线栓插入深度对改良线栓法制备小鼠脑缺血模型稳定性及安全性的影响
2019-02-13庄丽华孔营楠杨烁慧龚志刚詹松华刘孟潇张中帅
庄丽华,孔营楠,杨烁慧,龚志刚,詹松华,刘孟潇,张中帅
(1上海中医药大学附属曙光医院,上海201203;2西门子医疗系统有限公司上海分部)
目前我国缺血性脑梗死发病率高,约占其他类型脑梗死的66.4%[1]。缺血性脑梗死已成为全世界首位死亡原因,具有发病率高、病死率高和致残率高的特点[2,3]。大脑中动脉栓塞模型为研究脑缺血疾病的重要模型,其主要造模方法为线栓法。相关研究多使用大鼠造模,但大鼠不能满足脑缺血疾病基因水平的研究。随着基因工程技术的发展,小鼠和基因工程小鼠已经成为目前研究的热点[4,5]。建立稳定的小鼠脑缺血模型,并创立准确无创的模型评价体系,是目前研究的关键。过去常用TTC染色法来判定模型小鼠脑缺血范围,但该方法无法对活体小鼠进行观察[6~9]。随着医学影像学技术的发展,可利用磁共振扫描技术对小鼠进行活体多层面成像检查[10~14]。2017年10月~2018年4月,本研究用改良线栓构建小鼠脑缺血模型,观察线栓插入深度对模型稳定性及安全性的影响。
1 材料与方法
1.1 动物、试剂及仪器 成年SPF级C57/BL6n小鼠40只,雄性,体质量20~25 g,购自维通利华实验动物有限公司,SCXK(浙)2018-0001,饲养于上海中医药大学动物实验中心,温度18~28 ℃,昼夜温差<3 ℃,相对湿度40%~70%。适应性饲养1周,术前12 h禁食不禁水。青霉素钠粉针剂,购自上海上药新亚药业有限公司,水合氯醛购自上海国药集团化学试剂有限公司。线栓购自北京西浓科技有限公司,直径0.16 mm,头部直径(0.2±0.1)mm,线长3.5 cm,距离头端10 mm处有黑色标记,并于标记处前后1 mm处加两个标记。磁共振扫描仪(西门子Skyra3.0T)、8通道横向放置小鼠专用线圈(上海辰光医疗科技股份有限公司,编号5000049101/序列号001006)。
1.2 动物分组及脑缺血模型制备 将40只小鼠采用随机数字表法分为A、B、C、D组,每组10只。将小鼠称质量后用4%水合氯醛溶液按0.1 mL/10 g腹腔注射麻醉,将其仰卧位固定于泡沫纸板上,乙醇擦拭颈部消毒,用眼科镊在颈部正中剪1 cm左右切口,钝性分离下颌下腺,用玻璃分针游离胸骨舌骨肌及二腹肌之间的颈动脉鞘,分离颈总动脉和迷走神经,在颈总动脉上挂线,并继续向前剥离分出颈外动脉,将颈外动脉和颈总动脉结扎。……
