喻建辉，余春涛，江平屿

（江西汪氏蜜蜂园有限公司，江西南昌 330100）

糖尿病是因胰岛素绝对或相对不足而引起体内糖代谢紊乱的一种疾病，目前难以有效防治[1]。恶性肿瘤、心脑血管病是我国较为严重的慢性非传染疾病，而糖尿病也尾随其后，成为了现在三大慢性非传染性疾病之一，正严重威胁着人类健康[2]。目前，无论是国内还是国外，对于糖尿病的防治措施都没有比较有效的方式，对于患者来说，长期服用药物治疗，无论是中药还是西药，都会因为其副作用而对身体其他器官造成一定的损害。于是，寻找一种对人体有效而且安全的糖尿病预防产品便成为了如今防治糖尿病研究治疗的当务之急和未来发展趋势。蜂胶是蜜蜂从植物花苞及树干上采集的树胶，混入其上颚腺分泌物和蜂蜡等物质而成的一种具有芳香气味的胶状固体物质[3]。蜂胶中的成分非常复杂，目前的研究发现，鉴定出的物质有300多种，在鉴定出的物质当中，有黄酮类和醛酮类物质，氨基酸、芳香酸及其衍生物，还有萜烯类及其他多种烃类物质，此外还包括矿物质元素与维生素、酶等物质[4-5]。根据其他研究发现，蜂胶的生物学活性、药理活性也被广泛应用[6]，其中，在提高人体免疫力、清除自由基、抗氧化方面有较多应用，还可以消炎、促进伤口愈合及降低肿瘤发生风险。另外，在心脑血管方面也有应用，能够降低血糖，对受损心肌及肝脏都有一定的保护作用。由于这些功效的研究发现，蜂胶在化妆品、食品、药品等方面都有着广泛的应用。

蜂胶在血糖调节方面有一定的作用，有学者的研究发现，蜂胶对胰岛素的敏感性有良好作用，能增加其敏感性，胰岛抵抗水平也有较大改善，因此可以用于血糖调节作用[7]。日本研究人员对蜂胶调节血糖作用进行了几项动物实验研究，用巴西蜂胶喂食糖尿病小鼠。经一段时间后发现，小鼠体内葡萄糖运转效率加快，胰岛素抵抗作用也有显著改善，血糖水平就此得到有效调节[8-9]。

试验通过采用不同剂量的蜂胶软胶囊灌胃四氧嘧啶诱导的高血糖模型小鼠，观察其体重、空腹血糖及糖耐量，探讨其辅助降血糖功能。

1 材料和方法

1.1 样品

蜂胶软胶囊，由江西汪氏蜜蜂园有限公司提供，内容物为棕色软膏状，于4℃下保存，供试验用。

1.2 试验动物及环境

SPF级昆明种小鼠，由湖北实验动物中心提供。21～24g，雌性100只，湿度70%～75%，温度25～27℃。

1.3 剂量设计

人体每日推荐摄入量为3.0 g/日剂量的设计需参考人体，以其每日推荐量来确定，其每日推荐摄入量为3.0 g/日，相对剂量设计来说，也就是0.05 g/（kg·bw），根据该推荐量设置3个剂量组，10倍的低剂量组0.5 g/（kg·bw），20倍的中剂量组1.0 g/（kg·bw），30倍的高剂量组1.5 g/（kg·bw），用蒸馏水配至所需浓度，对照组给予蒸馏水。

1.4 仪器与试剂

One TouchⅡ血糖仪，美国强生公司产品；四氧嘧啶，美国Simga公司产品。

1.5 试验方法

1.5.1 正常动物降糖试验

正常动物降糖试验，在供试验的昆明种小鼠中选用健康成年雌性小鼠30只，所选用的小鼠需禁食3 h，期间可自由饮水，保证正常生理活动，之后该小鼠需按血糖水平进行分组，测定血糖时采用取尾血测定，分组采用随机的方法分为2组即对照组和剂量组，每组15只，采用1.5 g/（kg·bw）受试物给予剂量组小鼠，该方法需要保证对照效果，此时相对于剂量组，对照组需给予蒸馏水，蒸馏水的剂量需要和受试物相同，连续灌胃30 d，对照组和剂量组都需要采用禁食处理，方法同前，空腹血糖值作为测定指标，通过其空腹血糖值观察受试物对正常动物空腹血糖的影响。

