刘英翠

(1.山西省林业科学研究院，山西 太原 030012;2.国家林业局沙棘工程技术研究中心，山西 太原 030012)

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 试材

试验所用沙棘叶采自山西省右玉县，干燥粉碎后过80目筛密封备用。

1.1.2 仪器

超声波清洗器(KQ-200VDE)，紫外可见分光光度计(上海仪电UV-752N)，分析天平(AEG-80SM)，离心机(Centrisart D-16C)，水浴锅(CS501)，电热鼓风干燥箱(GZX-9070MBE)。

1.1.3 试剂

芦丁标准品(成都思科华生物技术有限公司)，乙醇、氢氧化钠、硝酸铝、亚硝酸钠等试剂(分析纯)，复合酶(由纤维素酶与果胶酶组成)。

1.2 方法

1.2.1 标准溶液的配制

准确称取芦丁标准品10 mg，用30%乙醇溶解并定容于50 mL容量瓶中，得浓度为0.2 mg/mL的芦丁标准品溶液。

1.2.2 标准曲线的绘制

分别吸取芦丁标准品溶液0 mL，1 mL，2 mL，3 mL，4 mL，5 mL，6 mL于25 mL容量瓶中，各加30%乙醇至6 mL，加入5% NaNO2溶液1 mL，摇匀静置6 min.再加入10% Al(NO3)3溶液1 mL，摇匀静置6 min.再加4% NaOH溶液10 mL，最后用30%乙醇定容至刻度，摇匀静置15 min.以试剂作为空白参比，在最大吸收波长500 nm处测定吸光度(见表1)。以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线(图1)，得到回归方程：

y=11.691 0 x+0.007 8，R2=0.999 7.

图1 芦丁标准曲线

1.2.3 黄酮的提取

1.2.3.1 水回流提取法

准确称取干燥的沙棘叶粉末2 g于烧瓶中，加入蒸馏水30 mL，水浴回流提取2次，每次2 h，提取温度85 ℃.合并2次滤液于100 mL容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度，即得供试溶液A.

1.2.3.2 乙醇回流提取法

精确称取干燥的沙棘叶粉末2 g于烧瓶中，加入60%乙醇30 mL，水浴回流2次，每次2 h，水浴温度60 ℃，冷却后过滤。收集滤液于100 mL容量瓶中，残渣用60%乙醇洗涤，洗液并入容量瓶中，用60%乙醇定容至刻度，摇匀。量取25 mL液体置于50 mL的容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀，即得60%乙醇回流……