低剂量辐射诱导小鼠睾丸细胞中IRE1α和XBP1 mRNA及其蛋白的表达
2018-10-10龚守良王志成王剑锋
于 雷,唐 庚,方 芳,李 鑫,龚守良,王志成,王剑锋
(1.吉林大学第二医院放疗科,吉林 长春 130041;2.吉林大学公共卫生学院 卫生部放射生物学重点实验室,吉林 长春 130021;3.吉林大学中日联谊医院放疗科,吉林 长春 130033)
2011年日本福岛核电站泄漏事件后,辐射高本底环境是否影响人类健康再次引起广泛关注,其焦点是致癌问题。低剂量辐射(low dose radiation,LDR)的生物效应区别于高剂量诱导的损伤,但LDR诱导的效应仍不确定[1-2]。LDR诱导的损伤效应主要依据是线性无阈模型(linear no threhold,LNT),任何剂量的电离辐射都有致癌的可能性[3-4]。但也有学者[5-6]认为:LDR可诱导适应性反应和兴奋性效应。睾丸是辐射敏感的器官,极低剂量就能引起睾丸生精细胞凋亡[7-8],并且具有一定的剂量和时程-效应规律性。前期研究[9]显示:LDR能够诱导小鼠睾丸生精细胞内质网应激的发生,并且启动了凋亡信号通路。肌醇需求酶1(inositol-requiring enzyme-1,IRE1)是一种定位在内质网膜的具有激酶和核酸内切酶活性的双功能酶,可以被内质网应激激活,从而激活多条下游信号通路,其中X盒结合蛋白1(X box-binding protein-1,XBP1)是最早发现并且最受关注[10],是重要的内质网应激信号调节通路。本实验旨在通过检测LDR后小鼠睾丸细胞中肌醇需求酶1α(inositol-requiring enzyme-1α,IRE1α)、Total-XBP1(T-XBP1)、spliced XBP1(S-XBP1 )mRNA及蛋白的表达,阐明IRE1-XBP1通路的激活在LDR诱导小鼠睾丸内质网应激信号调控中的作用。
1 材料与方法
1.1 实验动物和照射处理方法 50只健康雄性ICR小鼠,体质量(18±2)g,由吉林大学白求恩医学部实验动物中心提供,动物合格证号:SXCK(吉)203-00007,随机分为10组,每组5只。时程-效应实验为75 mGy照射后0、3、6、12和24 h处死动物,剂量-效应实验为0、50、75、100和200 mGy照射后12 h处死动物。……