物质，当恶性肿瘤发生时这类物质会在机体内产生或发生大幅度变化[11]。在风险评估、诊断、预后、治疗反应预测及复发和转移检测方面，肿瘤生物标志物都具有很大的潜在应用价值[12]。早期用于检测乳腺癌的生物标志物在独立检测中显示出有限的诊断灵敏度和特异度，因此，多个生物标志物可能比单个标志物显示更好的预测性能。此外，由于乳腺癌是一种异质性疾病，它也需要多种生物标志物来检测不同的亚型[12]。

CA153是公认的乳腺癌诊断的肿瘤标志物之一，与肿瘤大小、临床分期、受体表达、转移复发等情况有关[13]。它是一种存在于乳腺上皮细胞上的黏液性糖蛋白，当肿瘤发生时细胞骨架破坏，使得抗原脱落，乳腺癌患者外周血中的CA153水平会随着病情加重而升高[14]。TSGF是一种可以促进肿瘤生长、浸润及转移、扩增周边毛细血管并释放到外周血中的多肽物质。在肿瘤发生早期就可检测到高水平TSGF，为乳腺癌的早期诊断提供了极大地帮助[15]。有研究表明，TSGF的水平变化可以反映肿瘤患者周边血管的增生情况，可作为观察肿瘤预后的一项指标[16]。HE4是一种与细胞外蛋白酶抑制剂具有极高同源性的分泌性糖蛋白，在卵巢癌的诊断中具有较好的灵敏度[17]。此外，在子宫内膜癌、乳腺癌、胰腺癌等恶性肿瘤患者的外周血中，HE4水平均高于正常水平[18-19]。有研究表明，血浆miR-127-3p和HE4联合检测可显著提高乳腺癌诊断的灵敏度，可作为早期发现和诊断乳腺癌的候选生物标志物[20]。GDF3属于TGF-β超家族成员，是一种由脂肪生成的细胞因子，在早期胚胎的发育中起重要作用。在肿瘤发展后期，TGF-β可通过免疫抑制、细胞外基质合成、刺激发炎、血管生成等作用来加速肿瘤的形成[21]。有研究表明，GDF3可在乳腺癌组织中异常表达，与乳腺癌的发生发展密切相关，可作为乳腺癌早期诊断的候选指标[22-23]。

本研究通过对98例乳腺癌患者、50例乳腺良性疾病患者及50例健康妇女血清中CA153、TSGF、HE4和GDF3水平进行检测发现，乳腺癌组和良性疾病组CA153、TSGF、HE4和GDF3水平均显著高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，且乳腺癌组4种检测指标水平升高更为显著，差异有统计学意义(P<0.05)。结果表明，4种检测指标在乳腺癌的早期诊断方面均具有一定的应用价值。乳腺癌组患者CA153、TSGF、HE4和GDF3单独及联合检测的阳性率均显著高于良性疾病组和对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，乳腺癌组联合检测的阳性率最高为86.73%。此外，4项指标联合检测对乳腺癌诊断的灵敏度(86.73%)和准确度(81.31%)均显著高于各项指标单独检测的结果，差异有统计学意义(P<0.05)。本项研究结果表明，联合检测比单独检测结果更为准确，降低诊断漏诊率。

CA153、TSGF、HE4和GDF3联合检测可显著提高乳腺癌诊断的灵敏度和准确度，对乳腺癌的诊断提供了强有力的帮助。