不同实验室环境下ELISA法检测血清GM结果的可靠性研究*
2019-02-19娄鉴芳梅亚宁张世昌徐华国
娄鉴芳,梅亚宁,张世昌,徐华国,王 加
(南京医科大学第一附属医院检验学部,南京 210029)
半乳甘露聚糖(galactomannan,GM)是一种多糖成分,以稳定的形式存在于包括曲霉属在内的多种真菌细胞壁中。它在真菌感染如侵袭性曲霉病(IA)期间被释放到循环血液中,并且现在被广泛用于高风险患者IA的早期检测和诊断[1]。GM检测为疑似真菌感染患者的早期鉴别和指导靶向抗真菌药物给药提供了一种方便的方法,即使在疾病进展之前,也可以降低发病率和死亡率。
酶联免疫吸附试验(ELISA)现在是用于检测血液循环中GM抗原以快速诊断侵袭性真菌感染的常用检测方法[2]。然而,各种影响因素可能导致GM检测出现假阳性结果,例如同时使用某些抗生素、饮食因素以及与其他真菌或细菌的交叉反应[3,4],这些在最终结果解释中都不应被忽视。因此,根据制造商的建议和指示,应该对初检阳性样品进行复检以避免这些假阳性结果[5]。但由于GM检测缺乏可重复性,并且在不同地区的ELISA灵敏度变化范围较大(范围从30%到100%)[6,7],本研究我们决定探索影响我院GM检测结果的因素。
1 材料和方法
1.1 实验样本材料 收集2016年6月~2017年4月在本院初诊为疑似侵袭性真菌病的住院患者3 407例,1 167份血液样本,排除使用某些抗生素及肠外营养的临床影响因素。全血在3 000 r/min离心10 min分离血清,-4℃储存,1周内进行检测。
1.2 试剂和仪器 试剂盒使用PlateliaTMAspergillus Ag试剂盒(美国Bio-Rad公司),仪器使用Thermo scienrific MULTISKAN FC酶标仪(上海Thermo Fisher仪器有限公司),BD Phoenix-100全自动细菌鉴定仪(美国BD公司)等。
1.3 方法
1.3.1 GM检测:采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测样本中的GM。……
