脓毒血症性急性肾损伤的发生机制
2018-10-26马成龙曾加礼
马成龙,曾加礼
脓毒血症是指致病菌感染导致的宿主反应紊乱,引发的致命性器官功能障碍的病症[1-2]。急性肾损伤(AKI)是脓毒血症常见且最严重的并发症[3]。脓毒血症性AKI的主要临床表现为肾小管上皮细胞出现急性损伤,提示患者病情加重,甚至可能引起多脏器衰竭。研究表明,脓毒血症性AKI的发病机制与肾脏血流动力学变化、炎症介质浸润、肾脏细胞凋亡等相关[4],其中肾小管上皮细胞凋亡可能起重要作用[5]。有研究报道,Tec非受体型激酶与脓毒血症的发病机制相关,成为治疗脓毒血症的新靶点[6],但是Tec非受体激酶在脓毒血症AKI发病中扮演什么角色,是否与脓毒血症AKI的发病过程相关,尚未得知。因此,本研究分析讨论了Tec非受体激酶在脓毒血症性AKI发病过程中的变化,探讨其在脓毒血症性AKI发病机制中的作用。
1 材料与方法
1.1 主要试剂与设备 Immun-blot PVDF膜(Bio-Rad公司,美国);ECL化学发光试剂盒(Pierce公司,美国);LC3-Ⅱ及 Beclin-1的蛋白单克隆抗体(Pierce公司,美国);Experion全自动电泳系统(Bio-rad公司,美国)。
1.2 动物分组及样本采集 选取健康雄性清洁级雄性SD大鼠(中科院上海实验动物中心,合格证书2015-025)32只,随机分为2组,每组16只,常规饲养7 d。模型组给予腹腔注射脂多糖(LPS)20 mg/kg建立脓毒血症模型,建模成功后进行充分的液体复苏。正常组给予腹腔注射等量生理盐水。分别在建模后1、24和48 h,麻醉动物,心脏穿刺取血,置于EP管中静置,待凝固后于37℃水浴30 min,离心分离血清备用(当天检测)。此外,在建模后1、24和48 h,每组各随机选择4只大鼠,取右肾上极组织,10%福尔马林固定,石蜡包埋、切片,苏木素伊红(HE)染色,于显微镜下观察肾小管细胞形态。……
