吴荣华，吕英然

摘要：高致病性禽流感和新城疫都是由病毒引起的禽类高度传染性疾病，在《中华人民共和国动物防疫法》上同被列为一类动物疫病，都具有传播快、发病急、死亡率高的特征。因此对基层检验检疫机构和各地兽医站来说，能够快速准确地将二者区分开来显得非常重要。本文从临床、血清学等方面介绍了实践中可用于二者的鉴别诊断方法为有效的鉴别高致病性禽流感和新城疫提供参考。

关键词：禽流感；新城疫；鉴别

中图分类号： S858.31 文献标识码： A DOI编号： 10.14025/j.cnki.jlny.2018.16.035

高致病性禽流感是一种人、禽共患的急性传染病，其发病率和死亡率非常高，感染的鸡群常常“全军覆没”，严重威胁着养禽业甚至很多珍稀野生动物的繁衍和生存，从而对经济也造成极大的影响。人接触了病禽及其分泌物，吸入了病禽飛沫，以及误食病禽制品或被病禽污染的食品后，都可能被感染。与此同时，新城疫也一直严重危害养禽业的发展，新城疫是由副黏病毒引起的家禽呼吸困难、神经紊乱、浆膜和黏膜出血的一种急性败血性传染病，该病传播快，死亡率高。发病时若不及时将二者鉴别和控制，则可能引起疫病的流行。

高致病性禽流感和新城疫的诊断主要从临床诊断和实验室诊断两个方面考虑。

1 高致病性禽流感和新城疫的临床诊断

1.1病原学

从病原学上看：高致病性禽流感属正黏病毒科流感病毒属的A型流感病毒。禽流感病毒有两类重要的抗原，它们分别为：表面抗原和型特异性抗原。表面抗原主要指HA和NA，目前已发现有15种，分别命名为H1-H15，N1-N9，其中H5N1可感染人。新城疫病毒属RNA病毒中单股负链病毒目、副黏病毒科、副黏病毒亚科、腮腺炎病毒属的禽副黏病毒。其目前有9个血清型，新城疫病毒属Ⅰ型禽副黏病毒。

1.2流行病学

高致病性禽流感一年四季均可流行，但在冬季和气温骤冷骤热的季节更易爆发。而新城疫一年四季均可发生，但以冬季多发，不同日龄的鸡均敏感。高致病性禽流感病毒宿主广泛，除感染鸡外，鸭、鹅、野鸟、水禽、海鸟、猪等哺乳动物甚至人均可感染。新城疫对鹅、鸭的致病力弱，一般不发病，没有感染人的报道。

1.3临床症状

高致病性禽流感潜伏期和病程比新城疫短，即发病急、病程短、死亡快，家禽呈急性发病死亡；鸡冠出血或发绀，头部水肿，脚鳞出血；鸭、鹅等水禽可见神经症状和腹泻。高致病性（最急性）的新城疫则表现为鸡无症状突然死亡，张口呼吸、嗜睡，嗉囊积液、粪便呈黄绿色，但这种最急性型的新城疫已不多见。常见的是急性、亚急性的新城疫，表现为离群呆立、闭目缩颈、呈瞌睡状，发出呼噜声和甩头症状，倒提病禽会有酸水或粘液从口鼻流出，部分鸡拉绿色稀粪，病程长的病鸡会出现神经症状，多呈现渐进死亡。

1.4病理变化

高致病性禽流感主要是全身败血症变化，各内脏器官广泛性充血、出血。以肝肿大淤血、出血，肺淤血、出血、水肿，肌胃角质层有出血点，十二指肠出血，胰腺坏死。而新城疫剖检主要病变在消化道，腺胃粘膜水肿、出血，盲肠肿大出血，其他肠段粘膜及泄殖腔出血。

