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(1.山东省青岛市西海岸新区灵珠山社区卫生服务中心，山东 青岛 266500； 2. 内蒙古国际蒙医院，内蒙古 呼和浩特 010065)

协日嘎-4颗粒剂由姜黄、栀子、黄柏和蒺藜组成，具有解热、消淋、利尿的作用，临床常用于尿道炎，尿频尿急。本实验观察其镇痛、抗炎、利尿及抑菌作用。

1 实验材料

1.1 药品与试剂 协日嘎-4颗粒剂，批号15101501，由内蒙古国际蒙医医院提供，颗粒剂对药材1g：1.7g。氢氯噻嗪片山西利丰华瑞制药公司，批号150103，以蒸馏水配制成0.5g/kg的混悬液。阿司匹林沈阳奥吉娜有有限公司，批号150106，以蒸馏水配制成0.2g/kg的混悬液。

1.2 仪器 电子天平赛多利斯科学仪器有限公司，智能热板仪成都泰盟软件公司、型号RB-200T。

1.3 动物 小鼠昆明种，雄雌各半，体重20g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。

1.4 菌株 金黄色葡萄球菌标准菌株ATCC25923和大肠埃希菌25922由中国药品生物制品鉴定所提供。

2 方法

2.1 对小鼠扭体镇痛[1]小鼠60只，雄雌各半，体重30～40g，按体重、性别均衡随机分为5组，对照组以蒸馏水、阿司匹林组0.2g/kg、协日嘎-4颗粒剂组低、中、高剂量(1.5、3.0、6.0g/kg)，每天灌胃给药1次，给药体积20mL/kg，连续7次，末次给药30min，腹腔注射0.7%乙酸溶液， 0.1mL/10g，记录注射致痛剂后15min内小鼠扭体次数，见表1。

2. 2 对热板刺激镇痛[2]用热板致痛仪(温度55±0.5℃)筛选两次痛阀平均值低于30s并大于5s的雌性小鼠50只，随机分为5组，对照组以蒸馏水， 阿司匹林组(0.2g/kg)，协日嘎-4颗粒剂剂高、中、低浓度(6.0、3.0、1.5/kg)，给药体积为(20mL/kg)，每天灌胃给药1次，连续7次。测定给药后15、30、60、90min痛阀值，见表2。

镇痛百分率=(给药后痛阀值-给药前痛阀值)/给药前痛阀值%。

2.3 利尿作用[2]小鼠滤纸称重法：取小鼠50只，按体重随机分为5组，对照组蒸馏水， 氢氯噻嗪0.5g/kg(0.2mL/10g)，协日嘎-4颗粒剂剂高、中、低浓度(6.0、3.0、1.5/kg)，给药体积为(20mL/kg)，每天灌胃给药1次，连续7次，给药6次后禁食不禁水。第7次给药后 ，随即将小鼠放入垫有滤纸的烧杯中，每h换纸1次，称量滤纸，观察3h，以滤纸增重作为排尿量，见表3。

2.4 抗炎作用[1]小鼠50只，体重26～30g，随机分为5组：对照组以蒸馏水，阿司匹林组0.2g/kg，协日嘎-4颗粒剂剂低、中、高剂量组(1.5、3.0、6.0/kg)，各组均采用灌胃给药，连续给药7次，给药体积为20mL/kg，末次给药1h，每鼠右耳涂二甲苯0.1mL，15min后，颈椎脱臼处死，剪下双耳，用直径9mm打孔器在左右耳廓相同部位打孔取材，分别称重，以左右两耳重量之差为肿胀度，并计算抑制率，见表4。肿胀抑制率=(对照组—给药组/对照组)，结果见表4。

2.5 体外抑菌作用[3]协日嘎-4颗粒剂加生理盐水溶解，浓度36%，离心取上清液，以二倍稀释法测定最小抑菌浓度(MIC)。以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌为试验菌株，见表5。

2.6 体内抑菌作用[3]小鼠60只， 随机分为6组，每组10只，对照组以蒸馏水，模型组以蒸馏水，阳性药组(庆大霉素2000u/20g)，协日嘎-4颗粒剂剂低、中、高剂量组(1.5、3.0、6.0/kg)，各组均采用灌胃给药，2次/d，连续给药3d后，腹腔接种大肠杆菌肉汤增菌液 0.4 mL / 只， 接种后继续给药4d，观察记录各组小鼠死亡情况，见表6。

3 实验结果

3.1 对扭体作用 协日嘎颗粒剂对乙酸溶液的腹腔刺激疼痛反应有显著抑制作用，与对照组比较均有显著性差异(P<0.05)，见表1。

表1 协日嘎-4颗粒剂对乙酸致小鼠扭体反应的影响

注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01

3. 2 对热板作用 协日嘎颗粒剂对热板刺激疼痛反应有显著抑制作用，与对照组比较均有显著性差异(P<0.05)，见表2。

表2 协日嘎-4颗粒剂颗粒剂剂热板刺激小鼠疼痛反映的影响

注：与对照组比较， *P<0.05，**P<0.01

3.3 对利尿作用 协日嘎散剂具有显著利尿作用，与对照组比较差异显著(P<0.01)；协日嘎-4颗粒剂剂低中高浓度对不同时间点具有不同程度的利尿作用，与对照组比较差异显著(P<0.05)，结果见表3。

表3 协日嘎-4颗粒剂对小鼠排尿量的影响

注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01

3.4 对二甲苯炎症 协日嘎四味颗粒剂对二甲苯小鼠耳廓肿胀程度有显著抑制作用，与对照组比较差异显著(P<0.05)，见表4。

表4 协日嘎-4颗粒剂对二甲苯小鼠耳廓肿胀的影响

注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01

3.5 对体外抑菌作用 协日嘎-4颗粒剂98.1μg/mL对金葡菌生长抑制MIC90为126.2μg /mL，78.8μg/mL对大肠埃希菌生长抑制MIC90为 112.6μg/mL，见表5。

表5 协日嘎-4颗粒剂对金黄色葡萄球菌的体外抗菌活性

3.6 体内抑菌作用：协日嘎-4颗粒剂对腹腔接种大肠杆菌肉汤增菌液 致死作用无明显作用，与模型组比较无显著差异(P>0.05)，见表6。

4 讨论

尿路感染(尿感)属于蒙医学中尿闭症的赤巴淋症范畴。蒙医认为，赤巴淋症治宜清热利尿，通淋止痛。现代医学认为，尿路感染主要由细菌引起，其中以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌最为常见。协日嘎-4颗粒剂由姜黄、栀子、黄柏和蒺藜组成，具有清热，利尿的作用[4]，用于尿道炎，尿频，尿急。 本实验结果显示， 协日嘎-4颗粒剂具有显著镇痛、抗炎及利尿作用，体外抑菌作用明显，对体内无明显抑菌作用。

表6 协日嘎-4颗粒剂对小鼠感染大肠杆菌的抑制作用

注：与模型组比较 *P<0.05 **P<0.01