华北地区野生青蒿中青蒿素的提取和检测

2018-12-28刘美琴任石苟李奠础

山东化工 2018年23期

刘美琴，任石苟，李奠础

(山西轻工职业技术学院，山西太原 030013)

野生青蒿是华北地区一种常见的野生植物，其生命力顽强，耐贫瘠土壤，耐恶劣环境，在山东、山西、河北等地户外随处可见。野生青蒿中青蒿素的定性和定量分析，未见有针对性的文献报道。

青蒿是一味效高价廉易得的中药，《中药大辞典》称它具有清热、化湿、解暑、除蒸、截疟、杀虫等功能，主治夏令感冒、中暑、温病寒热、湿热黄疸、骨蒸劳热或原因不明的低热、疟疾等多种疾病［1］。自20世纪70年代初我国科学家从中药青蒿中发现了抗疟药青蒿素，引起了世界各国科学家的极大兴趣［2－3］，屠呦呦科学家因此获得诺贝尔医学奖。目前青蒿素是世界卫生组织推荐的疟疾治疗药物。但是不同来源的青蒿中的青蒿素的相对含量差别很大，有的含量高达0.7%，而有的只有0.1%甚至不含青蒿素，如常见的易混品臭蒿和茵陈中就不含青蒿素［4］。所以对不同来源和种类青蒿中的青蒿素进行测量甄别，具有较强的现实意义。

青蒿素的组成为一种含有过氧基的新型倍半萜内酯［5］，分子式为C15H22O5，在丙酮、醋酸乙酯、氯仿、苯或冰醋酸中易溶，在甲醇、乙醇、稀乙醇、乙醚及石油醚中溶解，在水中几乎不溶［6］。由于青蒿素水溶性差，所以不宜采用水作为溶剂进行浸提实验。其他的植物有用成分萃取也见到有采用水+表面活性剂作为浸提剂的，但是并没有见到用于青蒿素的文献，此外表面活性剂的分离也是一个问题。实验采用乙醇和石油醚作为浸提溶剂，采用碱性溶液对青蒿素进行变性处理，采用UVVis光谱法对青蒿素提取液进行定性和定量分析［7］。

1 试剂和仪器

试剂:野生青蒿，采自山西太原东山户外;市售中药材青蒿，购自万民药店，来源不详;无水乙醇(AR)，天津市申泰化学试剂有限公司;石油醚(60～90，AR)，南京化学试剂股份有限公司;氢氧化钠(AR)，西安天茂化工有限公司;脱色活性炭(食品级)，山东济南亿博化工有限公司。

仪器:高速多功能粉碎机，YB－2500A，浙江省永康市速锋工贸有限公司;紫外－可见分光光度计，T6新世纪，北京普析通用仪器有限责任公司;石英比色皿。

2 实验步骤

(1)将野生青蒿的根、茎、叶和籽分别进行粉碎，粉碎后的样品过筛(40～60目)。

(2)按10倍溶剂量(g/mL)静置浸取，浸取时间:65h，浸取温度:室温。

(3)浸取液用网筛过去大部分残渣，并用滤纸过滤，得滤液A1。

(4)将滤液A1中加入活性炭进行脱色处理，脱至无色再次过滤得滤液A2。

(5)取适量滤液A2，加入少许的0.2%NaOH稀溶液进行变性，变性之后滤液记为A3。

(6)取各步骤中适量的滤液或反应液A1、A2、A3，测定其吸光度值。并对实验结果进行比较和分析。

3 结果分析与讨论

实验所用市售中药材青蒿一般取植物青蒿地上部分的茎叶，在夏秋季花将开时进行采割，除去老茎选取鲜嫩的枝叶，阴干切段使用。实验所用野生青蒿样品，选取秋后成熟的新鲜健壮的、经自然风干的野生青蒿植株，采摘后经室温晾干后作为实验样品，不会对植被环境造成影响。

3.1 青蒿素常温浸提实验条件的选择

青蒿素为无色针状晶体，其紫外吸收光谱特征吸收峰波长为201 nm，见图1。与文献所述［6］青蒿素紫外吸收光谱峰值应当在200～207nm范围内基本吻合。故以此为依据，可以判定实验样品中有没有青蒿素。

图1 青蒿素浸提液A2的UV－Vis光谱图(经活性炭脱色处理)

经活性炭脱色处理之后，UV－Vis光谱较平滑，特征吸收峰明显(图1)。由于青蒿素是无色的，而未经脱色处理的青蒿浸提液呈暗黄色，直接进行紫外－可见分光光度分析，可见杂质峰较多，干扰严重(图2)，其最大吸收波长在266 nm处，并不是青蒿素的典型吸收峰。

青蒿素的特征吸收峰位于近200nm处，不利于测量。按照文献［6］所述方法，用稀NaOH溶液对青蒿素的乙醇浸提液进行变性处理，特征吸收峰会发生偏移(213nm)(图3)，从而有助于青蒿素特征吸收峰的定性分析。

图2 青蒿素浸提液A1的UV－Vis光谱图(未经脱色处理)

图3 青蒿素浸提液A3的UV－Vis图(经碱液变性处理)

3.2 浸提溶剂的选择

关于青蒿素的浸提溶剂，文献中有采用石油醚、乙醚、氯仿、正己烷、乙醇等有机介质作为浸提溶剂的［8］。但是它们大部分对人体有害，不适宜作为食品、药品中有用成分的浸提溶剂。而乙醇对人体无害且易于蒸发，通过蒸发的方式很容易进行分离，所以采用乙醇作为青蒿素的浸提溶剂较为合适［9］。实验采用石油醚和乙醇作为对照溶剂进行青蒿素的浸提实验，从浸提效果来看，差别不大(图4)。