1.5高致病性禽流感和新城疫的鉴别要点

2 实验室诊断

由于急性新城疫和高致病性禽流感的症状非常相似，根据临床症状和解剖变化很难确诊，若确诊需要进行病毒分离鉴定和实验室诊断。

2.1病毒的分离和鉴定

2.1.1病料采集 高致病性禽流感病毒：主要在呼吸道和脑组织中采集病料；新城疫病毒：活禽主要采集泄殖腔和气管部位病料，死禽则主要采集脑组织，其次也可以采集心、肝、脾等内脏器官。

2.1.2接种鸡胚 高致病性禽流感病毒：病毒能在9～11日龄鸡胚中生长，可在鸡胚中达到较高滴度。将禽流感病毒接种于9～11日龄鸡胚中，无菌收集接种后24～96h的尿囊液，若鸡胚在24h内死亡，则不收集尿囊液，弃掉。通过血液凝集试验来检测尿囊液中是否含有高致病性禽流感病毒，即尿囊液中含有禽流感病毒，则可以凝集鸡的红细胞。若初次分离不到病毒，可盲传2代再进行检测，若盲传3～5代，仍不能凝集红细胞，则判断为阴性；新城疫病毒：需要接种于7～9日龄的SPF鸡胚，无菌收集接种后4～7d的尿囊液。通过血液凝集试验和血液凝集抑制试验（HA-HI试验）来检测尿囊液中是否有新城疫病毒。

2.1.3病毒的鉴定 新城疫病毒具有凝集禽类和某些哺乳动物红细胞的特性。首先通过血液凝集试验（HA）检测所分离的病料是否有血凝特性；若病料能够凝集鸡的红细胞，则需通过血液凝集抑制试验（HI）进一步检测是否为新城疫病毒，即利用已知的抗新城疫病毒血清进行血液凝抑制试验（HI），若抗新城疫病毒血清能够抑制分离的病毒凝集红细胞，则证明该病毒是新城疫病毒。HI试验除可以鉴定病毒外，还可以检测感染鸡群的血清中是否有抑制红细胞凝集的抗体。如果可疑病鸡的血清能抑制新城疫病毒对红细胞的凝集，即可判定该鸡血清中含有新城疫抗体。感染鸡群一般在感染后10～15天，HI抗体效价可达1∶1280。通过双血清法即比较鸡群发病前后两次血清中HI抗体效价的变化，即可确定是否有新城疫感染。如果一个鸡群在发病前HI抗体平均值为1∶32～64，15天后HI抗体效价平均值为1∶512～1024，则证明该鸡群已感染新城疫强毒。

若鸡胚尿囊液或细胞培养液对鸡的红细胞有血凝活性时，则应先用新城疫病毒抗血清做血凝抑制试验，来判定是新城疫感染还是禽流感感染。若是禽流感感染，则需要用特定的抗禽流感血清来判断禽流感病毒的HA亚型和NA亚型。

2.2血清学诊断方法

2.2.1禽流感和新城疫在检测过程中操作方法基本相同，即通过血凝和血凝抑制试验（HA-HI试验），其主要区别：禽流感病毒亚型比较多，并且各亚型之间交叉保护性比较差，而新城疫只有一种血清型，因此检测禽流感时需要分别检测。若怀疑其他型存在，则必须做其他亚型诊断。若以诊断为目的，则可用血凝抑制试验（HI试验）和ELISA做血清学检查。利用双血清法即采集急性期和恢复期双份血清，当出现4倍以上HI抗体升高时，即可确诊为禽流感感染。

2.2.2血凝和血凝抑制试验的局限性 用于检测免疫群的抗体，不能区分感染与免疫；对感染后发病、死亡率高的高致病性禽流感，往往检测不到抗体。

3 结语

禽流感和新城疫不仅对养禽业的影响巨大，而且禽流感对人类的健康造成越来越大的威胁。在对两种疫病提高警惕的同时，应建立更敏感、准确、快速的检测方法用于流行病学监测。另外，应注意将一般传染病和禽流感与新城疫进行区别，以减少不必要的损失。

参考文献

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作者简介：吴荣华，中专学历，兽医师；吕英然，硕士研究生，畜牧兽医讲师，研究方向：兽医微生物与免疫学。