家蚕微孢子虫极管蛋白1 (NbPTP1)在果蝇S2细胞中的表达与糖基化修饰
2018-10-08龙梦娴谭瑶瑶刘柯柯吴玉娇吕青潘国庆周泽扬
龙梦娴,谭瑶瑶,刘柯柯,吴玉娇,吕青,潘国庆,周泽扬,2
家蚕微孢子虫极管蛋白1 (NbPTP1)在果蝇S2细胞中的表达与糖基化修饰
龙梦娴1,谭瑶瑶1,刘柯柯1,吴玉娇1,吕青1,潘国庆1,周泽扬1,2
1 西南大学 家蚕基因组生物学国家重点实验室,重庆 400715 2 重庆师范大学 生命科学学院,重庆 400047

龙梦娴, 谭瑶瑶, 刘柯柯, 等. 家蚕微孢子虫极管蛋白1 (NbPTP1) 在果蝇S2细胞中的表达与糖基化修饰. 生物工程学报, 2018, 34(9): 1460–1468.Long MX, Tan YY, Liu KK, et al. Expression of Polar Tube Protein 1 (NbPTP1) from Nosema bombycis in Drosophila S2 cell lines and its glycosylation. Chin J Biotech, 2018, 34(9): 1460–1468.
极管蛋白(Polar tube protein)是极管的主要成分,能特异性定位于微孢子虫极管,在微孢子虫侵染宿主过程中发挥重要作用。文中分析了家蚕微孢子虫极管蛋白1中潜在的O-、N-糖基化修饰位点,克隆了家蚕微孢子虫极管蛋白1全基因序列,并将其插入带有V5和His标签的真核表达载体pMT/Bip/V5-His A中,成功构建了pMT/Bip/V5-His A-NbPTP1重组质粒,经转染果蝇S2细胞后,发现NbPTP1基因能在果蝇细胞中高效表达。此外,Lectin blotting和β-消除反应分析结果表明:果蝇S2细胞内表达的NbPTP1具有O-糖基化修饰特征。以上结果为研究NbPTP1的糖基化修饰特征与其功能之间的关系提供了基础,有助于揭示微孢子虫侵染机制,建立可行有效的微孢子虫病诊断和防治措施。
极管蛋白1,果蝇S2细胞,糖基化,家蚕微孢子虫
微孢子虫是一类宿主广泛的细胞内专性寄生的单细胞真核生物[1-3]。迄今已发现约有200个属,1 400多种微孢子虫[4-5],然而不同种属微孢子虫拥有相似的侵染器官和侵染机制。未侵染宿主的微孢子虫,其极管能有序地盘绕在孢子内部;侵染宿主时,成熟孢子能感知外界环境变化并触发极管,长而中空的极管具有强力弹射和类似“注射器”的功能,能在不足两秒时间内完成整个弹出、刺入宿主细胞、运输孢原质的过程[6-8]。……
