彭先兵， 戴润芝

(湖北医药学院附属人民医院， 湖北 十堰 442000)

鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)是常见的头颈部恶性肿瘤，占全部头颈部肿瘤的78%左右[1]，其发病隐匿、恶性程度较高、容易发生转移和复发[2]。目前，临床上治疗鼻咽癌的主要手段是采用手术联合放化疗，其中采用铂类药物化疗是一种较为普遍的治疗方案[3-5]，但是有一定比例的晚期鼻咽癌患者铂类药物治疗效果不理想[6-7]。细胞周期蛋白依赖性激酶8(cyclin-dependent kinase 8，CDK8)基因产物是细胞周期蛋白依赖性激酶家族中的一员，可启动DNA 合成、提升细胞周期时相变化及调节细胞转录，在细胞的增殖和分化中具有关键作用，其异常表达能够加快细胞周期的运转，其与结直肠癌、胃癌、子宫颈癌以及恶性黑色素瘤等恶性肿瘤的发生发展以及预后具有一定关系[8-9]。目前关于CDK8与鼻咽癌细胞的生物学行为的关系研究较少，本研究观察CDK8异常表达对鼻咽癌5-8F 细胞增殖、凋亡及顺铂敏感性的影响，为铂类药物有效治疗鼻咽癌提供依据。

1 资料与方法

1.1 主要试剂

鼻咽癌5-8F细胞株(美国ATCC公司)，CCK8(DojinDo，日本)，RPMI 1640和MTT(美国Sigma-Aldrich公司)，胎牛血清(德国PAN-Biotech公司)，兔抗人CDK8单克隆抗体(美国Cell Signaling公司)，兔抗人增殖细胞核抗原多克隆抗体(美国Santa Cruz公司)，兔抗人Bcl-2、Bax、Cyclin D1、MRP1单克隆抗体(英国Abcam公司)。

1.2 细胞培养

人鼻咽癌5-8F细胞株用含12%胎牛血清的RPMI 1640培养液，37 ℃下在5% CO2培养箱中进行培养。

1.3 分组干预

培养细胞分为未处理组(不给予任何干预)、阴性对照组(不含CDK8表达的慢病毒转染)和转染组(含有CDK8过表达的慢病毒)，每组12个培养皿。慢病毒感染靶细胞的操作流程：第1天，以合适的比例接种靶细胞于T25的培养瓶中(对照组和处理组)；……