耿巧玉，刘金安，范路路，田景振

（山东中医药大学，山东 济南 250355）

美洲大蠊Periplaneta americana(L.)为昆虫纲，蜚蠊目，蜚蠊科，俗称“蟑螂”。在《本草纲目》、《名医别录》、《本经》、《神农本草经》、《新修本草》中均有记载。美洲大蠊含有多种活性成分，具有消炎、促进创面愈合等作用。现代研究表明，美洲大蠊提取物能抗肿瘤、抗氧化、强心升压、修复组织等功效。

1 产地加工

药材的产地加工对后期实验进行有着不可忽视的意义，不同的加工方法对药材中有效成分的作用不同，如高温会破坏动物药材中的某些蛋白质成分，而动物药中大多有效物质是易降解、变性、失活的蛋白质类活性成分，因此产地加工的方式对药材中物质有显著影响。

湖南中药饮片炮制规范2010年版规定美洲大蠊的炮制步骤为：取原药材，去除杂质，晒干或60 ℃烘干。有研究[1]制备治疗抗癌药物的产地加工是：捕捉后用乙醇浸泡杀死或沸水烫杀死，冻干。赵德润[2]用美洲大蠊鲜品作活性肽时，将美洲大蠊鲜品置沸水中烫后，加入其重量3～10倍水直接过组织破碎机破碎制得美洲大蠊匀浆，再放入蒸煮锅内烧开煮10～40 min，静置放凉将上层脂肪收取弃用，即得美洲大蠊鲜品匀浆。有研究[3]将美洲大蠊的成虫用不同温度的热水烫杀，75 ℃热水烫杀至少30 s可有效杀死美洲大蠊，且有效成分含量最高；同时研究干燥温度，结果表明，75或80 ℃制备的美洲大蠊各种有效成分含量均较高，是最优的干燥温度。有研究[4]采用电击法、窒息法和冷水溺亡法3种非加热方法制备美洲大蠊药材，通过测定醇浸出物、氨基酸含量发现，3种加工方法均比传统加工方法含量高，但窒息法中的醇浸出物和氨基酸含量比电击法和冷水溺亡法高。有研究[5]取干美洲大蠊置入牛奶，拌匀，闷润，干燥；牛奶与美洲大蠊的用量比为1:20～1:1，此法可改善美洲大蠊的口味，使病患更易接受，且有效成分基本未变。

2 提取工艺

邹俊波等[6]研究发现，药材:70%乙醇为1:12、提取2次，每次提取120 min时，测得的氨基酸含量和干膏率与预测值基本一致。何正春等[7]按干燥虫体与95%乙醇料液比为1:15进行冷提取，用石油醚脱脂，不同浓度乙醇洗脱，测得提取物可选择性地抑制或杀灭人和小鼠肿瘤细胞。王涛等[8]研究了美洲大蠊蛋白质的提取工艺优化及其对伤口愈合的影响，发现1.5%碱80 ℃提取1 h，蛋白提取率最高；1.0%盐40 ℃提取2 h，蛋白提取率最高；酶为药材用量的0.6%，45 ℃酶解2 h时，蛋白提取率最高；小鼠伤口愈合实验表明，提取的蛋白质不仅能加快伤口愈合，还使愈合时间相较于正常情况缩短一半。周湘等[9]采取了水提和醇提两种方法，先用1:5干燥虫粉和石油醚超声脱脂30 min 2次；水提用15倍量提取3次，每次30 min；醇提用15倍量95%乙醇超声提取3次，每次30 min；结果表明，虫粉混悬液和水提物对小鼠急性肝损伤的保护作用效果较好，醇提物次之。余昕等[10]采用渗漉法、超声法和乙醇回流法提取美洲大蠊粗粉，研究对3种肿瘤细胞SMMC-7721、K562、HCT116增殖的影响，发现渗漉法提取的美洲大蠊对肿瘤细胞具有较强的抑制作用。

