白春杰

(内蒙古通辽市食品药品检验所, 内蒙古 通辽 028000)

玉日力-13是由木香、栀子、石榴、绿绒蒿、瞿麦、香青兰、信筒子、雕粪、丹参、荜茇、高良姜、芫荽果、山奈等13味中药粉碎后制成的水丸。其功效为提阳健胃，消积化痰。本试验对玉日力-13中木香所含的药用成分木香烃内酯和去氢木香烃内酯利用高效液相色谱法进行含量测定，结果，测定准确，方法可靠，可作为玉日力-13的质量控制方法。

1 材料

1.1 仪器 Waters 2695-2998型高效液相色谱仪(美国科学仪器公司)，Empower 2色谱工作站；色谱柱：Alltima C18柱 (250×4.6mm，粒度5μm)；XS3DU 型电子天平(百万分之一，梅特勒托利多)，AL204-IC 型电子天平(梅特勒托利多)；KQ5200DE型数控超声波清洗器。

1.2 试药与试剂 甲醇(色谱纯，国药集团化学试剂有限公司)；水为试验用高纯水。其它试剂为分析纯。木香烃内酯对照品(纯度：98.42%，编号：CSL-112723，产地：Standford Analyical Chemicals Inc U.S.A)；去氢木香烃内酯对照品(纯度：99.94%，编号：DDS-260960，产地：Standford Analyical Chemicals Inc U.S.A)，供试品由新疆博尔坦拉蒙古族自治州蒙医医院提供，批号为：20161017、20170220、20160817，阴性样品(自制)。

2 方法学考察

2.1 色谱条件 流动相：以甲醇-水(65：35)为流动相，流速为0.8mL/min[1]；柱温25℃；检测波长为225nm；进样量：10μL[2]。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取木香烃内酯对照品7.69mg和去氢木香烃内酯对照品8.06mg置100mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每1mL含木香烃内酯对照品76.9μg和去氢木香烃内酯80.6μg)。

2.2.2 供试品溶液的制备 取本品，研成细粉，精密称取约1 g置具塞三角瓶中，精密加入甲醇25mL，称重，密塞，摇匀，放置过夜，超声处理30min，放冷，再称重，用甲醇补足减失重量，摇匀，以0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。

2.3 线性关系的考察 精密量取2.2.1项下对照品溶液5、10、20、30、40μL分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，记录色谱图及峰面积值，以峰面积值(A)为纵坐标，进样量(W:μg)为横坐标，绘制标准曲线，结果木香烃内酯和去氢木香烃内酯在0.1922～1.5380μg和0.2015～1.6120μg范围内呈良好的线性关系。回归方程分别为：Y=2102214.5X-28969和Y=1741599.2X-44604.2，r分别为0.9998和0.9996。

2.4 精密度试验 精密量取同一批供试品溶液(20160817)10μL，连续进5次，测定峰面积值，结果木香烃内酯和去氢木香烃内酯峰面积平均值分别为1572400和1470572，RSD分别为0.6%和1.1%，精密度良好。

2.5 稳定性试验 精密量取同一批供试品溶液(20170220)每间隔3h进样，于0、3、6、9、12、15、18h进样测定，记录峰面积值，结果木香烃内酯和去氢木香烃内酯峰面积平均值分别为1565051和1458110，RSD分别为0.5%和1.6%，表明供试品溶液稳定性良好。

2.6 重现性实验 取同一批号(20161017)供试品溶液5份，研细，精密称取各约1g，按上述色谱条件测定每份样品峰面积值，按外标法计算含量。结果木香烃内酯和去氢木香烃内酯平均含量分别为1.7642 mg/g和 2.1375mg/g，RSD分别为0.6%和0.5%，表明本试验重现性良好。

2.7 加样回收率试验 精密称取木香烃内酯和去氢木香烃内酯含量分别为1.77mg/g和2.15mg/g的供试品5份，各约0.5g，置具塞三角瓶中，精密加入2.2.1项下对照品溶液12mL，再精密加入甲醇13mL，按2.2.2项下的方法操作并按上述色谱条件及方法测定每份供试品含量，计算回收率，结果见表1和表2。

表1 木香烃内酯加样回收试验结果

表2 去氢木香烃内酯加样回收试验结果

3 样品含量测定

样品含量测定 取3批供试品(批号为20161017、20170220、20160817)按2.2.2项下供试品溶液的制备方法处理并测定，按外标法分别计算含量，3批样品的测定结果见表3、表4。该条件下木香内酯与去氢木香内酯的保留时间分别为29.09min和34.93min。

表3 样品中木香烃内酯含量测定结果

表4 样品中去氢木香烃内酯含量测定结果

4 阴性对照试验

取按处方比例及制备方法制备不含木香的阴性样品，同供试品操作，制备阴性样品溶液，与样品同法测定，测得结果为：阴性对照色谱图中在与对照品色谱图对应的保留时间处无色谱峰出现，表明其他组分对玉日力-13中木香烃内酯和去氢木香烃内酯的测定无干扰，对照品、样品和阴性样品色谱图见图1。

5 讨论

5.1 本方中木香为主药，而木香烃内酯和去氢木香烃内酯为木香中的主要有效成分[3]，具有行气止痛，健脾消食等功效[4]。本试验以木香烃内酯和去氢木香烃内酯为指标，建立含量测定方法，经验证表明，该方法重复性与稳定性良好，精密度较高，回收率符合要求，可进一步提升该品种的可控性。

5.2 检测波长的选择 用紫外分光光度计测定木香烃内酯和去氢木香烃内酯的吸收光谱，其最大吸收波长在225±2nm，故确定测定波长为225nm。

5.3 系统适用性试验 木香烃内酯和去氢木香烃内酯的理论塔板数均大于3000(N≥3000)，拖尾因子分别为0.98和0.95。木香烃内酯与相邻阴性对照峰的分离度为1.93>1.5[2]，木香烃内酯与去氢木香烃内酯的分离度为5.49，分离度符合要求。

5.4 样品测定试验 样品测定试验中，由于木香烃内酯与相邻阴性对照峰保留时间较接近，故选择流速为0.8mL/min，达到很好分离，分离度为1.93。

5.5 本检测方法操作简便、准确、专属性强，故认为可作控制玉日力-13的检测方法。