柳文军，李爱堂，喻明曦，王津津，李欣苗，樊良帅

（1.东乡族自治县农牧局河滩镇农技站，甘肃 东乡 731400；2.甘肃农业大学农学院，甘肃 兰州730070）

柴胡（Bupleurum chinense DC.）为伞形科多年生草本植物，药材名为柴胡，始载于《神农本草经》，列为上品［1］。柴胡味辛、苦，性微寒，归肝、胆、肺经，具有疏散退热、疏肝解郁、升举阳气、抗病毒感染、抗溃疡、抗肿瘤、免疫调节和保肝等多种作用，素有“良药中良药”之称［2-7］。我国人工栽培的柴胡，长期以来无新品种，家种柴胡主要靠自留种，各地农家栽培类型构成了家种柴胡的品种来源［8］。近年来，由于天然野生柴胡被无限采挖，导致全国柴胡产量急剧下降。随着对柴胡药理作用研究的不断深入，特别是柴胡产品的进一步的开发利用，使柴胡的市场需求量逐年增加。但柴胡以种子繁殖，发芽率极低，发芽过程所需时间长，造成种子发霉从而失去发芽力，即使萌发，出苗率也不整齐。种子直接影响播种出苗和幼苗的健壮程度，进而影响药材产量和质量，极大的限制了柴胡的人工栽培［9-11］。我们以柴胡种子为研究对象，研究不同处理方法对柴胡种子发芽率的影响，以期为柴胡种子发芽率的研究及柴胡人工栽培和育种提供参考。

1 材料与方法

1.1 供试材料

供试材料为甘肃省主栽的二年生柴胡种子，甘肃农业大学农学院中草药栽培与鉴定系鉴定为柴胡（Bupleurum chinense DC.）种子。

1.2 试验方法

试验于2016年3—4月在甘肃农业大学中草药栽培与鉴定实验室进行。选取籽粒饱满、无病虫害的柴胡种子，用蒸馏水洗净，去瘪，用70%乙醇将种子浸泡消毒处理，再进行自来水浸种、沙藏处理及6-BA、赤霉素、H2O2和KMnO4药剂处理（表1）。将处理后的柴胡种子均匀地摆放到铺有滤纸的培养皿中，每皿50粒，加盖，贴上标签，重复3次，放入人工气候箱中培养，温度控制在20℃，试验过程中保持滤纸湿润，观察记录柴胡种子发芽情况。以种子露白为发芽标准，每间隔24 h统计数据1次。

发芽率=（正常发芽种子数/供试种子数）×100%。

2 结果与分析

2.1 自来水浸泡时间对柴胡种子发芽率的影响

由表2可知，柴胡种子在发芽试验第14 d时，a3和a4发芽率最高，均为28.67%，较CK增加了0.67百分点；a2发芽率最低，为15.33%，较CK降低了12.67百分点。在第28 d，a4发芽率最高，为30.67%，较CK增加了0.67百分点；a2发芽率最低，为17.33%，较CK降低了12.67百分点。且随着时间增加，除a1外其余各处理的柴胡种子发芽率均有一定程度的增加，但增加幅度较小。

表1 柴胡种子处理方法

2.2 不同浓度H2O2对柴胡种子发芽率的影响

由表3可知，在第14 d和第28 d，用不同浓度H2O2浸泡处理的柴胡种子发芽率均低于CK。其中，处理为b1最高，分别为14.00%和16.00%；其次为b2，最低的是b3。由此可知，在相同浸泡时间下，柴胡种子的发芽率随着H2O2浓度的升高而降低。

