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H9N2亚型流感病毒核酸参考品研制及荧光RT-PCR检测验证

2018-10-25宋洁李翠李晶张爽范文辉刘丽蓉贾泓毅俞蔼毕郝客牛春艳王晶赵启祖刘文军

生物工程学报 2018年10期
关键词:检测方法

宋洁,李翠,李晶,张爽,范文辉,刘丽蓉,贾泓毅,俞蔼毕,郝客,牛春艳,王晶,赵启祖,刘文军

1 中国科学院微生物研究所 中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室,北京 100101

2 中国科学院大学,北京 100049

3 中国兽医药品监察所,北京 100081

4 北京海淀外国语实验学校,北京 100195

5 中国计量科学研究院,北京 100013

H9N2亚型流感病毒属于低致病性流感病毒,机体感染该病毒后一般表现为呼吸道或消化道局限性感染症状,并导致条件性致病的继发感染。病毒侵入机体后可在消化道和呼吸道内不断增殖,随粪便或分泌液排出,在外界环境中有很强的抵抗力,可存活相当长的时间,并通过污染水源、饲料或鸡舍内设施而水平传播感染。此外,该病毒可与呼吸道病原菌混合感染,增强其致病性,并加剧临床症状,提高继发感染率。

H9N2亚型流感病毒具有较强的跨宿主传播能力,不仅感染鸟类,同时也可跨宿主感染包括人在内的猪犬等哺乳动物,并在传播过程中不断与其他亚型的禽流感病毒发生重组变异[1]。尽管目前对该疫病的感染溯源还不清楚,但研究人员已从我国多地区检测到H9N2亚型流感病毒[2-3]。该病诊断常采用传统的鸡胚病毒分离法,但该方法检测成本较高,费事、费力,在某些情况下,应用 RT-PCR方法来检测病原已逐步替代鸡胚病毒分离法[4],但分子生物学方法因人员操作及检测系统差异等存在较大误差,而以核酸标准物质为参比,可校准检测方法并标定被检样品。目前流感 H9N2亚型病毒的核酸标准物质国内外均未见报道,且无该标准物质提供,导致H9N2亚型流感病毒核酸检测标准至今尚未统一。……

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