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探讨高压氧治疗阿尔茨海默病模型大鼠后其认知和记忆功能的改变

2019-02-19魏成群高展祝鸿雁

心血管外科杂志(电子版) 2019年2期
关键词:象限高压氧海马

魏成群,高展,祝鸿雁

(黑龙江省医院,黑龙江 哈尔滨 150001)

本文通过实验分析的方法,探讨高压氧治疗阿尔茨海默病模型大鼠后其认知和记忆功能的改变[1],旨在为临床AD患者治疗研究提供依据,相关内容分析如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取40只健康雄性大鼠进行研究,大鼠体质量210 g-248 g,平均体质量(224.12±6.94)g;所有大鼠在实验前期正常喂养且持续1 w,不同大鼠在体质量、年龄等方面差异性较小;同时准备好实验中需要使用的相关仪器设备以及试剂。

1.2 方法 遵循随机性原则将40只大鼠分组,包括正常对照组(不造模)、假手术组(海马注射5 μL生理盐水)、模型组(海马注射5 mL Aβ25-35)、高压氧治疗组(海马注射5 μL Aβ25-35,然后实施高压氧治疗),研究期间不同大鼠正常饮食。按照分组不同对大鼠做出相应的处理。HBO治疗组大鼠在注射Aβ25-35后2 w开始高压氧治疗。使用医用高压氧气舱度大鼠进行高压氧治疗,每天1次,每次60 min,高压氧压力为2 ATA,其中加压15 min、稳压30 min、减压15 min,10 d为1个疗程,每个疗程治疗完成后中间3 d停止治疗,共治疗2个疗程。其余大鼠则不予以相关治疗。

高压氧治疗组完成2个疗程治疗后,对不同组大鼠通过Morris水迷宫法评估其空间记忆功能,整个水迷宫划分为4个象限,圆形直径160 cm,深度40 cm;于较暗环境下进行试验,减少环境因素对其影响。完成水迷宫实验后,对大鼠腹腔注射10.0%水合氯醛,剂量为4 mL/kg,然后快速开胸,左心室主动脉插管,生理盐水快速冲洗,获取大鼠大脑组织,经相关处理后在镜下观察海马神经元形态改变;大鼠海马组织中的Bcl-2 mRNA以及蛋白表达通过RT-PCR以及Western Blot完成检测,严格按照相关试剂盒操作说明完成。

1.3 观察指标 (1)不同时间不同组逃避潜伏期、原平台所在象限时间、穿过原平台次数;(2)Bcl-2 mRNA以及蛋白表达。

1.4 统计学方法 采用统计学软件SPSS 20.0实施数据分析,计量资料(Mean±SD)采用t检验;计数资料[n(%)]采用χ2检验。P<0.05:差异存在统计学意义。

2 结果

2.1 逃避潜伏期、原平台所在象限时间、穿过原平台次数分析 从实验研究开始,不同大鼠逃避潜伏期逐渐缩小,其中HBO治疗组在不同时间段与对照组、假手术组无显著统计学意义(P>0.05);治疗组第5 d逃避潜伏期时间(33.29±4.08)s、第6 d逃避潜伏期时间(20.82±1.62)s;模型组第5 d逃避潜伏期时间(48.17±2.84)s、第6 d逃避潜伏期时间(40.64±1.98)s;HBO治疗组潜伏期时间小于模型组(t=9.465/24.499,P均<0.05),其他时间无统计学意义(P>0.05)。原平台所在象限时间方面,HBO治疗组与对照组、假手术组无显著统计学意义(P>0.05),而HBO治疗组原平台象限所占时间比为(35.79±4.98)%,模型组原平台象限所占时间比为(20.83±3.61)%,HBO治疗组高于模型组(t=7.691,P<0.05)。

2.2 Bcl-2 mRNA以及蛋白表达 HBO治疗组Bcl-2 mRNA相对表达为(0.73±0.15),模型组Bcl-2 mRNA相对表达为(0.39±0.07),HBO治疗组大于模型组(t=6.495,P<0.05),HBO治疗组相对蛋白表达(0.82±0.16),模型组相对蛋白表达为(1.09±0.17),HBO治疗组蛋白表达小于模型组(t=3.657,P<0.05),数据分析存在统计学意义。

3 讨论

本研究显示,不同大鼠逃避潜伏期呈现出下降趋势,但是HBO治疗后大鼠在第5 d、第6 d逃避潜伏期明显缩小,而且原平台象限所占时间比、穿过原平台次数超过模型组,综合分析提示HBO治疗后的大鼠其记忆功能明有所提高。从基因水平分析,HBO治疗后大鼠对应的Bcl-2 mRNA以及蛋白表达发生明显改变,其中Bcl-2 mRNA与大鼠海马组织凋亡密切相关,该基因通过调控相关蛋白表达,避免对海马组织的进一步损伤,从而帮助大鼠改善认知和记忆功能。

综上所述,高压氧治疗可能会对Aβ25-35诱导海马神经元凋亡产生抑制,从而促进阿尔茨海默病模型大鼠后其认知和记忆功能的改变[2]。

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