1.5.2 四氧嘧啶高血糖模型小鼠降糖试验及糖耐量试验

试验需建立了一个高血糖模型，在建立高血糖模型前，需要有一个小鼠正常活动的基础血糖，在供试验的昆明种小鼠中选用健康成年雌性小鼠15只，同样禁食3 h，之后测定该小鼠的血糖水平，作为试验过程中的基础血糖水平。高血糖模型的建立，同样对试验小鼠禁食处理，时间24 h，也保证其正常的饮水，尾静脉注射四氧嘧啶40 mg/（kg·bw），然后测定其血糖水平，该小鼠需要经过一段时间的生理活动，时间为5 d，之后进行禁食处理，时间为3 h，筛选的依据为小鼠的血糖水平，筛选血糖水平较高的小鼠60只，即血糖值大于10 mmol/L的小鼠，然后将该60只小鼠随机分为4组，1个高血糖模型对照组和3个剂量组，每组15只，3个剂量组对应地分别给予低剂量组0.5 g/（kg·bw），中剂量组1.0 g/（kg·bw）和高剂量组1.5 g/（kg·bw）的受试物，该方法需要保证对照效果，此时相对于剂量组，对照组需给予蒸馏水，蒸馏水的剂量需要和受试物相同，对试验小鼠连续灌胃30 d，对照组和剂量组都需要采用禁食处理，方法同前，然后用2.0 g/（kg·bw）葡萄糖溶液给各组小鼠灌胃，测定血糖值时采尾血测定，测定时应采取多个时间点，该试验中在0，0.5，2.0 h 3个时间点取尾血测血糖值，根据血糖值来分析观察受试物对四氧嘧啶高血糖模型小鼠空腹血糖及糖耐量的影响。

1.6 数据分析

试验数据用DBASEⅢ软件建立数据库，用STATA软件分析处理。

2 结果与分析

2.1 对正常小鼠体重的影响

蜂胶软胶囊对正常小鼠体重的影响见表1。

表1 蜂胶软胶囊对正常小鼠体重的影响

由表1可见，给予1.5 g/（kg·bw）剂量该软胶囊试样30 d，动物体重与对照组比较差异无显著性，说明该蜂胶软胶囊对正常小鼠体重无影响。

2.2 对正常小鼠空腹血糖影响

蜂胶软胶囊对正常小鼠空腹血糖的影响见表2。

表2 蜂胶软胶囊对正常小鼠空腹血糖的影响

由表2可见，给予1.5 g/（kg·bw）剂量该软胶囊试样30 d，动物空腹血糖与对照组比较差异无显著性，说明该蜂胶软胶囊对正常小鼠空腹血糖无影响。

2.3 对四氧嘧啶高血糖模型小鼠体重的影响

蜂胶软胶囊对高血糖模型小鼠体重的影响见表3。

由表3可见，给予低剂量组0.5 g/（kg·bw），中剂量组1.0 g/（kg·bw）和高剂量组1.5 g/（kg·bw）剂量该软胶囊试样30 d，动物体重与对照组比较差异有显著性。说明该蜂胶软胶囊对高血糖模型小鼠体重有增加作用。

表3 蜂胶软胶囊对高血糖模型小鼠体重的影响

2.4 对四氧嘧啶高血糖模型小鼠空腹血糖的影响

蜂胶软胶囊对高血糖模型小鼠空腹血糖的影响见表4。

表4 蜂胶软胶囊对高血糖模型小鼠空腹血糖的影响

受试物对该模型小鼠的影响需对比其造模前的情况，造模前小鼠的血糖水平与造模后进行对比，随机取15只造模前的小鼠测空腹血糖，其血糖水平为6.2±1.1 mmol/L，根据表4的结果显示，造模后各组动物空腹血糖均呈现出一个增长的现象，与造模前的6.2±1.1 mmol/L比较，差异较明显，有显著性（p＜0.01），根据这种对比现象的结果可以看出，模型成立。给予0.5，1.0，1.5 g/（kg·bw）剂量该软胶囊受试物试样30 d，这3个剂量组的空腹血糖和模型对照组相比较，均呈现下降的现象，差异较明显，有显著性（p＜0.01），在血糖水平上来说，这3个剂量组的血糖水平相对于模型对照组来说，均表现出比较明显的下降趋势，差异较明显，有显著性（p＜0.01）。也就是说，在对四氧嘧啶高血糖模型小鼠的空腹血糖方面，该蜂胶软胶囊有一定的降低效果。

