高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿配方奶粉中酪蛋白磷酸肽含量
2018-10-08张京顺蒋易蓉果基施锑任一平
胡 蓓,张京顺,柯 星,蒋易蓉,周 健,果基施锑,任一平,*
(1.浙江工业大学化工学院,浙江 杭州 310014;2.浙江省疾病预防控制中心,浙江 杭州 310051;
3.浙江大学生物系统工程与食品科学学院,浙江 杭州 310058;4.阿尔拉食品原料贸易(北京)有限公司,北京 100035)
酪蛋白磷酸肽(casein phosphopeptides,CPPs)是牛酪蛋白经单一酶或复合生物酶水解后的产物,分布于αs1-、αs2-、β-以及κ-酪蛋白中的不同区域。CPPs已被我国批准作为添加剂,应用于各种营养品、保健食品,能有效提高人体对钙、铁、锌等二价矿物质的摄入及吸收利用率[1-5];同时,CPPs还有预防龋齿[6-7]、有助于促进动物体外受精[8]、增强机体免疫力[9]和诱导细胞凋亡的生理功能[10]。CPPs生物活性的核心结构为:-Ser(P)-Ser(P)-Ser(P)-Glu-Glu-(Ser:丝氨酸,Glu:谷氨酸,P:磷酸基)[11]这一结构中,磷酸丝氨酸残基(-Ser(P)-)成簇存在,在肠道弱碱性环境下带负电荷,可阻止CPPs在消化酶的作用下进一步被水解,从而在小肠中稳定存在。研究发现,CPPs中氮磷比越小,其肽链越短,磷酸基的密度越大,则促进钙吸收作用越强[12]。此外还有研究证明CPPs的作用效果还与分子中氨基酸组成顺序或磷酸基分布有关[13-14]。CPPs有较强的促进钙吸收作用以及良好的高温稳定性[15],因此,随着钙高效辅助吸收剂的推广,将CPPs(以牛乳或酪蛋白制品为原料,通过酶解生产工艺制得的食品添加剂[16-19])添加到各种产品中,如保健品、儿童营养食品等。GB 14880—2012《食品营养强化剂使用标准》对CPPs可应用于婴幼儿配方食品、粮食和粮食制品、饮料等,并对使用量(婴幼儿配方食品中≤3.0 g/kg)作了明确规定[20]。
目前普遍采用钡盐沉淀法[21]、电泳法[22-23]、高效液相色谱法[24-25]、高效液相色谱-质谱联用法[26-27]测定CPPs的含量。……