3 美洲大蠊抗肿瘤的机制研究

3.1 体外研究

李婷等[11]研究表明，美洲大蠊提取物CⅡ-3和脱脂膏对线粒体膜电位降低有一定作用，但是CⅡ-3较脱脂膏作用强；发现CⅡ-3和脱脂膏能抑制Bel-7402/5-Fu的Bcl-2蛋白表达，且抑制作用与剂量成正相关；可促进Bax、Caspase-3，Caspase-9蛋白表达，且与剂量成正比。张蕊等[12]研究表明，美洲大蠊脱脂膏、多肽及CⅡ-3能抑制人肝癌细胞HCC HepG2增殖和迁移，且呈时间、剂量依赖关系；免疫细胞化学染色法和ELISA法表明，美洲大蠊脱脂膏、多肽和CⅡ-3能降低人肝癌细胞HCC HepG2中血管内皮生长因子VEGF蛋白的表达。杜泽轩[13]研究了美洲大蠊不同极性部位的抗氧化活性发现，乙酸乙酯部位有较强的体外抗氧化活性，且对人肝癌细胞HepG2、人肺癌细胞A549、人骨肉瘤细胞U20S、人宫颈癌细胞Hela、人乳腺癌细胞MCF-7均有促进细胞增殖的活性，能促进大鼠正常肝细胞 BRL-3A 增殖活性。

3.2 体内研究

谢波等[14]研究表明，美洲大蠊提取物能促进大鼠膀胱上皮愈合；可使大鼠膀胱上皮炎性细胞浸润大幅度降低。张丹等[15]研究表明，美洲大蠊提取物中含有多种多肽、氨基酸；对小鼠肉瘤细胞S180有显著地体内抗肿瘤活性，该活性表达可能与增强荷瘤小鼠的免疫功能有关。

常旭等[16]研究表明，HFDT1、CⅡ-3高、 低剂量及环磷酰胺CTX均能抑制肿瘤生长。与阳性药组比较，HFDT1、CⅡ-3高、低剂量能升高荷瘤小鼠的体质量，提高免疫细胞数量，提高脾、胸腺指数（P＜0.05），提高NK细胞比例及脾淋巴细胞总数（P＜0.05）；与模型组比较，三者均提高脾T细胞比例。

4 质量标准

目前美洲大蠊还未被收录到药典中，因此出现了不同的质量标准，有药材本身的质量标准，也有美洲大蠊提取物的质量标准。

4.1 美洲大蠊

湖南省2009年中药材标准中美洲大蠊的【检查】水分 照水分测定法测定，不得过13.0%。 总灰分 不得过8.0%。 酸不溶性灰分 不得过1.6%；浸出物 照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法测定，用50%乙醇作溶剂，不得少于20.0%。

张丹[17]在其申请的专利中写到美洲大蠊冻干粉质量控制方法，所述多肽含量测定方法为：用folin-酚试剂法测定多肽含量，暂定冻干粉每克含多肽以牛血清白蛋白计不得少于53.94%；所述氨基酸含量测定方法为：用茚三酮法测定氨基酸含量，暂定冻干粉每克氨基酸含量以丙氨酸计不得少于4.51%。

4.2 美洲大蠊提取物

张臻等[18]采用薄层色谱法鉴别美洲大蠊提取物；用UV-可见分光光度法测定总氨基酸的含量，综合考虑多种因素，将美洲大蠊水提物总氨基酸的含量标准稍微降低，暂定美洲大蠊水提物的谷氨酸含量不能少于0.049%，总氨基酸含量不能少于7.03%；照《中国药典》 2015年版一部附录IX H项下水分测定第一法对提取物的水分进行测定，实验结果显示，美洲大蠊提取物的平均含水量是4.67%，将美洲大蠊提取物的含水量标准按150%降低，规定水分不能超过7.0%。

5 展望

通过总结近年美洲大蠊的研究文献发现，美洲大蠊蛋白提取物对于某些肿瘤作用较好，且产地、加工工艺及脱脂工艺不同时，其体内体外抗肿瘤效果仍显著。美洲大蠊作为中药抗肿瘤有较好的研究前景，相对于放化疗，能大大的降低患者身心病痛。综上所述，对于美洲大蠊的炮制工艺有待进一步研究；对于抗病毒、抗菌方面仍有待进一步研究。