李杰 覃智芳 何成龙 黄鸿 何沙金 颜彦

【摘要】目的：分析自发性高血压大鼠主动脉结构重构的microRNA-195和BCL-2、Bax作用机制。方法：选取SPF/VAF级16只雄性SHR大鼠及16只Wistar大鼠，随机分16只SHR大鼠为两组，即实验组和对照组，每组8只；分16只Wistar大鼠为两组，即实验组和对照组，每组8只。实验组SHR大鼠、Wistar大鼠均灌服10mg/kg/d贝那普利，4周为1疗程，共干预2个疗程。结果：干预前SHR实验组、SHR对照组大鼠的尾动脉收缩压、舒张压均显著高于Wistar实验组、Wistar对照组（P<0.05），干预后SHR实验组、SHR对照组大鼠的尾动脉收缩压、舒张压均显著高于Wistar实验组、Wistar对照组（P<0.05），而SHR实验组大鼠的尾动脉收缩压、舒张压均显著低于SHR对照组（P<0.05）。Wistar组大鼠具有均一的主动脉内膜，其与平滑肌细胞均没有增生，中膜层弹力纤维、血管管壁均没有增厚，具有有序的排列；SHR对照组大鼠具有不均匀增厚的主动脉内膜、紊乱的结构，血管中膜平滑肌细胞、弹力纤维、血管壁分别增生肥厚、增厚、增厚。SHR实验组、Wistar实验组、Wistar对照组大鼠的主动脉心态结构之间的差异均不显著。干预后SHR实验组大鼠的主动脉microRNA-195表达显著高于SHR对照组（P<0.05），Wistar实验组大鼠的主动脉microRNA-195表达显著高于Wistar对照组（P<0.05）；SHR实验组大鼠的microRNA-195显著高于Wistar实验组（P<0.05）。SHR实验组大鼠的主动脉BCL2 mRNA表达显著低于SHR对照组（P<0.05）；Wistar实验组大鼠的主动脉BCL2 mRNA显著低于Wistar对照组（P<0.05）。SHR实验组大鼠的主动脉Bax mRNA表达显著高于SHR对照组、Wistar实验组、Wistar对照组（P<0.05），SHR对照组大鼠的主动脉Bax mRNA表达显著高于Wistar对照组（P<0.05）。干预后SHR实验组、SHR对照组大鼠的主动脉BCL2蛋白表达均显著高于Wistar实验组（P<0.05），SHR实验组大鼠的主动脉BCL2蛋白表达显著低于SHR对照组（P<0.05），Wistar实验组大鼠的主动脉BCL2蛋白表达显著低于Wistar对照组（P<0.05）。结论：microRNA-195可能通过对BCL2/Bax表达进行调节对SHR大鼠的主动脉结构性重构进行抑制，贝那普利干预可能能够促进microRNA-195表达。

【关键词】自发性高血压大鼠 主动脉结构重构 microRNA-195 BCL2/Bax 作用机制

本研究分析了自发性高血压大鼠主动脉结构重构的microRNA-195和BCL-2、Bax作用机制，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

实验动物：购买16只雄性SHR大鼠及16只Wistar大鼠，均为8周龄，平均体质量分别为（200±10）g、（260±10）g。在我院动物实验中心SPF级动物房饲养，将环境温度、光照周期、湿度分别设定为20℃-240C、12/12h、55%-65%，让其标准实验室饮食，自由饮水。

1.2 方法

随机分16只SHR大鼠为两组，即实验组和对照组，每组8只；分16只Wistar大鼠为两组，即实验组和对照组，每组8只。实验组SHR大鼠、Wistar大鼠均灌服10mg/kg/d贝那普利[1]，4周为1疗程，共干预2个疗程。

1.3 观察指标

干预前后分别对各组鼠尾动脉血压进行测量，干预2个疗程后股动脉放血将大鼠处死，HE染色对主动脉形态学改变进行观察，运用实时荧光定量多聚酶链式反应（qRT-PCR）法对其microRNA-195和BCL-2、Bax mRNA表达进行检测，运用免疫印迹法（Western blot）对BCL-2、Bax蛋白表达量进行测量降[2-7]。

