缪成贵 周丽丽 熊友谊 魏 伟 陈兵兵 常 俊

(安徽科技学院生命与健康科学学院，凤阳 233100)

类风湿关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)是一种慢性、持续性的自身免疫性疾病，发病特征集中在手、足小关节等处，呈对称性、侵袭性关节滑膜炎症，并发展为软骨侵蚀、骨的不可逆性损坏[1]。RA伴有关节外器官受累及血清类风湿因子阳性，严重者导致关节畸形及功能丧失[2]。RA发病机制目前仍不清楚，研究表明关节滑膜中成纤维样滑膜细胞(Fibroblast-like synoviocytes，FLS)的异常增殖在RA发病机制中起关键作用[3]。完全弗氏佐剂制备的佐剂性关节炎(Adjuvant arthritis,AA)大鼠病理特点与人RA非常相似，是常用的RA病理机制研究和药物治疗研究的动物模型[4]。芍药苷(Paeoniflorin,PF)来源于中药材毛莨科植物芍药根、牡丹根、紫牡丹根，作为中药材芍药中的主要有效成分，具有镇痛镇静、扩张血管、抗炎抗溃疡、解热解痉等药理作用[5]。本文以AA大鼠作为RA研究的动物模型，以FLS异常增殖作为研究切入点，从分子水平深入研究PF影响AA大鼠病理的机制，为RA防治提供新思路新方法。

1 材料与方法

1.1材料

1.1.1仪器设备 倒置荧光显微镜：日本OLYMPUS公司；实时定量PCR仪：美国ABI公司；超纯水系统：美国密理博Milli-Q Reference；酶标仪：美国BioTek公司；台式冷冻离心机：德国Eppendorf公司；-80℃超低温冰柜：日本三洋公司；细胞培养箱：美国热电公司；超净工作台：上海智城ZHJH-C1214C；紫外可见分光光度计：上海精密科学仪器公司；电子天平BP211D：德国Sartarius。

1.1.2药品试剂 PF：上海源叶生物科技有限公司，纯度≥98%，规格20 mg/支，CAS 23180-57-6；QuantiFast®SYBR®Green PCR试剂盒：德国Qiagen公司产品；Thermo Scientific RevertAid First Strand cDNA Synthesis试剂盒：美国Fermentas公司产品；Opti-MEM：美国Invitrogen公司；新生胎牛血清(Fetal bovine serum，FBS)：美国Hyclone公司产品；……