何博聆 郑茜 陈瑞 袁云香

摘要：白芨（Bletilla striata（Thunb.）Reichb.f.）为兰科（Orchidaceae）白芨属（BletillaReichb.f.）多年生草本植物，以块状假鳞茎入药，且花为紫红色，具有极高的药用和观赏价值。近年来白芨的组织快繁技术迅速发展，并成为白芨大规模种植的主要手段。本文从白芨组培的外植体选择、原球茎诱导培养、丛生芽增殖培养、生根诱导及炼苗移栽等技术等方面进行了论述。

关键词：白芨;组织培养;快繁技术

基金项目：渭南师范学院大学生创新项目（JG201708）;陕西省教育厅科学研究计划项目（18JS036）

中图分类号：$567.239 文献标识码：A DOI编号：10.14025/i.cnki.jlny.2019.04.014

白芨（学名：Bletilla striata）又名连及草、朱兰等，植株高18～60cm。陆生多年生草本植物，花期4～5月，果期10月，主要分布在我国华东、西南、陕西、甘肃等省区，以及日本、缅甸北部。白芨已被列为重点保护的野生药用植物之一，白芨有广泛的药用价值，主要作用是收敛止血，消肿生肌。白芨传统栽培主要靠分株繁殖，但分株繁殖周期长，繁殖效率也很低，很难满足大量栽培的需要。组织培养技术能够快速繁殖大量种苗，白芨组织快繁技术发展迅速，使之成为白芨大規模繁殖的重要手段，主要是通过在不同的培养基上进行无菌播种，种子萌发后用组织培养方法进行无性系繁殖，实现白芨有效的快速扩繁与种苗的规模化生产。

1外植体的选择

1.1白芨种子作为外植体的组织培养

白芨的蒴果含有大量的种子，同时蒴果的消毒较为简单快捷，因此不易被污染，以白芨成熟蒴果为外植体，萌发率高、种苗生长迅速，所以大部分研究者均用种子建立了白芨植株的再生体系。张豆豆Ⅲ等人研究发现，在白芨种子的萌发和芽的分化中6一BA起到促进作用，添加2，4-D对促进白芨幼苗生长过程中愈伤组织的形成有重要的作用。毛鑫闭等人研究发现白芨种子在培养基6-BAl。6mg/L+NAA0.3mg/L中萌发率最高，达到98%。李芳以白芨蒴果为外植体，首次提出多株移栽对提高成活率和新生小芽具重要作用，完整建立了稳定而高效的白芨组织培养与快繁技术体系。

1.2假鳞茎作为外植体的组织培养

白芨的初生假鳞茎通常为圆球形，当生长到一定程度才形成V形块状假鳞茎。黄作喜嗍等人发现带泥的白芨假鳞茎不用清洗，在阳光照射下迅速晒干后就能进行储藏处理。付颖聪等人研究发现，6-BA溶液的浓度是影响诱导率的主要因素，2，4-D浓度次之。NAA对愈伤组织的诱导具有抑制作用。李慧敏等人通发现白芨假鳞茎诱导的最佳培养基配方为MS+6-BAl.0mg/L+KT0.5mg/L+NAA0.2mg/L+香蕉泥40.0g/L+土豆泥40.0g/L+花宝四号1.0g/L+活性炭1.0g/L+蔗糖30.0g/L。

1.3侧芽作为外植体的组织培养

在实验研究中以侧芽为外植体的培养效果较块茎好。石云平等人发现以白芨侧芽为外植体，使用0.2%升汞灭菌8rain成活率最高且污染率最低。余朝秀等人发现MS+6-BAl.0-3.0mg/L+NAA0.2mg/L可诱导侧芽萌发增殖芽。

1.4幼根作为外植体的组织培养

田英翠等人以白芨幼根为材料，添加不同浓度水平的生长调节剂，成功诱导出原球茎并进行分化培养。

2原球茎的诱导

白芨种子萌发时先形成原球茎，原球茎分割可采用纵切法、横切法和掰开法三种分割法。管常东等人实验研究表明，掰开法最有利于原球茎的增殖，横切法易导致原球茎褐变而死亡。成晓静等人发现促进白芨原球茎诱导的最适培养基组为MS+马铃薯汁+NAA 0.1rag/L+6-BA 1.0mg/L。

3从生芽增殖培养

吴传恩旧等人发现丛生芽在MS+0.4mg/L NAA+1.0mg/L6-BA+20g/L蔗糖+2glL活性炭的培养基中培养，丛生芽的长势良好，增殖效果最佳。杨舒婷认为在培养基中添加TDZ激素诱导的丛生芽数量大。高晗等人研究证明1/2MS+1.0mg/LNAA+I.0mg/L GA3+0.2%AC+3%蔗糖+0.7%琼脂为白芨丛生芽诱导的最佳培养基。

4生根诱导

叶静等人研究发现，6-BA质量浓度为1.0mg/L，NAA为0.1 5mg/L时诱导率最高，丛生芽长势较好，相较于其他不同浓度的培养基中的苗健壮，颜色鲜艳。赵漫丽等人研究发现，在培养基中添加香蕉泥可以促进白芨苗的生根，提高了移栽的成活率。席刚俊等人实验发现白芨的壮苗生根最佳培养基为1/2MS+NAA 0.5mg/L+香蕉泥75g/L+椰子汁100mL/L+蔗糖10g/L+活性炭2g/L+琼脂6g/L，pH值为5.8。

5炼苗与移栽

邹娜11日等人实验发现，白芨壮苗生根培养后30d将无菌苗移栽到蛭石中成活率最高可达96%。曹婧n9等人实验研究发现白芨组培苗在移栽时随着开瓶锻炼时间的延长，成活率明显增加，当炼苗6d时成活率高达96.3%，但当炼苗到12d时成活率下降。姜丽琼等人通过实验发现，在15°C～28°C是白芨的最佳炼苗温度。