张 莉

(山东现代学院 山东 济南 250104)

长白落叶松(Larixolgensis)，落叶松属，落叶乔木，分布以长白山为中心，北至北纬45°20′处的穆棱与鸡西桦木林场，南至北纬40°30′的辽宁省宽甸县，西至东经124°30′，东至国境[1]，其具有生长快、干形好、适应性强及综合利用价值高等特点[2]。

长白落叶松生长周期长，采用常规育种技术选育新品种耗时长、见效慢，且后代性状难以定向改良，因此，采用离体组织培养进行快繁颇为重要。目前，日本落叶松、华北落叶松及兴安落叶松等树种已建立了离体快繁体系[3～6]，而关于长白落叶松组织培养的研究较少，本研究从外植体消毒方式及愈伤组织与不定芽诱导的适宜培养基、激素组合和配比的选取等方面着手，筛选出更加高效的消毒方式及更适宜于愈伤组织与不定芽诱导的培养基类型及激素组合与配比，旨在为长白落叶松组织离体培养提供一定的参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验所用长白落叶松种子为2016年9月采自于黑龙江省牡丹江市林口县青山国家落叶松良种基地落叶松种子园。采集后放入-20℃冰箱中冷冻保存备用。

1.2 试验方法

1.2.1 外植体处理与消毒

将成熟且饱满的种子去皮，流水冲洗2 d，用70% 酒精消毒1 min，用4%NaClO分别消毒10 min、15 min、20 min、25 min，剥去胚乳，将合子胚接种至培养基上，再用0.5%NaClO消毒合子胚2 min(此步骤设置空白对照)，吸干胚上水分，接种培养。3 d后，统计污染率；7 d后，统计存活率。以上涉及使用试剂的步骤皆用无菌水洗净后再处理。

1.2.2 愈伤组织的诱导

选取MS、BM及DCR 3种培养基，激素组……