马小娜，王 爽，呼菊莲，史龙泉，王宏东，张 辉，韩晓虹

银屑病为常见的慢性炎症性疾病，其病因不明且发病过程不可预测，发病率可达2%～3%[1,2]。寻常性银屑病最为常见，约占银屑病的95%左右，其临床表现为边界清楚、形状不规则的红斑，表面覆盖多层鳞屑，且鳞屑易脱落，严重患者可扩散至全身[3,4]。银屑病因其病情顽固不易治愈，患者需终生治疗。有关细胞因子和趋化因子与银屑病之间的关系研究较多[5,6]。Komorowski等[7]发现银屑病患者血清中与肥胖者脂肪组织中骨调素（osteopontin，OPN）浓度较健康对照组高，而且肥胖和银屑病有一定的相关性，患者的体重与银屑病的严重程度也具有一定的相关性[8,9]。本研究探讨OPN、CC类趋化因子配体 5[chemokine(C-C motif)ligand 5，CCL5]、趋化因子（C-X-C）配体 9[chemokine（C-X-C motif）ligand 9，CXCL9]、肿瘤坏死因子 -α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和 γ-干扰素（interferon-γ，IFN-γ）与银屑病发生之间的关系，同时也分析银屑病患者上述因子水平是否与患者肥胖状态相关，现将结果报告如下。

1 材料和方法

1.1 研究对象

选择2011年3月—2015年6月在我院就诊的银屑病患者，研究对象纳入标准：①年龄≥18岁；②均为寻常性银屑病患者；③前4周均未给予银屑病药物或光疗；④无免疫性疾病或慢性代谢病史；⑤病历资料完整。根据上述纳入标准共纳入108例患者（研究组），其中肥胖患者53例，非肥胖患者55例；同时纳入31例体检健康志愿者为对照组，肥胖者15例，非肥胖者16例；所有纳入的研究对象均签订知情同意书，本研究同时经医院道德伦理委员会审核通过。

研究组和对照组在年龄、性别、体质（BMI）指数、肥胖、腰围、腰臀比和腰高比方面差异无统计学意义（P均＞0.05），具有临床可比性（表1）。

1.2 方法

1.2.1 相关指标定义 银屑病严重程度采用银屑病面积和严重度指数（psoriasis area severity index，PASI）进行评估，若PASI≥10则为中重度银屑病[10]；根据中国肥胖问题工作组建议和中国成人超重和肥胖症预防控制指南[11]，采用BMI进行评估，若BMI≥28 kg/m2则定义为肥胖。

1.2.2 OPN、趋化因子和细胞因子浓度测定 于受试者肘静脉处采集外周全血10 ml，置于枸橼酸钠（浓度为0.129 mol/L）抗凝管中，于4 ℃，离心条件为978×g，离心15 min，分离血浆，并贮存在-30 ℃，待检（血浆样品在1个月内完成检测）。

OPN水平检测采用酶联免疫吸附试验（enzymelinked immunosorbent assay，ELISA）， 人 ELISA 检测试剂盒购自R&D公司，具体操作按照说明书完成，采用多功能酶标仪分别测定标准品和样本A450吸光度，并根据标准品绘制的标准曲线，计算样本中的OPN量，检测灵敏度为0.011 ng/ml；CXCL9、CCL2和CCL5水平的测定均采用北京康润生物公司人ELISA检测试剂盒，操作参照说明书进行，分别测定标准品和样本A450吸光度，绘制标准曲线，计算样本的CXCL9、CCL2和CCL5含量，检测灵敏度为31.3 pg/ml。TNF-α和IFN-γ测定采用北京康润生物公司人ELISA检测试剂盒，操作参照说明书进行，分别测定标准品和样本A450吸光度，绘制标准曲线，计算样本的TNF-α和IFN-γ含量，检测灵敏度为3.9 pg/ml。

1.3 统计学方法

采用SPSS.22.0软件对数据进行分析，连续性变量以均数±标准差（x¯±s）描述，组间差异性比较采用t检验；分类资料以百分比的形式描述，组间差异性比较采用χ2检验或Fisher精确检验，ROC曲线分析OPN的临界值，采用多因素分析OPN水平与临床特征的关系，P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 研究组和对照组OPN水平

研究组OPN水平为（42.98±20.32）ng/ml，对照组为(12.08±4.02)ng/ml，两组相比差异具有统计学意义（t=8.399，P＜0.001）；研究组中肥胖患者OPN为（42.56±21.04）ng/ml，非肥胖患者为（43.04±19.08）ng/ml，两者相比差异无统计学意义（t=0.114，P=0.455）；对照组中肥胖者OPN为（12.38±3.96）ng/ml，非肥胖患者为（11.98±4.02）ng/ml，两者相比差异无统计学意义（t=0.494，P=0.311）。研究组中肥胖患者的OPN水平显著高于对照组肥胖者，差异具有统计学意义（t=25.362，P＜0.001）；PASI≥10银屑病患者OPN水平为（43.02±20.14）ng/ml与PASI＜10[（42.06±21.02）ng/ml]相比差异无统计学意义（t=0.242，P=0.404）；肥胖银屑病患者中平均PASI为（52.1±11.4）分，其中PASI≥10为53例，非胖患者PASI为（36.8±10.9）分，PASI＜10为12例（21.8%）。

血浆中OPN诊断银屑病患者的临界值为18.01 ng/ml，曲线下面积为0.802，诊断的敏感性为78%，特异性为74%；高血浆OPN水平与银屑病的发生相联系，银屑病患者较正常健康人群相比高血浆OPN水平风险显著增加（P＜0.001）（表2）。

