吴石平, 莫砚成, 饶 岸

(1.贵州省农业科学院 贵州省植物保护研究所,贵州 贵阳 550006；2.北京师范大学贵阳附属中学,贵州 贵阳 550081)

地锦(ParthenocissustricuspidataPlanch)是一种重要的绿篱植物，常攀缘在墙壁、围墙、道路音障墙等处，在生态文明建设和城市美化上发挥着重要作用，是城市绿化不可缺少的景观植物。近年，一种褐斑病在地锦上普遍发生，病害发生后在叶片形成大量的褐色病斑，极大影响了其绿化效果和生态功能。目前未见该病原鉴定和诊断方面的报道。为了明确褐斑病病原，对今后该病的深入研究及防治提供理论支撑，对其病病原菌进行了分离鉴定及病害诊断。

1 材料与方法

1.1 标本的采集

在地锦褐斑病发病盛期采集症状典型的病叶标本，采集地点为贵阳市药用植物园及贵州省植物园。

1.2 菌株的分离及培养

选取典型病斑，在显微镜下挑取分生孢子器，放入无菌水中压碎，制成孢子悬浮液，将孢子悬浮液涂到水琼脂(WA)平板上。2 d后逐日检查孢子萌发情况，待孢子萌发后，挑取单个萌发的孢子接种到PDA培养基上，25℃避光培养。

1.3 病原菌的验证

参照《植病研究方法》[1]，采用科赫氏法则验证分离到的菌株是否为该病病原菌。

1.4 形态观察

将分离纯化的菌株用直径8 cm的灭菌打孔器，从菌落边缘打块，将含有生长旺盛的菌丝的PDA小块。接入PDA平板中央。每菌株5个重复。于28℃培养。第10天时测量菌落直径，观察菌落形态；然后挑取分生孢子器制片，在显微镜下观察分生孢子器、产孢结构及分生孢子的形态和大小。……