表2 自来水浸泡时间对柴胡种子发芽率的影响①

2.3 不同浓度KMnO4对柴胡种子发芽率的影响

由表4可知，经不同浓度KMnO4浸泡处理的柴胡种子发芽率不同。处理后第14 d，不同浓度KMnO4浸泡的柴胡种子发芽率均低于CK，分别较CK降低8.00、9.33、12.67、4.00百分点；在第28 d，除c4较CK增加1.33百分点外，其余各处理分别较CK降低4.67、2.67、10.00百分点。不同浓度KMnO4浸泡的柴胡种子，第14 d和第28 d发芽率最高的均为c4处理，分别为24.00%和31.33%，与CK相比分别增加了-4.00、1.33百分点。同一浓度KMnO4浸泡处理的柴胡种子随时间的增加发芽率提高，其中，c1、c2、c3和c4处理在第28 d其发芽率较第14 d分别增加5.33、8.66、4.67、7.33百分点。

2.4 不同浓度6-BA对柴胡种子发芽率的影响

用不同浓度的6-BA对柴胡种子浸泡处理24 h后观察发现，柴胡种子没有发芽，这可能与6-BA的浓度有关。成丹［12］等人研究发现，6-BA浓度低时促进种子发芽，浓度过高时抑制种子发芽。出现这一结果可能是浸泡柴胡种子的6-BA浓度过高，严重抑制了种子的发芽。

2.5 不同浓度赤霉素对柴胡种子发芽率的影响

由表5可知，在处理后第14 d，未进行加热的赤霉素浓度不同对柴胡种子发芽情况影响不同，但各处理均低于CK。其中，在e1和e3处理下种子未见发芽；其次是e2，为1.33%。用加热到100℃的不同浓度的赤霉素浸种，随浓度的增加发芽率提高。其中e6最大，为30.00%，高于CK，较CK高2.00百分点。e3未见发芽，e5低于CK，较CK低10.00百分点。

在处理后第28 d，未进行加热的赤霉素在e2处理下，发芽率最高，其次依次为e3、e1，但均低于CK；加热到100℃的不同浓度的赤霉素，随赤霉素浓度的增加发芽率提高，其中，e6处理下高于CK，较CK高2.00百分点。其余各处理下均低于CK，其中e4未见发芽，e5较CK低2.67百分点。

表3 H2O2浸泡对柴胡种子发芽率的影响

表4 KMnO4浸泡对柴胡种子发芽率的影响

表5 赤霉素浸泡对柴胡种子发芽率的影响

表6 沙藏对柴胡种子发芽率的影响

在相同浓度下，不同加热处理的赤霉素对柴胡种子发芽率的影响，除e1和e4均未见发芽，其余各浓度下加热处理的均高于未加热的。其中在处理后第14 d，e5较e2高16.67百分点，e6较e3高30.00百分点；在处理后第28 d，e5较e2高26.00百分点，e6较e3高31.33百分点。随发芽时间的增加，除e1和e4发芽率无变化外，其余各处理发芽率均增大。

由此可知，用未加热的赤霉素浸泡处理，对柴胡种子的萌发有不同程度的抑制作用；用加热到100℃的赤霉素浸泡处理，随着赤霉素浓度的增加，柴胡种子发芽率提高。

2.6 沙藏处理对柴胡种子发芽率的影响

由表6可以看出，沙藏处理后的柴胡种子发芽率低于CK，处理后第14 d发芽率仅为8.00%。第28 d后发芽率仅为10.00%，较CK均降低了20.00百分点。由此可知，沙藏处理后的柴胡种子发芽率较CK有大幅度的降低。

3 小结与讨论

对柴胡种子进行自来水浸种、沙藏处理及6-BA、赤霉素、H2O2和KMnO4药剂处理后进行发芽试验，从试验结果可以看出，不同处理对柴胡种子的发芽率有较大影响。柴胡种子经自来水浸泡随浸泡时间的延长，发芽率升高，H2O2、6-BA、沙藏对柴胡种子发芽有抑制作用。适宜浓度的KMnO4和赤霉素对柴胡种子发芽有促进作用。其中，用加热100℃的60 mg/L赤霉素浸泡24 h，柴胡种子发芽率优于其他处理，发芽率为32.00%；用自来水浸泡48 h的次之，为30.67%；用6-BA处理过的粒柴胡种子均未发芽，究其原因，可能是6-BA浓度太大，抑制了柴胡种子的发芽。