表1 研究组和对照组临床基本特征

2.2 研究组和对照组趋化因子和细胞因子水平

研 究 组 CCL5、CXCL9、TNF-α 和 IFN-γ水 平分 别 为（4011.5±1024.1）pg/ml、（682.7±104.8）pg/ml、（76.7±33.4）pg/ml 和（41.6±10.5）pg/ml，对 照 组 为（2489.7±788.6）pg/ml、（622.2±118.4）pg/ml、（14.2±2.9）pg/ml和 10.1 pg/ml，两组相比差异具有统计学意义（t=7.641，P＜0.001；t=2.757，P=0.003；t=10.067，P＜ 0.001；t=3.683，P=0.011）；研究组CCL2 水平为（785.6±344.5）pg/ml，对照组为（755.6±107.6）pg/ml，两组相比差异无统计学意义（t=0.477，P=0.317）。PASI≥10银屑病患者CCL5水平为（4236.5±1113.4）pg/ml、CXCL9水平为（704.5±102.1）pg/ml、CCL2 水平为（796.4±339.3）pg/ml，与PASI＜10[（3988.3±877.3）pg/ml、（665.4±98.3）pg/ml和（781.5±342.7pg/ml）]相比差异无统计学意义（t=1.143，P=0.128；t=1.542，P=0.092；t=0.202，P=0.419），而TNF-α水平差异具有统计学意义[（102.2±18.4）pg/ml 对（51.1±16.5）pg/ml，t=13.932，P＜0.001）]。

2.3 CXCL9和TNF-α水平与OPN的相关性

研究组银屑病患者OPN水平与CXCL9和TNF-α水平均无显著相关性（r=0.008，P=902；r=0.112，P=887）（图 1）。

3 讨论

银屑病为自身免疫性疾病，与促炎因子的生成相关联[2]。OPN是免疫系统细胞分泌的糖蛋白，如脂肪组织巨噬细胞、角质形成细胞、平滑肌、内皮细胞。成骨细胞和肝细胞等等。OPN可以与不同种类的泛表达受体相互作用，包括整合素和CD44变异体，并在生理和病理过程中扮演着重要作用，例如炎症和免疫反应，增强Th1反应而抑制Th2 反应。OPN同时也参与Th17细胞系的调节，同自身免疫功能紊乱相关联，如类风湿关节炎和克罗恩病[7,12]。研究发现银屑病患者血清中和肥胖者脂肪组织中OPN浓度较健康对照者升高[7]，而且肥胖和银屑病也具有一定的相关性，研究发现随着体重的增加PASI也随之增加[8,9]。本研究结果也进一步证实先前的研究观察，银屑病患者血浆中OPN水平高于对照组，但是肥胖和非肥胖银屑病患者相比OPN水平并无显著性差异，对于肥胖和非肥胖的对照组也具有类似的结果。此外，高血浆OPN水平与银屑病的发生相关联，银屑病患者较正常健康人群相比高血浆OPN水平风险显著增加，这也表明OPN可能是影响银屑病发病机制的一个重要因素。

表2 多因素回归分析银屑病患者高血浆OPN的相关因素

图1 OPN水平与CXCL9和TNF-α水平的关系

另外，外周血中趋化因子水平较细胞因子水平更高，这也促使其可作为量化的更为方便和可靠指标，因此，趋化因子可作为银屑病治疗效果的监测因子。在疾病早期，通过抑制趋化因子下调促炎因子水平，其可作为特定细胞因子阻滞替代性选择，趋化因子受体至少有一个配体，不同的趋化因子与不同的受体相结合；所以趋化因子和OPN可作为银屑病最有潜力的生物指标[9,13]。银屑病患者经高克曼（Goeckerman）法治疗后，随着CCL2和CCL5水平降低，皮肤的病变部位也得以缓解[14]；王凯新等[15]研究新疆地区寻常性银屑病患者CXCL9和CCL5水平显著高于正常人群，但是不同民族之间并无显著性差异。本研究结果也表明银屑病患者的CXCL9和CCL5水平高于对照组，但是银屑病患者和健康人相比CCL2水平并无明显差异；此外，先前的针对性探讨银屑病患者细胞因子与趋化因子之间的关系，如CCL2、CCL3、CXCL1、CXCL9、白细胞介素（IL）-6和IL-12或IL-13与PASI之间的关系，则常出现相反的的研究结果[16,17]。Ekma等[17]的 研 究 显示，虽然银屑病患者CXCL9、CXCL10、CCL17、CCL20 和CCL22水平高于对照组，但是只有CCL20与PASI相关，而且对于接受治疗的患者细胞因子水平与对照组相比并无显著性差异，此项研究也与本研究的结果相似。

本研究尚存在一定的不足之处。首先，研究所纳入的患者数量较少，其统计分析略显不足；其次，本研究仅分析患者血浆中各因子变化，并未采集患者病变处进行研究；第三，研究中所采用的手段具有一定的局限性，在测定银屑病患者中OPN、趋化因子和细胞因子之间的相关性时，仅采用ELISA法进行检测。因此，后续的研究应该扩大标本数量，同时采用多种研究方法，检测患者血浆及病变处OPN、趋化因子和细胞因子的变化。

本文研究结果显示，银屑病患者血浆中OPN、CCL5、和CXCL9水平均高于健康者，而且其水平与患者是否肥胖无明显相关性；高血浆OPN水平与银屑病的发生相关联，银屑病患者较正常健康人群相比高血浆OPN水平风险显著增加。因此，OPN可能是影响银屑病发病机制的重要分子，可作为银屑病诊断的生物标志物，或可用于临床银屑病患者的诊断。