1.4 统计学分析

采用SPSS21.0，计量资料用（x±s）表示，用t检验，检验水准α=0.05。

2 结果

2.1 各组大鼠干预前后的尾动脉血压变化情况比较

干预前SHR实验组、SHR对照组大鼠的尾动脉收缩压、舒张压均显著高于Wistar实验组、Wistar对照组（P<0.05），干预后SHR实验组、SHR对照组大鼠的尾动脉收缩压、舒张压均显著高于Wistar实验组、Wistar对照组（P<0.05），而SHR实验组大鼠的尾动脉收缩压、舒张压均显著低于SHR对照组（P<0.05），具体见表1。

2.2 各组大鼠的主动脉形态结构比较

Wistar组大鼠具有均一的主动脉内膜，其与平滑肌细胞均没有增生，中膜层弹力纤维、血管管壁均没有增厚，具有有序的排列；SHR对照组大鼠具有不均匀增厚的主动脉内膜、紊乱的结构，血管中膜平滑肌细胞、弹力纤维、血管壁分别增生肥厚、增厚、增厚。SHR实验组、Wistar实验组、Wistar对照组大鼠的主动脉心态结构之间的差异均不显著。具体见图1。

2.3各 组大鼠干预后动脉皿croRNA-195和BCL-2、Bax mRNA表达比较

干预后SHR实验组大鼠的主动脉microRNA-195表達显著高于SHR对照组（P<0.05），Wistar实验组大鼠的主动脉microRNA-195表达显著高于Wistar对照组（P<0.05）；SHR实验组大鼠的microRNA-195显著高于Wistar实验组（P<0.05）。SHR实验组大鼠的主动脉BCL2 mRNA表达显著低于SHR对照组（P<0.05）；Wistar实验组大鼠的主动脉BCL2 mRNA显著低于Wistar对照组（P<0.05）。SHR实验组大鼠的主动脉Bax mRNA表达显著高于SHR对照组、Wistar实验组、Wistar对照组（P<0.05），SHR对照组大鼠的主动脉Bax mRNA表达显著高于Wistar对照组（P<0.05）。具体见图2-图4。

2.4 各组大鼠干预后的BCL2、Bax蛋白表达差异比较

干预后SHR实验组、SHR对照组大鼠的主动脉BCL2蛋白表达均显著高于Wistar实验组（P<0.05），SHR实验组大鼠的主动脉BCL-2蛋白表达显著低于SUR对照组（P<0.05），Wistar实验组大鼠的主动脉BCL2蛋白表达显著低于Wistar对照组（P<0.05）；SUR实验组、SUR对照组、Wistar实验组、Wistar对照组大鼠的主动脉Bax表达之间的差异均不显著（P>0.05）。具体见图5-图6。

3 讨论

本研究结果表明，microRNA-195可能通过对BCL-2、Bax表达进行调节对SUR大鼠的主动脉结构性重构进行抑制，贝那普利干预可能能够促进microRNA-195表达，值得临床充分重视。

参考文献

[1]王建.葡萄籽原花青素对自发性高血压大鼠血管重构的保护作用[J].山东大学，2016.

[2]王卫卫.缝隙连接蛋白在高血压左心房重构中的作用及培哚普利干预研究[D].河班医科大学，2015.

[3]王维.NF-κB信号通路参与介导的自噬在高血压大鼠心血管重构的作用研究[J].山东大学，2015.

[4]梁英.高血压小血管重构的特征性改变及葡萄籽原花青素保护作用的机制研究[J].山东大学，2017.

[5]刘春，周立华.疾癣清方对自发性高血压大鼠血压及动脉重构的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志，2017，15（07）：794-798.

[6]万明慧，宋伟国，梁英等.高血压大鼠大小动脉血管重构的差异比较[J].中国病理生理杂志，2017，33（09）：1564-1573.

[7]孙荣，易东，谈世进等.性激素对卵巢切除自发性高血压大鼠心脏组织结构的影响[J].山东医药，2016，56（17）：31-33.