低分子量肝素对大鼠SAP胰腺和肺组织形态学的影响
2018-12-21刘斌焰邢雁霞赵一锦刘斌钰
刘斌焰 ,邢雁霞 ,赵一锦 ,李 祥 ,李 婷 ,王 佳 ,刘斌钰 ∗
(1.山西大同大学医学院,山西大同037009;2.山西大同大学呼吸病与职业病研究所,山西大同037009)
急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)是临床常见的急腹症,大约25%可转化为重症急性胰腺炎(Se⁃vere Acute Pancreatitis,SAP)[1]。SAP病变凶险、常伴有全身的多器官并发症[2-3],因此死亡率较高。SAP是多病因疾病,与胰酶过度自身消化、胰腺微循环障碍、炎症细胞过度激活及肠道细菌易位等有关。低分子量肝素(low molecular weight heparin,LMWP)具有抗凝、抗炎、降血脂和免疫调节等作用[4]。课题组前期研究显示LMWP对大鼠SAP的肝和肾组织损伤具有保护作用[5-6],本实验探讨LMWP对大鼠SAP胰腺和肺组织形态学的影响作用。
1 材料和方法
1.1 药品与动物
低分子量肝素为北京永康药业产品(15100501);雄性Wistar大鼠,体质量400±25 g,购于北京维通利华公司。
1.2 试剂
牛磺胆酸钠为美国Sigma公司产品,血清TNF-a和IL-6试剂盒为碧云天公司产品,苏木精和伊红为北京中杉金桥公司产品。
1.3 仪器
冰冻切片机(Leica,CM1950),台式冷冻离心机(D78532型)德国Hettich公司;酶标仪(ELX800型)美国BIO-TEK仪器公司。
1.4 方法
取雄性Wistar大鼠36只,采用牛磺胆酸钠制备SAP模型,造模方法参见文献[7];造模后随机分为2组,模型组和低分子量肝素组(简称肝素组),模型组立即给予等剂量溶剂,肝素组给予低分子量肝素100 iu/kg,每日2次腹腔注射,0.1 mL/100 g每次;每组又分为术后6、12和24 h 3个亚组,6只/组。
1.5 组织标本制备
各组于术后6、12和24 h取胰腺和肺组织,置10%中性缓冲甲醛液中固定24 h,常规制成石蜡块切片,苏木精—伊红(HE)染色,供病理检测。光镜下采集术后6、12和24 h大鼠胰腺和肺组织图像,拍照并统计每个完整切面的炎细胞数;……