2.5 对四氧嘧啶高血糖模型小鼠糖耐量的影响

以0.5，1.0，1.5 g/（kg·bw）剂量该软胶囊试样连续喂养造模成功的模型小鼠30 d，这3个剂量组给葡萄糖后在一定的时间点测定其血糖水平，分别在0，0.5，2.0 h时间点测定血糖值，这3个剂量组的血糖值和模型对照组相比较，均呈现下降的现象，差异较明显，有显著性（p＜0.01），见表5；再观察其给糖后的曲线下面积情况，明显小于模型对照组，差异较明显，有显著性（p＜0.01），见表6。在对四氧嘧啶高血糖模型小鼠糖耐量方面，该蜂胶软胶囊有一定的增强效果。

蜂胶软胶囊对高血糖模型小鼠给糖后血糖的影响见表5，蜂胶软胶囊对高血糖模型小鼠葡萄糖曲线下面积的影响见表6。

表5 蜂胶软胶囊对高血糖模型小鼠给糖后血糖的影响

表6 蜂胶软胶囊对高血糖模型小鼠葡萄糖曲线下面积的影响

3 讨论

以1.5 g/（kg·bw）剂量该软胶囊试样灌胃正常小鼠30 d，结果表明，正常小鼠的体重和空腹血糖方面，该受试物对其并没有影响。

以低剂量组0.5 g/（kg·bw），中剂量组1.0 g/（kg·bw）和高剂量组1.5 g/（kg·bw）剂量该软胶囊受试物来灌胃喂养四氧嘧啶诱导的高血糖模型小鼠30 d，结果显示，在体重方面，与模型对照组小鼠比较，其剂量组均有所增加；在血糖水平方面，其剂量组小鼠空腹血糖也有所降低（p＜0.01）；在糖耐量方面，其剂量组小鼠均有所升高（p＜0.01）。由此可见，该蜂胶软胶囊有辅助降血糖作用。

4 结论

综上所述，正常小鼠对该蜂胶软胶囊敏感度较低，对其体重和空腹血糖并没有影响，而对于四氧嘧啶诱导造模的高血糖模型小鼠，蜂胶软胶囊能降低其空腹血糖，而且升高其糖耐量，因此，该蜂胶软胶囊具有良好的辅助降血糖功能。

据国内外研究表明，目前已从蜂胶中分离鉴定的化学成分有黄酮类和醛酮类物质，氨基酸、芳香酸及其衍生物，还有萜烯类及其他多种烃类物质。此外，还包括矿物质元素与维生素、酶等物质，尤其是含有重要特征的大量的类黄酮、萜烯类化合物[10]。有多种生物学功能在蜂胶中都有所体现，生物活性物质是其中较为重要的部分，而黄酮类物质就是其中之一，黄酮类物质在发挥作用的时候并不是全部相同，根据来源蜂胶的不同，其所含黄酮类化合物的种类也有一定的差异[11]。蜂胶中的一些黄酮类化合物对利用外源性葡萄糖合成糖原的作用也有促进，从而能影响胰岛β细胞功能和血糖代谢；糖尿病的发病机制与其他心脑血管方面有所不同，其糖尿病有许多的并发症，其中高糖氧化应激就与其有着密切的关系，它与胰岛素抵抗等疾病的发病机制较为相似[12]。人体是一个很复杂的系统，而且能够有效地抵御外来有害刺激，当人体遭受到有害刺激时，就会产生过多的氧自由基，人体就会产生氧化应激，从而来增加其清除能力，人体的功能会受收到损伤。正是因为这种氧化之间的平衡受到破坏[13]，脂质的氧化是人体平衡的重要反应，当体内自由基过多的时候，脂质会产生过氧化，再加上链式反应，对人体的伤害就增加，氧化应激就会增加该种损伤作用[14]。在保护人体组织系统方面，蜂胶有着其独特的作用，蜂胶是天然物质，在抗氧化方面有着很明显的效果，此外，对细菌、真菌及病毒，蜂胶都有比较好的抵抗作用，通过蜂胶作用，人体内脂质的过氧化能得到有效的控制，也能有效地清除人体内多余的自由基，由此可见，蜂胶能有效地改善糖尿病，降低人体内的血糖作用[15]。