吴志豪，王文茜，马瑞民，郑敏

乳腺癌排名女性恶性肿瘤第一位。临床上常用的外科手术、化疗及放疗等手段均有诸多问题。因此寻求一种新的有效的抗癌药物，从而改善患者预后显得尤为迫切。黑种草籽油具有多种生物活性，在哮喘、痢疾、湿疹及高血压等疾病的治疗上有悠久的历史[1]。近年来发现从黑种草籽油中分离出来的主要有效单体―百里醌可有效抑制胰腺癌[2]和前列腺癌[3]、大肠癌[4]等多种肿瘤细胞生长和转移，证实其具有强大的抑癌作用。但百里醌对三阴性乳腺癌的抑制作用却鲜见报道。因此，本研究观察了百里醌对体内外人乳腺癌细胞株 MCF-7生长和凋亡的影响，为临床用药提供了相关实验依据。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 试剂与材料 百里醌（Sigma公司，美国）；胎牛血清、RPMI-1640培养基（Gibco公司，美国）；CCK-8试剂盒（碧云天生物技术研究所）；Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒（南京凯基生物发展有限公司）。Ki-67、survivin抗体（北京中杉金桥生物技术公司）；百里醌用无水乙醇配制成10 mmol/L，－20℃冰箱保存，用时用不含血清的RPMI-1640培养基稀释成所需浓度。

1.2 实验动物 4～6周龄健康BALB/c雌性小鼠购于中科院上海实验动物中心，体质量18～20 g，许可证号：SCXK（沪）2007-0005。饲养于温州医科大学动物实验中心 SPF屏障系统的洁净层流架内（无特定病原体级），室温控制在（25±1）℃，相对湿度40%～60%。

1.3 方法

1.3.1 细胞培养 人乳腺癌细胞株 MCF-7购自ATCC，培养在含l0%胎牛血清、浓度100 U/ml青霉素和100g/ml链霉素的RPMI-1640培养液中，37℃、5%的CO2条件下培养。细胞单层贴壁生长，至70%～80%融合时胰蛋白酶消化传代。

1.3.2 CCK-8法检测细胞增殖 各组细胞经百里醌作用24 h后以0.05%胰蛋白酶消化收集贴壁细胞，调整细胞浓度为5×105/ml，接种于96孔细胞培养板中，每孔10l。……