梁璐，刁磊

（吉林农业科技学院生物与制药工程学院，吉林吉林132000）

葛根属于豆科植物，是野葛的干燥根。葛根有解肌退热、解酒毒、生津止渴等功效，可以用于日常食用如炖鸡肉时加入，葛根总黄酮具有对抗心肌缺血缺氧性损伤，扩张冠状血管，提高血流量等功能[1]。将葛根总黄酮制成口服脂质体可提高葛根总黄酮在体内的生物利用度，提高葛根的利用价值。

1 实验仪器与材料

紫外可见分光光度计（上海光谱仪器有限公司）。葛根总黄酮（成都德思特生物技术有限公司）。葛根素标准品（成都瑞芬思生物科技有限有限公司）。

2 方法与结果

2.1 葛根总黄酮口服脂质体的制备

精密称取磷脂250 mg、胆固醇20.83 mg、葛根总黄酮25 mg于烧杯中并用35mL的乙醇溶解作为油相备用。将盛有10 mLPBS缓冲溶液的烧杯放到（55℃，600romin-1）磁力搅拌器上，用注射器吸取适量全部溶解的油相，缓慢匀速的将油相注入到水相PBS液面下。待脂质体形成后继续加热搅拌以除去有机溶剂，即得[2]。

2.2 葛根总黄酮口服脂质体包封率的测定

2.2.1 绘制标准曲线

称取葛根素标准品10mg，用95%乙醇溶解并定容至100mL容量瓶的刻度线，振荡混匀使100mL容量瓶里的标准溶液浓度为 0.1mg/mL。用移液管分别移取 1.4mL、2.4mL、3.4mL、4.4mL、5.4mL的标准溶液于5只10mL标好序号的容量瓶内，定容至10mL刻度线的溶液为95%乙醇。空白对照为适量的95%乙醇溶液，依次将配制好的溶液适量倒入石英比色皿中，用紫外可见分光光度计将检测波长调至250nm，按容量瓶中溶液浓度大小进行测定。根据记录结果，横坐标为5只容量瓶中溶液浓度，测定得到的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。经测定可知标准曲线方程为y=55.14x－0.017，R2=0.998。由标准曲线可知葛根总黄酮标准溶液浓度在上述0.014～0.054mg/mL的范围内与吸光度有良好的线性关系。

2.2.2 口服脂质体中葛根总黄酮含量测定

使用移液管移取2.0 mL葛根总黄酮口服脂质体于10 mL容量瓶中，并用8.0 mL的乙醇溶液定容至容量瓶的刻度线，超声振荡进行破乳，以乙醇溶液作为空白对照，将样品溶液和对照溶液在250nm检测波长下进行紫外检测。将检测后得到的吸光度值代入标准曲线方程计算可得出总黄酮浓度，再次计算可得出M总。计算可知，M总为0.425mg。

2.2.3 葛根总黄酮口服脂质体包封率的测定

将裁剪好的透析袋放入适量的PBS缓冲溶液中，沸水浴15min进行活化。

用注射器吸取2 mL葛根总黄酮口服脂质体，注入到活化好的透析袋中。将密封好的透析袋放入加有300 mL PBS缓冲溶液的烧杯内，使用磁力搅拌器进行透析4h，待透析结束后，PBS缓冲溶液为空白对照，用注射器吸取适量的透析外液用250 nm检测波长测定吸光度值，根据标准曲线方程计算得游离的总黄酮的浓度计算M游。

脂质体包封率 =〔（M总-M游/M总）〕×100%[3]

代入上述公式可得，包封率为33.75%。

2.3 质量考察

2.3.1 形态观察

用玻璃棒蘸取适量的脂质体溶液于载玻片中心，然后将载玻片放到显微镜下观察。可发现样品溶液为澄清透明，稀释后在暗室条件下可发现蓝色乳光。显微镜观察到的口服脂质体为类球状较为规则，外层有磷脂双分子层。

2.3.2 稳定性考察

取适量的样品溶液于玻璃瓶中，将其在室温条件下放置一个月然后观察其形态变化。观察可得经放置一个月后的葛根总黄酮口服脂质体包封率有轻微下降，溶液出现轻微浑浊现象。制备的脂质体稳定性较好。

3 结论

葛根总黄酮溶解性较差，实验前需先测试一下溶解度。本试验采用乙醇注射法制备出了葛根总黄酮口服脂质体，以包封率为评价指标。制备过程中要注意油相往水相注射时的速度要缓慢行，不宜过快。实验制备的脂质体稳定性还有待加强，因此，各个因素还需要进一步考察。