苯酚一硫酸法测定草莓中总糖含量
2019-03-25蔡红梅田子玉
蔡红梅 田子玉
摘要:目的:建立草莓中总多糖含量测定方法。方法:以葡萄糖为对照品,采用苯酚一硫酸法,在490nm处测定吸光度。结果:葡萄糖浓度在10~100mg/L范围内与吸光度呈良好的线性关系(r=0.9995);回收率在90.0%~101.5%范围内,测得不同品种的草莓总多糖含量在3.43%~5.43%。结论:该方法简便准确、稳定可靠,可作为草莓中总多糖含量的测定方法。
关键词:苯酚-硫酸法;草莓;总糖含量
中图分类号:TS262.6 文献标识码:A DOI编号:10.140254.cnki.jlny.2019.04.011
草莓是蔷薇科草莓属植物,由于其营养丰富、含有多种营养物质、且有保健功效等特点广受人们的喜爱。已报道的总糖含量测定方法有苯酚-硫酸、蒽酮-硫酸等,其中,苯酚-硫酸法的应用最多。本实验建立苯酚-硫酸法测定草莓中总糖含量的方法,旨在为草莓品质分析提供理论基础。
1材料与方法
1.1原料
不同品种的草莓,购自长春市的某超市和农贸市场。
1.2试剂
苯酚、葡萄糖、浓硫酸、乙腈等试剂均为国产分析纯。
1.3仪器
电子天平(德国Sartorius);GSY-11型恒温水浴箱(北京市医疗设备厂);分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);数控超声清洗器(昆山市超声仪器有限公司);TDL-40B离心机(上海安亭科学仪器厂)。
1.4供试溶液的制备
草莓匀浆后,准确称取1g(精确到0.001g)于25mL具塞试管内,加入10mL的乙腈一水(v:v=1:9)溶液,涡旋10s,超声提取30rain,离心,取上清液,制得供试溶液。
1.5标准溶液的配制
取适量葡萄糖于105℃烘箱内烘至恒重,精确称取0.1000g于100mL容量瓶,用蒸馏水溶解定容刻度,即得浓度为1.0000mg/mL的葡萄糖标准溶液。
1.6标准曲线的绘制
精确量取0.00 mL、1。00 mL、2.00 mL、4.00 mL、8.00mL、10mL葡萄糖标准溶液(1.5),分别置于100mL的容量瓶,加水定容至刻度,摇匀。精确量取上述各溶液2mL,加入lmL 5%苯酚试液,再加入5mL浓H2So4,静置5rain,于40℃水浴上加热30rain,取出,冷却至室温,490nm测吸光度值。以吸光度值A为纵坐标,浓度C(mg/mL)为横坐标,绘制标准曲线。
2结果与讨论
2.1方法学验证
2.1.1标准曲线及线性范围回归曲线方程为;A=8.945C一0.0423;相关系数r=0.9995;线形范围:10~100 mg/L。表明葡萄糖浓度在10~100 mg/L范围内与吸光度呈现良好的线性关系。
2.1.2精密度实验取质量浓度为20mg/L的葡萄糖标准溶液2mL,按照1.6方法测定吸光度值,连续测定6次,计算相对便准偏差为1.56%,符合实验的要求。
2.1.3稳定性实验取质量浓度为20mg/L的葡萄糖标准溶液2mL,按照1。6方法,分别在0min、10min、20min、30rain、60min内分别测定吸光度值,结果吸光度值RSD值为2.37%,表明供试品溶液在60rain是稳定的。
2.1.4重复性实验取质量浓度为20mg/L的葡萄糖标准溶液6份,每份2mL,按照1。6方法测定吸光度值,计算吸光度值的RSD为3.85%,表明重复性良好。
2.1.5加标回收实验精密量取1。8mL已知含量的供试品溶液6份,分别置25mL试管中,精密加入0.2mL对照品溶液,按1.6中的方法测定吸光度,计算回收率,结果见表1。
由结果可见,样品的加标回收率在90.00%~101。5%范圍内,表明该方法测定草莓中的总糖含量准确可行。
2.2样品含量测定
采用苯酚一硫酸法测定不同品种的草莓中总糖含量,结果见表2。
3结论
通过方法学考察及样品含量测定,表明所建立的苯酚一硫酸法测定草莓中总多糖含量方便准确、实际应用性良好,可用于该产品的质量控制。