郭 珍（浙江大学医学院附属第二医院，浙江杭州310009）

血培养是临床上检测患者血液或胸腔积液等体液中有无细菌感染的一种微生物检测方法。早诊断并尽早采取有效的治疗是降低败血、菌血症等感染引起的病死率的重要手段[1]。本院采用BacT/ALERT 3D全自动血培养仪进行标本检测，并对分出的病原菌进行药敏试验。本文回顾性分析2017年4月至2018年3月本院细菌检测阳性结果的情况，并对分离出的病原菌进行菌群分布和耐药情况分析，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

1.1.1 标本来源 选取本院2017年4月至2018年3月门诊和住院478例患者的血液阳性培养标本。包括大肠杆菌ATCC35218、大肠杆菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603、金黄色葡萄球菌ATCC29213和粪肠球菌ATCC29212。所有标准菌株均购自国家卫生健康委员会临床检验中心。

1.1.2 试剂与仪器 BacT/ALERT 3D全自动血培养仪（购自法国梅里埃公司）及培养需氧培养瓶（BPA）和厌氧培养瓶（BPN）、20 mL规格注射器，血平板和麦康凯平板，细菌培养箱（购自日本三洋公司），VITEK-2 Compact全自动细菌鉴定及药敏分析系统（购自法国梅里埃公司）。

1.2 方法

1.2.1 细菌培养 患者皮肤消毒后采用无菌注射器采集12 mL左右血液，立即注入培养瓶中，BPA、BPN培养瓶各注入5～6 mL。培养瓶立即送往检验科，在30 min内放入BacT/ALERT 3D全自动血培养仪中在（36±1）℃条件下培养至出现阳性报警信号或未出现报警信号时培养至第7天。

1.2.2 细菌鉴定及药敏分析 出现阳性报警的标本培养瓶采用无菌方法取出少量培养物转种到血平板和麦康凯平板。放入35℃细菌培养箱中培养24～48 h。分离单个菌落采用VITEK-2 Compact细菌鉴定和药敏分析系统进行菌株鉴定和药敏分析。

1.3 统计学处理 采用Excel2010软件对菌群分布和耐药性数据进行统计分析。

2 结 果

2.1 阳性标本菌群分布结果 在478例阳性标本分离出的菌株中，肠道杆菌325例（68.0%），其后依次为葡萄球菌111例（23.3%）、非发酵菌13例（2.7%）、链球菌10例（2.0%）。肠道杆菌中最多的是大肠杆菌167例（34.9%）；葡萄球菌中最多的是表皮葡萄球菌39例（8.2%）。见表1。

2.2 主要病原菌对常见抗菌药物耐药性分析

2.2.1 肠道杆菌对常见抗菌药物的耐药情况 大肠杆菌对氨苄西林耐药率为85.0%，对环丙沙星、头孢曲松、复方磺胺甲噁唑和左氧氟沙星的耐药率分别为55.1%、53.9%、52.7%和52.1%，对含酶抑制剂类和碳青霉烯类药物较为敏感。肺炎克雷伯菌对氨苄西林耐药率为87.5%，对头孢曲松和复方磺胺甲噁唑耐药率分别为37.5%、32.5%。结果显示，第三、四代头孢菌素，磺胺类及氟喹诺酮类抗菌药物对肺炎克雷伯菌均有较好的抗菌活性。见表2。

表1 478例阳性标本菌群分布结果

表2 肠道杆菌对常见抗菌药的耐药情况

2.2.2 葡萄球菌对常见抗菌药物的耐药情况 耐药情况结果见表3。

表3 葡萄球菌对常见抗菌药耐药情况

3 讨 论

使用全自动血培养仪检测患者标本可以缩短诊断时间、提高诊断效率[2]。全自动血培养仪在使用过程中也会受到各种因素的干扰，影响其检测性能[3]。需要对检测结果进行综合分析，进一步了解本检测项目的性能。

本研究对阳性标本菌群分析结果显示，肠道杆菌是血液感染的主要病原菌，其中以大肠杆菌为主。其后依次为葡萄球菌、非发酵菌和链球菌，这一结果与其他研究报道基本一致[4-5]。这一结果表明，临床上引起菌血症和败血症的病原菌主要为肠杆菌科和葡萄球菌属细菌，为临床治疗提供有力的依据。

本研究通过对分离出的细菌耐药性分析发现，大肠杆菌对氨苄西林、环丙沙星、头孢曲松、复方磺胺甲噁唑和左氧氟沙星的耐药率均在50.0%以上，对庆大霉素耐药率为46.7%，而对含酶抑制剂类和碳青霉烯类药物的耐药率较低。肺炎克雷伯菌对第三、四代头孢菌素，青霉素类酶抑制剂，磺胺类及氟喹诺酮类抗菌药物均具有较低的耐药性，其耐药率都在25.0%以下。本研究中对碳青霉烯类耐药的肠杆菌科细菌较其他报道少[6]，可能与本院严格控制临床碳青霉烯类抗菌药物的使用有关。肠杆菌科细菌耐碳青霉烯类药物的主要机制是产生碳青霉烯酶及细菌外膜机制等[7]，临床合理选择抗菌药物，对降低分离病原菌耐药率起关键性作用。

血培养中的葡萄球菌以表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌为主。表皮葡萄球菌是血流感染中检出率最高的一种革兰阳性菌[8]，也是报道导致血培养假阳性结果最常见的一种污染菌[9]，同时报道也指出凝固酶阴性葡萄球菌在血流感染的病原菌中检出率逐渐增高[10]。这种变化趋势的主要原因是在手术、创伤的处置、留置静脉导管时[11-12]，以及对于人工心脏瓣膜或其他装置植入时无菌操作不够严格[13]，都可能导致凝固酶阴性葡萄球菌感染。本研究结果显示，分离出的金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮类药物、利福平、磺胺类药物及庆大霉素具有较低的耐药性。

综上所述，本院血培养阳性标本中分离出的病原菌以肠道杆菌为主，大肠杆菌的分离率最高，对氨苄西林、环丙沙星、头孢曲松、复方磺胺甲噁唑和左氧氟沙星耐药率较高，对含酶抑制剂类和碳青霉烯类药物较为敏感。对培养主要病原菌分布及其耐药性进行监控分析，有利于为血流感染的临床诊断和治疗及合理用药提供依据。